液相色譜和毛細管電泳-閱讀頁
2025-05-18 05:31本頁面
【正文】 長度 ≤1m 電場作用下 ， 毛細管柱中出現(xiàn)電泳現(xiàn)象和電滲現(xiàn)象 ? 帶電粒子的遷移速度 =電泳 +電滲流；兩種速度的矢量和 ? 陽離子：兩種效應的運動方向一致 ， 在負極最先流出 ? 中性粒子無電泳現(xiàn)象 ， 受電滲流影響 ， 在陽離子后流出 ? 陰離子：兩種效應的運動方向相反 。 ⑴ 儀器簡單、易自動化 電源、毛細管、檢測器、緩沖溶液瓶（電極瓶） ⑵ 分析速度快、分離效率高 在 36種無機及有機陰離子， 24種陽離子；分離柱效： 105～ 107/m理論塔板數(shù) ⑶ 操作方便、運耗費低 進樣量極少，在水介質(zhì)中進行 ⑷ 應用范圍極廣 有機物、無機物、生物、中性分子、生物大分子等 分子生物學、醫(yī)學、藥學、化學、環(huán)境保護、材料等 1592 分離模式 帶電粒子的遷移速度 =電泳和電滲流速度的矢量和 陽離子：兩種效應的運動方向一致，在負極最先流出 中性粒子：無電泳現(xiàn)象，受電滲流影響，在陽離子后流出 陰離子：最后流出 同種類離子由于荷質(zhì)比的不同而被分離 最基本、應用 最 廣的分離模式 CZE （ 1） 緩沖溶液中加入離子型表面活性劑，其濃度達到臨界濃度，形成一疏水內(nèi)核、外部帶負電的膠束 （ MECC、 MEKC） 在電場力的作用下，膠束在柱中移動 （ 2）電泳和電滲流的方向相反，且 ν電滲流 ν電泳 ，負電膠束以較慢的速度向負極移動 （ 3）中性分子在膠束相和溶液（水相）間分配，疏水性強的組分與膠束結(jié)合的較牢，流出時間晚 （ 4）可用來分離中性物質(zhì)，擴展了高效毛細管電泳的應用范圍 在毛細管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的固定液，以電滲流為流動相，試樣組分在兩相間的分配為分離機理的電動色譜過程 目前電色譜采用填充柱、開管柱、整體柱等 CEC 一、離子分析 離子遷移方向和電滲流方向一致； 24多種金屬離子 陽極進樣，陰極檢測 1592 分離分析實例 加入電滲流改性劑，如：十六烷基三甲基溴化胺等，使電泳方向和電滲流方向一致，可在 36種陰離子 陰極進樣，陽極檢測 二、藥物分析 檢測體液或細胞中某些代謝產(chǎn)物的分析 尿液中的氨基酸含量作為臨床診斷糖尿病的輔助手段 采用毛細管區(qū)帶電泳方式，在 11min內(nèi)分離 17種藥物 采用 MEKC模式，鑒定違禁藥物；效果優(yōu)于HPLC法 三、手性化合物分析 HPCE分離分析手性化合物的方法：加入手性選擇劑； 形成配合物的穩(wěn)定常數(shù)有差異，結(jié)合 HPCE的高分離效率 常用手性選擇劑：環(huán)糊精及其衍生物；手性冠醚；手性表面活性劑（氨基酸衍生物、膽酸鈉、?；敲撗跄懰峒捌溻c鹽、低聚糖等天然手性表面活性劑） 四、氨基酸與蛋白質(zhì)分析 采用 MEKC模式，在 25分鐘內(nèi)分離了 23種丹?；被? HPCE可取代傳統(tǒng)的氨基酸分析儀 蛋白質(zhì)分析 五、核酸分析及 DNA排序 重要分析手段 如圖，酶解的雙螺旋 DNA限制性片段的分離 進展 整體化學分析系統(tǒng)（ TAS） 及 TAS微型化 在硅片上光刻出矩形槽作為毛細管 ， 理論塔板數(shù) 105/m； CEMS 應用于人類基因 DNA測序； 5～ 10萬個基因， 30億個堿基對，目前最有效的 DNA序列分析儀， 10小時 /次；可同時電泳 24個樣品；速度 1200堿基對 /小時，提高速度 100支毛細管陣列電泳；速度 280堿基對 /小時 /支
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