【正文】 a a T b???溫度范圍較窄時，可以寫成下式：2022/2/17 28 用 2， 2， 5－三甲基戊烷 /甲基環(huán)戊烷物質對試驗數據如下： 2022/2/17 29 ? 當柱溫從 95℃ 降至 74 ℃ 時，容量因子增大89％，而相對保留值僅增大 ％。 ? 結論： ? 降低柱溫，可增大容量因子，改善分離度，但降低柱溫要適當，以保留時間合適和不脫尾為宜。 2022/2/17 30 五、 毛細管柱氣相色譜系統 ? （一） 進樣系統 ? 進樣器（樣品導入部件）進樣系統 ? 分流器 分流比閥 ? 針形閥和電磁閥 2022/2/17 31 2022/2/17 32 ? 毛細管柱色譜進樣方式分為兩類： ? 分流進樣和不分流進樣。 ? 1. 分流進樣法 ? 讓較大體積的樣品先進到流量較大的載氣中，汽化后，將混合物分流成兩個流量懸殊的部分，只將其中較小的部分送進柱子，這就叫分流進樣。 ? （ 1）分流比的測定 ? 分流比為進柱的樣品組分的物質的量與放空的樣品組分物質的量之間的相對值。 ? 分流比 =Fc / Fv ? 也有把分流比定義為樣品進入汽化室后 ， 進樣器中總的流速 （ Fc + Fv） 與柱流速之比 。 ? Fc和 Fv可以通過一個合適的泡沫流量計測量 ，由于載氣通過毛細管柱的流量很小 ， 用泡沫流量計不易測量 ， Fc也可以通過計算求出 。分流比的大小靠分流閥260 rFc ?? ??2022/2/17 37 （ 2）分流進樣器的線性 ? ? 所謂線性分流是指樣品組分經過分流器分出的一小部分的量進入柱子時，它能夠代表原樣品中組分的含量 。 2022/2/17 38 ? 線性不好的分流進樣器 ， 往往使被分流進入柱子的組分含量與原始樣品中組分的含量不同 ， 即產生樣品的失真 。 分流比常在1:（ 100～ 200） 下進行 。 ? 由圖可以看出 ， 在分流比小于 1： 100時 ，樣品失真 。 ? 當分流比提高到 1： 100以上時 ， 所有組分的分流線性都變好了 。 2022/2/17 41 ③ 分流進樣器的溫度 ? 分流進樣器的溫度應接近于樣品中沸點最高的組分的沸點溫度。 ? 當分析的是對熱不穩(wěn)定的樣品時 ， 不能使用較高的進樣溫度 ， 可以用提高分流比的辦法或其他進樣方法來減小樣品組分失真的程度 。 ? 使樣品和載氣在汽化室中充分混合均勻的有效辦法是在汽化室內松散地填充玻璃毛或者玻璃珠 。 2022/2/17 43 ⑤ 進樣體積對樣品組分失真的影響 ? 當進樣體積很小時，由于注射器體積的消耗，相對來說，往往是樣品中易揮發(fā)的組分比不易揮發(fā)組分進入色譜柱多。 ? 進樣體積小于 ， 對寬沸程范圍的樣品 ， 用分流進樣法不能做定量分析 。 它在分析高濃度的組分 （ 濃度范圍在 %~10%） 以及各組分的濃度分布均勻的樣品可以得到很好的定量結果 ，分流進樣法的優(yōu)點： ? ① 在高分流比下 （ 分流比高于 1：100） ， 樣品起始組分的譜帶擴展很小 ，出峰尖銳 。能根據所用樣品的體積和濃度，很容易地調節(jié)分流比值。 用自動進樣法可以得到重復性很好的保留時間和精度較高的定量結果 。 2022/2/17 46 分流進樣法缺點： ? ① 當分析的樣品組分濃度范圍較寬，沸點范圍也寬時產生分流失真； ? ②濃度低和沸點高的組分樣品回收率低，定量的精密度差； ? ③不適宜于痕量分析； ? ④ 當在高分流比時載氣消耗量大 ， 測定的精密度和準確度依賴于進樣的操作技術和重復性 。 不分流進樣技術是由 Grob等提出 ， 所以又稱為Grob不分流進樣技術 。 因此 ， 它在天然產物 、 食品 、 香料 、 生物代謝物質 、 藥品和環(huán)境樣品等高度稀釋溶液的痕量和超痕量分析中得到了廣泛應用 。 2022/2/17 49 ? ① 采用較低的汽化室溫度和進樣速度 ， 避免汽化室的嚴重過載 ， 因此允許使用較大的進樣量 。 ? ③ 進樣墊片清洗措施克服了進樣器內部的吸附 、 溶劑峰的擴展和拖尾現象 。 特別適用于有機溶劑稀溶液樣品的直接分析 。適于熱敏感性及極性樣品分析 ， 進樣墊使用壽命較長 。 ? ④ 對各組分含量懸殊不大的多組分混合物 ， 若可以用低起始柱溫的程序升溫方式時 ， 也可以采用不分流進樣 。 2022/2/17 52 2） 使用局限性 ? 常量分析樣品（約 200μ g/ml以上）應事先用適當溶劑稀釋到 104~105 ； ? 溶劑純度要求高，沸點至少應比最先流出的組分沸點低 20℃ ； ? 時間短于溶劑峰的組分無法利用溶劑效應； 2022/2/17 53 ? 分子量高過下列物質的樣品不宜使用： ? 正構烷為 C36，甲酸甲酯類為 C80，多環(huán)芳烴為六苯并苯； ? 流出較早物質的保留時間重復性較差，其精度取決于進樣量的重復性； ? 定量精確度與較多的操作因素有關。 ? 當樣品被引入到溫度比溶劑沸點低20～ 40℃ 的柱入口時 ， 樣品中的溶劑便首先沿著載氣方向在柱入口冷凝成一層越來越厚的臨時性液膜 （ 冷凝溶劑區(qū)或冷凝溶劑譜帶 ） ， 2022/2/17 55 ? 造成該區(qū)內相比 β 隨液層厚度增加而呈現 “ 表現性 ” 遞減 ， 從而迫使容量因子 k明顯增大 ， 結果導致樣品組分在溶劑區(qū)中的溶解保留作用相應增大 。 上述這個現象就叫溶劑效應 。 ? 最重要的參數是樣品量、溶劑選擇、注射速度、吹洗汽化室的時間、汽化室溫度、起始柱溫、載氣種類和流速。 ? 當所用的溶劑沸點比柱溫低時，溶劑在柱頭不冷凝，就起不到溶劑效應的作用； 2022/2/17 58 ? 如果所用溶劑的沸點太高，則溶劑與樣品組分的分離會遇到困難； ? 一般所用溶劑的沸點比程序升溫時的起始柱溫高 20~30℃ 為宜。 因此 ， 所謂操作條件的選擇主要是如何獲得理想溶劑效應的條件選擇 。 ? 如果上述三個因素的最佳值都不清楚 ， 則應先在溶劑沸點以下 10~20℃的柱溫下用注射 1μ l樣品開始試驗 ， 如此時溶劑效應不足 （ 早出的峰過寬 ） ，則宜慢慢降低柱溫或增大進樣量 ， 一旦獲得滿意的分離效果后即應立即停止試驗 。 ? 直接進樣法樣品可以不經過稀釋，直接進入汽化室汽化，再進入柱內。 由于樣品直接進入柱內 ， 常使用柱容量大的大口徑毛細管柱 （ 一般 ~ ） 。 進大量樣品時 （ 大于 l） ， 使用程序升溫操作 。 2022/2/17 63 柱頭進樣法 ? 柱頭進樣法是特制的微量注射器（ 具有非常細的注射針頭 ， 外徑約， 常用石英或不銹鋼制備 ） ，將樣品直接注入到柱的頂端 。 樣品柱入柱頭后 ， 然后程序升溫對樣品進行分離 。 首先使樣品在柱頭進行預濃縮 ， 然后再進行色譜分離 ， 因此對沸點范圍寬的樣品可以得到非常好的重復性和定量準確度 。 2022/2/17 66 進樣方法的選擇 ? 選擇進樣方法，要根