液相色譜和毛細管電泳-在線瀏覽
2025-06-20 05:31本頁面
【正文】 流動相：陰離子離子交換樹脂作固定相 ， 采用酸性水溶液；陽離子離子交換樹脂作固定相 ， 采用堿性水溶液 基本原理：組分在固定相上發(fā)生的反復離子交換反應；組分與離子交換劑之間親和力的大小與離子半徑 、 電荷 、 存在形式等有關 。 小分子可以擴散到凝膠空隙 ， 由其中通過 ， 出峰最慢；中等分子只能通過部分凝膠空隙 ， 中速通過；而大分子被排斥在外 ， 出峰最快；溶劑分子小 ， 故在最后出峰 全部在死體積前出峰； 可對相對分子質(zhì)量在 100105范圍內(nèi)的化合物按質(zhì)量分離 1535 化學鍵合相色譜 化學鍵合固定相： （將各種不同基團通過化學反應鍵合到硅膠（擔體）表面的游離羥基上，如 C18柱（反相柱） 流動相的極性小于固定液的極性，稱為 正相 色譜（ normal phase） 流動相的極性大于固定液的極性，稱為 反相 色譜（ reverse phase） 根據(jù)化學鍵合相與流動相極性的相對強度，分為正相與反相色譜 化學鍵合固定相 : 目前應用最廣 、 性能最佳的固定相 a. 硅氧碳鍵型： ≡Si— O— C b. 硅氧硅碳鍵型： ≡Si— O— Si — C 穩(wěn)定 ， 耐水 、 耐光 、 耐有機溶劑 ， 應用最廣 c. 硅碳鍵型： ≡Si— C d. 硅氮鍵型： ≡Si— N 化學鍵合固定相的特點 （ 1） 傳質(zhì)快 ， 表面無深凹陷 ， 比一般液體固定相傳質(zhì)快 （ 2） 壽命長 ， 化學鍵合 ， 無固定液流失 ， 耐流動相沖擊； 耐水 、 耐光 、 耐有機溶劑 ， 穩(wěn)定 （ 4） 選擇性好 ， 可鍵合不同官能團 ， 提高選擇性 （ 5） 有利于梯度洗脫 R： C4, C8, C18 C6H5, CN, NH2 SO3H, COOH, NR4＋ Cl 化學鍵合固定相上鍵合的基團 R有 : HPLC的應用 1. 環(huán)境中有機氯農(nóng)藥殘留量分析 固定相 ： 薄殼型硅膠 (37 ～ 50?m) 流動相：正己烷 流 速： mL/min 色譜柱： 50cm?(內(nèi)徑 ) 檢測器：示差折光檢測器 可對水果、蔬菜中的農(nóng)藥殘留量進行分析 2. 稠環(huán)芳烴的分析 稠環(huán)芳烴多為致癌物質(zhì) 固定相 ： 十八烷基硅烷化鍵合相 流動相： 20%甲醇 水 ～ 100%甲醇 線性梯度淋洗 ， 2%/min 流 速： 1mL/min 柱 溫： 50 186。 結(jié)果：綠原酸峰面積供試品為： ，對照品為： HPLC與 UPLC（ Ultra performance liquid chromatography) 固定相粒徑改變引起的范氏曲線的改變 which shows a separation of eight diuretics in under minutes. The same separation on a by 100mm 5181。 高效毛細管電泳的柱效遠高于高效液相色譜 ， 理論塔板數(shù)高達幾十萬塊 /米 ， 特殊柱子可以達到數(shù)百萬 。L1 2. 毛細管柱 （ 1）材料：石英，涂敷聚酰亞胺，具柔性 （ 2）規(guī)格：內(nèi)徑 50～ 75μm， 外徑 350～ 400μm；
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