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正文內(nèi)容

液相色譜和毛細(xì)管電泳-資料下載頁(yè)

2025-05-03 05:31本頁(yè)面
  

【正文】 兩種速度的矢量和 ? 陽(yáng)離子:兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向一致 , 在負(fù)極最先流出 ? 中性粒子無(wú)電泳現(xiàn)象 , 受電滲流影響 , 在陽(yáng)離子后流出 ? 陰離子:兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向相反 。 ν 電滲流 ν 電泳 時(shí) ,陰離子在負(fù)極最后流出 電滲:由于外加電場(chǎng)對(duì)管壁溶液雙電層的作用而產(chǎn)生的溶液的整體流動(dòng)。 ⑴ 儀器簡(jiǎn)單、易自動(dòng)化 電源、毛細(xì)管、檢測(cè)器、緩沖溶液瓶(電極瓶) ⑵ 分析速度快、分離效率高 在 36種無(wú)機(jī)及有機(jī)陰離子, 24種陽(yáng)離子;分離柱效: 105~ 107/m理論塔板數(shù) ⑶ 操作方便、運(yùn)耗費(fèi)低 進(jìn)樣量極少,在水介質(zhì)中進(jìn)行 ⑷ 應(yīng)用范圍極廣 有機(jī)物、無(wú)機(jī)物、生物、中性分子、生物大分子等 分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、材料等 1592 分離模式 帶電粒子的遷移速度 =電泳和電滲流速度的矢量和 陽(yáng)離子:兩種效應(yīng)的運(yùn)動(dòng)方向一致,在負(fù)極最先流出 中性粒子:無(wú)電泳現(xiàn)象,受電滲流影響,在陽(yáng)離子后流出 陰離子:最后流出 同種類(lèi)離子由于荷質(zhì)比的不同而被分離 最基本、應(yīng)用 最 廣的分離模式 CZE ( 1) 緩沖溶液中加入離子型表面活性劑,其濃度達(dá)到臨界濃度,形成一疏水內(nèi)核、外部帶負(fù)電的膠束 ( MECC、 MEKC) 在電場(chǎng)力的作用下,膠束在柱中移動(dòng) ( 2)電泳和電滲流的方向相反,且 ν電滲流 ν電泳 ,負(fù)電膠束以較慢的速度向負(fù)極移動(dòng) ( 3)中性分子在膠束相和溶液(水相)間分配,疏水性強(qiáng)的組分與膠束結(jié)合的較牢,流出時(shí)間晚 ( 4)可用來(lái)分離中性物質(zhì),擴(kuò)展了高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍 在毛細(xì)管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的固定液,以電滲流為流動(dòng)相,試樣組分在兩相間的分配為分離機(jī)理的電動(dòng)色譜過(guò)程 目前電色譜采用填充柱、開(kāi)管柱、整體柱等 CEC 一、離子分析 離子遷移方向和電滲流方向一致; 24多種金屬離子 陽(yáng)極進(jìn)樣,陰極檢測(cè) 1592 分離分析實(shí)例 加入電滲流改性劑,如:十六烷基三甲基溴化胺等,使電泳方向和電滲流方向一致,可在 36種陰離子 陰極進(jìn)樣,陽(yáng)極檢測(cè) 二、藥物分析 檢測(cè)體液或細(xì)胞中某些代謝產(chǎn)物的分析 尿液中的氨基酸含量作為臨床診斷糖尿病的輔助手段 采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳方式,在 11min內(nèi)分離 17種藥物 采用 MEKC模式,鑒定違禁藥物;效果優(yōu)于HPLC法 三、手性化合物分析 HPCE分離分析手性化合物的方法:加入手性選擇劑; 形成配合物的穩(wěn)定常數(shù)有差異,結(jié)合 HPCE的高分離效率 常用手性選擇劑:環(huán)糊精及其衍生物;手性冠醚;手性表面活性劑(氨基酸衍生物、膽酸鈉、?;敲撗跄懰峒捌溻c鹽、低聚糖等天然手性表面活性劑) 四、氨基酸與蛋白質(zhì)分析 采用 MEKC模式,在 25分鐘內(nèi)分離了 23種丹?;被? HPCE可取代傳統(tǒng)的氨基酸分析儀 蛋白質(zhì)分析 五、核酸分析及 DNA排序 重要分析手段 如圖,酶解的雙螺旋 DNA限制性片段的分離 進(jìn)展 整體化學(xué)分析系統(tǒng)( TAS) 及 TAS微型化 在硅片上光刻出矩形槽作為毛細(xì)管 , 理論塔板數(shù) 105/m; CEMS 應(yīng)用于人類(lèi)基因 DNA測(cè)序; 5~ 10萬(wàn)個(gè)基因, 30億個(gè)堿基對(duì),目前最有效的 DNA序列分析儀, 10小時(shí) /次;可同時(shí)電泳 24個(gè)樣品;速度 1200堿基對(duì) /小時(shí),提高速度 100支毛細(xì)管陣列電泳;速度 280堿基對(duì) /小時(shí) /支
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