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[經(jīng)濟(jì)學(xué)]第五章毛細(xì)管電泳-資料下載頁

2025-01-16 05:38本頁面
  

【正文】 2. 毛細(xì)管內(nèi)充有兩性電解質(zhì)(合成的具有不同等電點(diǎn)范圍的脂肪族多胺基多羧酸混合物),當(dāng)施加直流電壓( 6~ 8V) 時(shí),管內(nèi)將建立一個(gè)由陽極到陰極逐步升高的 pH梯度; 3. 氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽等的所帶電荷與溶液 pH有關(guān),在酸性溶液中帶正電荷,反之帶負(fù)電荷。在其等電點(diǎn)時(shí),呈電中性,淌度為零; 四、毛細(xì)管等電聚焦 capillary isoelectric focusing, CIEF 4. 聚焦:具有不同等電點(diǎn)的生物試樣在電場力的作用下遷移,分別到達(dá)滿足其等電點(diǎn) pH的位置時(shí),呈電中性,停止移動,形成窄溶質(zhì)帶而相互分離; 5. 陽極端裝稀磷酸溶液,陰極端裝稀 NaOH溶液; 6. 加壓將毛細(xì)管內(nèi)分離后的溶液推出經(jīng)過檢測器檢測; 7. 電滲流在 CIEF中不利,應(yīng)消除或減小。 毛細(xì)管電泳的應(yīng)用 陽離子分析 遷移方向和電滲流方向一致; 24種金屬離子; 陽極進(jìn)樣,陰極檢測; 具有很高的靈敏度; 陰離子分析 陰離子電泳方向和電滲流方向相反、速度接近,分析時(shí)間長、效率低; 質(zhì)量小、電荷密度大的離子如: SO4 Cl、 F等,電泳速率大于電滲流,陽極端流出,在陰極端無法檢測; 加入電滲流改性劑,十六烷基三甲基溴化胺等,使電泳方向和電滲流方向一致,可在 36種陰離子;陰極進(jìn)樣,陽極檢測; 離子價(jià)態(tài)及存在形態(tài)分析; 藥物分析 analysis of pharmaceutics 檢測體液或細(xì)胞中某些代謝產(chǎn)物的分析; 尿液中的氨基酸含量作為臨床診斷糖尿病的輔助手段; 采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳方式,在 11min內(nèi)分離 17種藥物; 采用 MEKC模式,鑒定違禁藥物;效果優(yōu)于 HPLG法 手性化合物分析 合成獲得單一手性化合物相當(dāng)困難; 528種手性合成藥物,61中以單一對映體形式銷售,其他為外消旋體;檢測分析也相當(dāng)困難;研究熱點(diǎn); R反應(yīng)停是安眠藥, S式致胎兒畸形; HPCE分離分析手性化合物的方法:加入手性選擇劑; 形成配合物的穩(wěn)定常數(shù)有差異,結(jié)合 HPCE的高效率; 常用手性選擇劑:環(huán)糊精及其衍生物;手性冠醚;手性表面活性劑(氨基酸衍生物、膽酸鈉、?;敲撗跄懰峒捌溻c鹽、低聚糖等天然手性表面活性劑) 氨基酸與蛋白質(zhì)分析 采用 MEKC模式,在 25分鐘內(nèi)分離了 23種丹酰化氨基酸; HPCE可取代傳統(tǒng)的氨基酸分析儀; 問題:吸附和檢測; 蛋白質(zhì)分析 核酸分析及 DNA排序 analysis of nucleic acids and sequence of DNA 重要分析手段; 圖,酶解的雙螺旋DNA限制性片段的分離; 新進(jìn)展 advances and special topics 整體化學(xué)分析系統(tǒng)( TAS) 及 TAS微型化 在硅片上光刻出矩形槽作為毛細(xì)管 , 理論塔板數(shù) 105/m; CEMS; 應(yīng)用于人類基因 DNA測序; 5~ 10萬個(gè)基因, 30億個(gè)堿基對,目前最有效的 DNA序列分析儀, 10小時(shí) /次;可同時(shí)電泳 24個(gè)樣品;速度 1200堿基對/小時(shí),提高速度! 100支毛細(xì)管陣列電泳;速度 280堿基對 /小時(shí) /支 Thank you!
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