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正文內(nèi)容

液相色譜和毛細(xì)管電泳(編輯修改稿)

2025-05-30 05:31 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 1532 液 液分配色譜 固定相與流動(dòng)相均為液體 ( 互不相溶 ) 基本原理: 組分在固定相和流動(dòng)相上的分配 固定相: 早期涂漬固定液 , 固定液流失 , 現(xiàn)較少采用 流動(dòng)相: 極性或非極性溶劑均可 分配色譜法使用的固定液 正相分配色譜法的固定液 反相分配色譜的固定液 β, β氧二丙烷 1,2,3三 (2氯乙氧基 )丙烷 聚乙二醇 400,600 甘油 ,丙二醇 冰乙酸 乙二醇 乙二酸 二甲基亞砜 硝基甲烷 二甲基甲酰胺 甲基硅酮 氰丙基硅酮 聚烯烴 正庚烷 1533 離子交換色譜 固定相:陰離子離子交換樹(shù)脂或陽(yáng)離子離子交換樹(shù)脂 流動(dòng)相:陰離子離子交換樹(shù)脂作固定相 , 采用酸性水溶液;陽(yáng)離子離子交換樹(shù)脂作固定相 , 采用堿性水溶液 基本原理:組分在固定相上發(fā)生的反復(fù)離子交換反應(yīng);組分與離子交換劑之間親和力的大小與離子半徑 、 電荷 、 存在形式等有關(guān) 。 親和力大 , 保留時(shí)間長(zhǎng) 陽(yáng)離子交換: R— SO3H +M+ = R— SO3 M + H + 陰離子交換: R— NR4OH +X = R— NR4 X + OH 應(yīng)用:離子及可解離的化合物 , 氨基酸 、 核酸等 1534 排阻色譜色譜 固定相:凝膠 (具有一定大小孔隙分布 ) 原理: 按分子大小分離 。 小分子可以擴(kuò)散到凝膠空隙 , 由其中通過(guò) , 出峰最慢;中等分子只能通過(guò)部分凝膠空隙 , 中速通過(guò);而大分子被排斥在外 , 出峰最快;溶劑分子小 , 故在最后出峰 全部在死體積前出峰; 可對(duì)相對(duì)分子質(zhì)量在 100105范圍內(nèi)的化合物按質(zhì)量分離 1535 化學(xué)鍵合相色譜 化學(xué)鍵合固定相: (將各種不同基團(tuán)通過(guò)化學(xué)反應(yīng)鍵合到硅膠(擔(dān)體)表面的游離羥基上,如 C18柱(反相柱) 流動(dòng)相的極性小于固定液的極性,稱(chēng)為 正相 色譜( normal phase) 流動(dòng)相的極性大于固定液的極性,稱(chēng)為 反相 色譜( reverse phase) 根據(jù)化學(xué)鍵合相與流動(dòng)相極性的相對(duì)強(qiáng)度,分為正相與反相色譜 化學(xué)鍵合固定相 : 目前應(yīng)用最廣 、 性能最佳的固定相 a. 硅氧碳鍵型: ≡Si— O— C b. 硅氧硅碳鍵型: ≡Si— O— Si — C 穩(wěn)定 , 耐水 、 耐光 、 耐有機(jī)溶劑 , 應(yīng)用最廣 c. 硅碳鍵型: ≡Si— C d. 硅氮鍵型: ≡Si— N 化學(xué)鍵合固定相的特點(diǎn) ( 1) 傳質(zhì)快 , 表面無(wú)深凹陷 , 比一般液體固定相傳質(zhì)快 ( 2) 壽命長(zhǎng) , 化學(xué)鍵合 , 無(wú)固定液流失 , 耐流動(dòng)相沖擊; 耐水 、 耐光 、 耐有機(jī)溶劑 , 穩(wěn)定 ( 4) 選擇性好 , 可鍵合不同官能團(tuán) , 提高選擇性 ( 5) 有利于梯度洗脫 R: C4, C8, C18 C6H5, CN, NH2 SO3H, COOH, NR4+ Cl 化學(xué)鍵合固定相上鍵合的基團(tuán) R有 : HPLC的應(yīng)用 1. 環(huán)境中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量分析 固定相 : 薄殼型硅膠 (37 ~ 50?m)
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