色譜分析法引論ppt課件-在線瀏覽
2025-06-20 04:35本頁面
【正文】 體吸附劑在玻璃板或塑料板上制成薄層作固定相。 紙色譜和薄層色譜總稱 平面色譜 ，平面色譜是靠濾紙或硅膠層的毛細(xì)管作用將流動(dòng)相從一端吸上來，使樣品組分得以分離。 ? 分配色譜法： 用液體作固定相 ，利用不同組分在液體固定相和流動(dòng)相中的 溶解度不同 ，因而 分配系數(shù)不同 而進(jìn)行分離的色譜法，包括氣 液分配色譜法和液 液分配色譜法。只有液相離子交換色譜。只有液相凝膠色譜。 三、色譜分離過程 ? 以分離 A、 B兩組分的氣 固吸附色譜為例： ? 當(dāng)試樣由載氣攜帶進(jìn)入色譜柱與固定相接觸時(shí)，被固定相吸附； 色譜分離過程 ? 隨著流動(dòng)相的不斷流入，被吸附的組分又從固定相中脫附； ? 脫附的組分隨著載氣向前移動(dòng)時(shí)又再次被固定相吸附。 ? 在這個(gè)過程中，各組分與固定相間的吸附作用不同，因而吸附與脫附的速度和次序不同而產(chǎn)生微小的分離，隨著載氣的流動(dòng)，吸附與脫附的過程反復(fù)進(jìn)行，微小的分離被多次累加，最終達(dá)到分離。 ? （ 1）分離效率高： 復(fù)雜混合物，有機(jī)同系物、異構(gòu)體、手性異構(gòu)體。 ? （ 3）分析速度快： 一般在幾分鐘或幾十分鐘內(nèi)可以完成一個(gè)復(fù)雜試樣的分析。 ? （ 5）應(yīng)用范圍廣： 它幾乎可用于所有化合物的分離和測(cè)定，無論是有機(jī)物、無機(jī)物、低分子或高分子化合物，甚至有生物活性的生物大分子也可以進(jìn)行分離和測(cè)定。 ? 液相色譜：高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定、生物試樣的分離分析。 ? 不足之處： 被分離組分的定性較為困難。 ? 在色譜流出曲線上，檢測(cè)器檢測(cè)到的待測(cè)組分的濃度（或含量）表現(xiàn)為峰狀，稱為 色譜峰 ， 每一分離出的組分表現(xiàn)為一個(gè)色譜峰。 二、色譜參數(shù)和術(shù)語 ? 基線 ? 當(dāng)沒有試樣組分而僅有流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱時(shí)，在實(shí)驗(yàn)操作條件下，反映檢測(cè)器系統(tǒng)噪聲隨時(shí)間變化的線稱為 基線 。 圖中的 OQ即為流出曲線的基線 峰高 (h)和峰面積 (A) ? 峰高 是指色譜峰頂點(diǎn)到基線的垂直距離，以 h表示。 ? 意義： 峰高或峰面積的大小和每個(gè)組分在樣品中的含量相關(guān)，因此 色譜峰的峰高或峰面積是色譜法進(jìn)行定量分析的主要依據(jù)。 ? 在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，任何一種物質(zhì)都有一定的保留值。 （ 1）用時(shí)間來表示保留值 ? ① 死時(shí)間（ tM）： 不與固定相作用的物質(zhì)（如空氣）從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰極大值時(shí)的時(shí)間， 它與色譜柱的空隙體積有關(guān) 。 ② 保留時(shí)間（ tR）： ? 試樣中某組分的保留時(shí)間指 從進(jìn)樣到出現(xiàn)其色譜峰極大值時(shí)的時(shí)間 。 tR可作為色譜鋒位置的標(biāo)志 。 t’R = tR tM ? t’R反映了被分析的組分因與色譜柱中固定相發(fā)生相互作用，而在色譜柱中滯留的時(shí)間，它更確切地表達(dá)了被分析組分的保留特性，因而 是色譜定性分析的基本參數(shù)。 ? 設(shè)流動(dòng)相流速為 FC，則 死體積（ VM）： VM = tM FC 保留體積（ VR）： VR = tR FC 調(diào)整保留體積（ V’R）： V’R=VRVM=t’RFC （ 3）相對(duì)保留值 ? 相對(duì)保留值（ γ21） ： 在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，組分 2與另一組分 1的調(diào)整保留時(shí)間之比。 ? 只要柱溫、固定相不變，即使柱長、柱內(nèi)徑、填充情況及流動(dòng)相流速有變化， γ21仍保持不變。39。39。 寬度越窄，其效率越高，分離的效果也越好。 ? 半峰寬 W1/2： 峰高一半處的峰寬。 ? 峰底寬 Wb： 色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)上切線與基線的交點(diǎn)間的距離。 ? 峰拐點(diǎn)： 在組分流出曲線上二階導(dǎo)數(shù)等于零的點(diǎn)，稱為峰拐點(diǎn)，如圖中的 E點(diǎn)與 F點(diǎn)。 這種分離過程經(jīng)常用樣品組分的分子在兩
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