【正文】 ）、淀粉、聚乙烯醇、高分子聚合物等。 ? 添加劑 熒光指示劑 硝酸銀溶液 制板、活化 點(diǎn)樣 ； ； ； ； :內(nèi)徑 定量分析 :微量注射器 6. TLC:原點(diǎn)直徑最大不超過 5mm,一般 3mm。 薄層吸收掃描法 薄層熒光掃描法 第四節(jié) TLC的應(yīng)用 1. 用于柱層析后相同組分的合并 2. 有機(jī)合成監(jiān)控反應(yīng)，摸索最佳條件 3. 制備有機(jī)化合物 4. 中藥材的鑒定 第四章 氣相色譜法 第一節(jié) 概述 第二節(jié) 氣相色譜術(shù)語、理論 第三節(jié) 填充柱氣相色譜 第四節(jié) 毛細(xì)管柱氣相色譜 第五節(jié) 裂解氣相色譜及頂空氣相色譜 第六節(jié) 氣相色譜儀 第七節(jié) 衍生化氣相色譜法 第八節(jié) 氣相色譜的定性與定量 第九節(jié) 氣相色譜的應(yīng)用 1. GC：以氣體（即載氣）為流動相的柱色譜分離技術(shù)。 3. GC中載氣是惰性的，載氣的功能僅僅是攜帶試樣、洗脫組分。 第一節(jié) 概述 GC按柱直徑粗細(xì)分類 1. 填充柱：將固定相填充在內(nèi)徑 4mm的金屬管或玻璃管內(nèi) 2. 毛細(xì)管柱：使用內(nèi)徑 璃管或石英管 GC按分離機(jī)理分類 方 法 固 定 相 應(yīng) 用 氣固色譜（ GSC） 吸附劑 （碳、分子篩、高分子多孔小球） 永久性氣體、低沸點(diǎn)的烴類， GDX—水 氣液色譜（ GLC） 載體 +固定液 （涂漬、鍵合） 應(yīng)用很廣 GC的特點(diǎn) 1. 分離效率高（填充柱上千塊塔板；開管柱106塊塔板） 2. 分析速度快 3. 樣品用量少（檢測限低，高靈敏檢測器） 4. 缺點(diǎn)：（約 20%樣品適用） A. 樣品須能氣化（ 350度下有一定的揮發(fā)性） B. 熱穩(wěn)定性要好 C. 定性困難 第二節(jié) 氣相色譜術(shù)語、理論 1. 氣相色譜流出曲線 2. 分配系數(shù)與容量因子 3. 塔板理論 4. 速率理論 5. 分離度 6. 基本分離方程 一、 氣相色譜流出曲線 僅有流動相 （ 無試樣 ）通過檢測器時(shí) ， 檢測到的信號為基線 。 調(diào)整保留時(shí)間（ tR ＇）： tR＇ = tR－ tM (2) 用體積表示的保留值 保留體積 （ VR） ： VR = tR F0 （ F0為色譜柱出口處的載氣流量， 單位： m L / min。 C. 亦稱 分離因子 a 、 分配系數(shù)比 、 選擇性系數(shù) 、 選擇 因子 4. 區(qū)域?qū)挾? （ 1） 標(biāo)準(zhǔn)偏差 (?)： 色譜峰寬度的一半 。????KVVccVVmVVmmmkmSmsmmmSSSmS ?????容量因子越大 ， 保留時(shí)間越長 。 ? 當(dāng)組分進(jìn)入柱后，組分在兩相間進(jìn)行多次分配，最后和固定相作用力較小的組分先從“塔頂”（即柱出口）逸出，從而與另一組分（和固定相作用力較大）分離 色譜塔板理論的五點(diǎn)假設(shè) 1. 組分在氣液兩相間可瞬間完成分配平衡 2. 所有的物質(zhì)在開始時(shí)全部進(jìn)入零號塔板 3. 分配系數(shù)在每塊塔板里都一樣 4. 一個(gè)塔板和另一個(gè)塔板之間沒有縱向擴(kuò)散 5. 載氣不是連續(xù)進(jìn)入色譜柱，而是脈沖式進(jìn)入色譜柱，即一個(gè)塔板體積的載氣進(jìn)入后，再進(jìn)入另一個(gè)塔板體積的載氣 理論塔板數(shù)的計(jì)算 色譜柱長： L， 虛擬的塔板間距離： H， 色譜柱的理論塔板數(shù)： n， 則三者的關(guān)系為： n = L / H 理論塔板數(shù)與色譜參數(shù)之間的關(guān)系為： 222116545 )()(./ bRRWtYtn ??有效塔板數(shù)、有效塔板高度 ? 組分在 死 時(shí)間內(nèi)不參與柱內(nèi)分配 ， 用調(diào)整保留時(shí)間代替保留時(shí)間 ， 得有效塔板數(shù)和有效塔板高度： 222116545 )()(./ bRRWtYtn ??有效有效有效nLHWtYtnbRR???239。)(16)( 塔板理論的成功與不足 塔板理論能成功解釋色譜峰的形狀 （ 高斯分布曲線 ） 及評價(jià)柱效 （ 計(jì)算 n） 。 四、速率理論 速率方程 （ 也稱范 s 1） 。 傳質(zhì)阻力包括 氣相傳質(zhì)阻力 Cg和 液相傳質(zhì)阻力 CL ，液相傳質(zhì)阻力大于氣相傳質(zhì)阻力。 E. 在高流速區(qū) ,傳質(zhì)阻力項(xiàng)占主導(dǎo) ,流動相使用輕載氣 。 ? 分離度的表達(dá)式： )(.)()()(/)(/)()()()()()(1212211212126 9 9122YYttWWttRRRbbRR??????? 定性 時(shí)要求： R =（相鄰兩峰分離程度 98%） ? 定量 時(shí)要求： R =（相鄰兩峰分離程度 %，基線分離 ，作為完全分離的標(biāo)準(zhǔn)）。 ? 氣－液色譜固定相 ： 固定液 + 載體（ 擔(dān)體 ） ? 載體 ， 亦稱擔(dān)體 ， 是支撐固定液的惰性多孔物質(zhì) 填充柱氣相色譜用載體 作為擔(dān)體使用的物質(zhì)應(yīng)滿足的條件： A. 比表面積大，孔徑分布均勻； B. 化學(xué)惰性，表面無吸附性或吸附性很弱，與被分離組份不起反應(yīng)； C. 具有較高的熱穩(wěn)定性和機(jī)械強(qiáng)度，不易破碎； D. 顆粒大小均勻、適度。 載體分類： 硅藻土： 由二氧化硅 （ 90%） 和少量金屬氧化 物組成 紅色硅藻土： 201紅色擔(dān)體 白色硅藻土： 101白色擔(dān)體 非硅藻土類： GDX、 玻璃微球 、 氟擔(dān)體等 按相對極性分類 固定液分類 按化學(xué)結(jié)構(gòu)分類 固定液分類：按相對 極性分類 ? ―0‖級 ——非極性固定液 ? “ +1‖ 與“ +2‖級 ——弱極性固定液 ? “ +3‖級 ——中等極性固定液 ? “ +4‖與“ +5‖級 ——強(qiáng)極性固定液 固定液分類：按化學(xué)結(jié)構(gòu)分類 1. 烴類 2. 聚硅氧烷類 3. 聚二醇類 4. 聚酯類 5. 腈類 6. 特殊的固定液 固定液 類型 極性 例子 分離對象 烴類 非極性 角鯊?fù)椤⑵に? 非極性物質(zhì) 弱極性 甲基聚硅氧烷 苯基聚硅氧烷 氟烷基聚硅氧烷 不同極性物質(zhì) 聚硅氧烷 中等極性 強(qiáng)極性 氰烷基聚硅氧烷 醇和醚類 強(qiáng)極性 聚乙二醇 強(qiáng)極性物質(zhì) 酯和聚酯類 中強(qiáng)極性 領(lǐng)苯二甲酸二壬酯 各類物質(zhì) 極性 腈和腈醚類 強(qiáng)極性 β， β’氧二丙腈 有機(jī)皂土 弱極性 芳香異構(gòu)體 按固定液的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類的固定液 固定液與組分的分子間作用力 1. 定向力： 2. 誘導(dǎo)力： 3. 色散力： 氣固色譜固定相的特點(diǎn) （ 1） 性能與制備和活化條件有很大關(guān)系； （ 2） 同一種固定相 ， 不同廠家或不同活化條件 ， 分離效果 差異較大； （ 3） 使用方便； （ 4） 種類有限 ， 能分離的對象不多 。 用途： 有機(jī)物中痕量水 ， 多元醇 、 脂肪酸 、 胺類 。 ? 可用于分子量較大 、 結(jié)構(gòu)復(fù)雜 、 難揮發(fā)的物質(zhì)的分析鑒定 。 裂解氣相色譜 基本原理及方法 基本原理 ： 在一定條件下 ， 高分子及非揮發(fā)性有機(jī)化合物遵循一定的裂解規(guī)律 ， 即特定的樣品能夠產(chǎn)生特征的裂解產(chǎn)物及產(chǎn)物分布 ， 采用氣相色譜分析鑒定裂解產(chǎn)物 ， 據(jù)此可對原樣品進(jìn)行表征 。 裂解氣相色譜的特點(diǎn) (1) 分離效率高 (2) 靈敏度高 、 樣品用量少 (3) 分析速度快 、 信息量大 快速裂解 、 快速分析；不丟失信息； (4) 適合于高聚物 、 生物大分子和不揮發(fā)性有機(jī)物 如固化樹脂 、 涂料 、 硫化橡膠 、 塑料等 (5) 設(shè)備簡單 頂空氣相色譜 頂空氣相色譜： 對液體或固體試樣中的揮發(fā)性成分進(jìn)行氣相色譜分析的技術(shù)；將試樣置于密閉的恒溫系統(tǒng)中 ， 待 氣液 （ 氣 固 ） 兩相達(dá)到熱力學(xué)平衡時(shí) ， 測定氣相組成 。 第六節(jié) 氣相色譜儀 1. 氣路系統(tǒng) 2. 進(jìn)樣系統(tǒng) 3. 色譜柱系統(tǒng) 4. 檢測系統(tǒng) 5. 數(shù)據(jù)處理和控制系統(tǒng)（含溫控系統(tǒng)） GC分析流程 氣相色譜儀組成 氣路系統(tǒng) ? 提供高純、流速穩(wěn)定、封閉的載氣； ? 包括氣源、凈化器和載氣流速控制器； ? 凈化器： ? 載氣流速控制：壓力表、流量計(jì)、針形穩(wěn)壓閥，控制載氣流速恒定。 液體樣品 —— 微量注射器 氣體樣品 —— 六通閥、 微量注射器 氣化室溫度：要保證樣品瞬間、完全氣化，一般 高于沸點(diǎn) 50℃ 以上，但也不宜太高， 以防分解 液體進(jìn)樣器 ： 不同規(guī)格的專用注射器，填充柱色譜常用 10μL；毛細(xì)管色譜常用 1μL 氣化室 ： 將液體試樣瞬間氣化的裝置；惰性，無催化作用。 ? 毛細(xì)管色譜的優(yōu)越性還表現(xiàn)在對痕量物質(zhì)的分析上，其檢測限已達(dá)到 Pg以下。 。降低柱溫可在一定程度內(nèi)改善分離； 升高柱溫可加快分析速度。 程序升溫 程序升溫：在一個(gè)分析周期內(nèi)， 按一定程序改變柱溫，從而使寬沸程（ 80100℃ ）、多組分樣品達(dá)到較好的分離效果。 質(zhì)量型檢測器： 檢測信號值與單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測器組分的質(zhì)量成正比。 ?噪聲的來源：固定液的流失、載氣的不純，電子元件不穩(wěn)定、溫度變化、外磁場干擾等。 ?良好的檢測器其噪聲與漂移都應(yīng)很小 靈敏度 靈敏度 （ S） ： 待分析樣品通過檢測器時(shí) ， 物質(zhì)量的變化對響應(yīng)信號的變化率 。 D=2N/S 式中： N為噪聲， S為靈敏度 濃度型檢測器： Dc的單位是 mg/mL 質(zhì)量型檢測器： Dm的單位是 g/s 線性范圍： 指被測物質(zhì)的量與檢測器響應(yīng)信號（ R）之間成線性關(guān)系的范圍；在線性范圍內(nèi)，以最大允許進(jìn)樣量與最小進(jìn)樣量的比值來表示。 線性范圍 熱導(dǎo) 氫火焰 電子俘獲 火焰光度 分類 通用 準(zhǔn)通用 選擇型 選擇型 響應(yīng)類型 濃度型 質(zhì)量型 濃度型 質(zhì)量型 檢出限 108 gs1 1014 gs1 （ P） 1011 g ? 在一定操作條件下，各組分的保留時(shí)間是一定值的原理。 據(jù)經(jīng)驗(yàn)式定性 :碳數(shù)規(guī)律 ?