蛋白質(zhì)和氨基酸測定-閱讀頁
2024-09-09 16:11本頁面
【正文】 。 （ 560nm） NH2— CO— NH— CO— NH2 + NH3 NH2— CO— NH2 + NH2— CO— NH2 方法特點及應(yīng)用范圍 ? 本法靈敏度較低，但操作簡單快速，故在生物化學(xué)領(lǐng)域中測定蛋白質(zhì)含量時常用此法。 4. 氨基酸總量的測定 ?（一）甲醛滴定法 ?（二）茚三酮的比色法 （一）甲醛滴定法 ：氨基酸本身有堿性 — NH2— 基，又有 酸性 — COOH 基，成中性內(nèi)鹽，加入甲醛溶液后，甲醛與 — NH2— 結(jié)合，堿性消失，再用強堿來滴定 — COOH 基。 3．試劑： ① 40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示劑，用氫氧化鈉將 40%甲醛中和至藍色。 4．操作：同時取兩份樣： 一份中加中性紅指示劑，用氫氧化鈉直接滴，中和樣液中其它酸性物質(zhì)。 二者之差可計算氨基酸含量 （二）茚三酮的比色法 ? 原理：氨基酸在一定條件下與茚三酮起反應(yīng)，生成藍紫色化合物，可比色定量。然后用茚三酮顯色，與標(biāo)準(zhǔn)氨基酸進行對比，鑒別各種氨基酸種類，從顯色斑點顏色的深淺可以大致確定其含
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