【正文】 ，使沉于管底的紅細(xì)胞浮起，先以內(nèi)眼觀察有無(wú)凝集(或溶血)現(xiàn)象。 觀察結(jié)果時(shí)既要看有無(wú)凝集，更要注意凝集強(qiáng)度，此有助于 A、B 亞型、類 B 或 cisAB 的發(fā)現(xiàn)。3+ 紅細(xì)胞凝集成數(shù)小塊，血清尚清晰。1+ 肉眼可見(jiàn)大顆粒，周圍有較多游離紅細(xì)胞。 鏡下可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周圍有很多游離紅細(xì)胞。注：+為凝集；為不凝集。試劑開(kāi)封后必須貼上開(kāi)封日期、開(kāi)封人標(biāo)簽，用畢后應(yīng)放置冰箱保存，以免細(xì)菌污染。 試劑紅細(xì)胞以 3 個(gè)健康者同型新鮮紅細(xì)胞混和，用生理鹽水洗滌 1 次，以除卻存在于血清中的抗體及可溶性抗原。試劑紅細(xì)胞有效期：自制的為 15 天，商品的為試劑有效期。試劑開(kāi)封后有效期為一周。 所有試劑在開(kāi)封或使用時(shí)，必須檢查是否有變質(zhì)；凡可疑者，必須更換新的試劑進(jìn)行檢測(cè)工作。 操作方法應(yīng)按規(guī)定，一般應(yīng)先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便容易核實(shí)是否漏加血清。 離心時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，速度不宜過(guò)快或過(guò)慢，以防假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。 判斷結(jié)果后應(yīng)仔細(xì)核對(duì)、記錄，避免筆誤。512 對(duì)于可疑結(jié)果，必須更換所用的試劑，重新檢測(cè)。根據(jù)下表進(jìn)行紅細(xì)胞懸液的配制懸液濃度（%）壓積紅細(xì)胞（滴）鹽水（滴）1 2ml(40)5 1 (16)Rh（D）血型鑒定實(shí)驗(yàn)原理紅細(xì)胞與抗 D 抗體發(fā)生凝集反應(yīng)表明該細(xì)胞有 D 抗原，反之，無(wú)凝集現(xiàn)象表明試驗(yàn)的紅細(xì)胞缺少正常強(qiáng)度的 D 抗原。如果不能立即實(shí)驗(yàn),應(yīng)將樣品貯存于 28℃。儀器、試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、培養(yǎng)基、以及其他所需物品：RhD(IgM)血型定型試劑（單克隆抗體）：上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字 S20060018,包裝、規(guī)格：每盒內(nèi)裝有 1 支試劑，10ml/支，儲(chǔ)存要求：存放 2—8℃，有效期內(nèi)使用。 再加入1滴4%5%的被檢紅細(xì)胞懸液。 在圓形的玻片區(qū)域中混勻，前后緩慢搖晃玻片。不要將試劑的干燥與凝集相混淆。 鹽水試管法 加一滴抗 D 試劑于預(yù)先標(biāo)記好的試管中 再加 1 滴約 3%—5%紅細(xì)胞生理鹽水懸液于試管中。 離心，速度和時(shí)間可選擇以下二種之一： 轉(zhuǎn)速 1000rpm，時(shí)間1 分鐘或 3400rpm，時(shí)間 15 秒。 觀察凝集狀況，并立即記錄結(jié)果。 若是陰性結(jié)果，需在 37℃孵育 15 分鐘30 分鐘，然后再離心觀察結(jié)果。參考值范圍陽(yáng)性反應(yīng)：出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，為 RhD 陽(yáng)性。方法的局限性本實(shí)驗(yàn)不能凝集CategoryDVI細(xì)胞，對(duì)于陰性和弱陽(yáng)性結(jié)果，按有關(guān)安全輸血規(guī)范進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，必要時(shí)送血型參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)。 試劑如出現(xiàn)混濁則不能使用，若開(kāi)瓶使用時(shí)間較長(zhǎng)后，最好用已知 RhD 陰性、RhD 陽(yáng)性紅細(xì)胞檢查結(jié)果是否符合，以防制品污染、變質(zhì)失效，而造成錯(cuò)誤。 由于人紅細(xì)胞的 D 抗原往往表現(xiàn)較弱，故必要時(shí)進(jìn)行顯微鏡鏡檢，以免錯(cuò)判結(jié)果，特別是陰性結(jié)果時(shí)。 對(duì)于結(jié)果可疑的，必須洗滌紅細(xì)胞后重新檢驗(yàn)?？煞譃?IgM和 IgG球蛋白抗體IgM 為天然抗體，在鹽水介質(zhì)中能直接凝集相應(yīng)的紅細(xì)胞，使之發(fā)生肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)。在鹽水介質(zhì)中不能凝集而只能致敏抗原的紅細(xì)胞，且必須通過(guò)特定的方法使致敏紅細(xì)胞發(fā)生凝集。方法待檢血清需要使用多種方法進(jìn)行鑒定。在檢測(cè)到弱抗體時(shí)，可以利用適當(dāng)增加血清的細(xì)胞比例、適當(dāng)增加孵育時(shí)間、加入低離子強(qiáng)度溶液增效劑或 PEG 聚氧乙烯乙二醇等方法增加反應(yīng)的敏感性。這些特性為判定抗體特異性提供了參考信息。、譜細(xì)胞：選取八個(gè)以上的 O型紅細(xì)胞組成一組譜細(xì)胞（已知抗原）。、不規(guī)則抗體的鑒定：對(duì)篩選陽(yáng)性的患者應(yīng)檢查其抗體的特異性。結(jié)果判斷陽(yáng)性反應(yīng)：出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集。陰性反應(yīng)：出現(xiàn)紅細(xì)胞不凝集。結(jié)合譜細(xì)胞反應(yīng)格局，確定抗體特異性。標(biāo)本要求、按照一般的血液樣本采集步驟采集血液標(biāo)本。一般不需特殊處理?？鼓龢?biāo)本也用于直接抗球蛋白試驗(yàn)，并可提供洗脫技術(shù)所需的紅細(xì)胞來(lái)源。若懷疑冷抗體引起的直接抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性，其血液標(biāo)本凝固應(yīng)保持在 37℃，直到血清被分離出來(lái)為止。第二篇：輸血科業(yè)務(wù)培訓(xùn)輸血科業(yè)務(wù)培訓(xùn)一、臨床醫(yī)師在用血時(shí)應(yīng)負(fù)哪些責(zé)任？臨床醫(yī)師必須嚴(yán)格掌握輸血指征，做到能不輸血者堅(jiān)決不輸；能少輸者決不多輸； 如有輸血指征要開(kāi)展成分輸血，應(yīng)盡可能不輸全血。對(duì)臨床醫(yī)師要熟悉采血機(jī)構(gòu)所提供的血液及成分的規(guī)格、性質(zhì)適應(yīng)癥、劑量及用法；輸血治療時(shí)，臨床醫(yī)師必須向家屬或病人說(shuō)明輸血目的及可能產(chǎn)生輸血不良反應(yīng)和經(jīng)血液傳播的疾病，征得家屬或病人同意并簽字輸血同意書。所有輸血不良反應(yīng)及處理經(jīng)過(guò)均應(yīng)在病歷中作詳細(xì)記錄。二、臨床護(hù)士在輸血過(guò)程中應(yīng)負(fù)哪些責(zé)任？在輸血前由2名醫(yī)護(hù)人員對(duì)輸血申請(qǐng)單、交叉配血試驗(yàn)報(bào)告單和血袋標(biāo)簽上的內(nèi)容 仔細(xì)核對(duì)，并檢查血袋有無(wú)破損或滲漏，血袋內(nèi)的血液有無(wú)溶血，混濁及凝塊等；臨輸血前，護(hù)士應(yīng)到病人床邊核對(duì)受血者床號(hào)、住院號(hào)、呼喚病人姓名以確認(rèn)受血 者。這就需要在病人入院時(shí)將寫有病人姓名和住院號(hào)的標(biāo)簽系在病人的手腕上，保留至出院為止；核對(duì)及檢查無(wú)誤之后，遵照醫(yī)囑，嚴(yán)格按照無(wú)菌操作技術(shù)將血液或血液成分用標(biāo)準(zhǔn) 輸血器輸給病人；輸血時(shí)要遵循先慢后快的原則，輸血開(kāi)始前5分鐘要慢（每分鐘約2ml）并嚴(yán)密觀 察病情變化，若無(wú)不良反應(yīng)，再根據(jù)需要調(diào)整速度。若有輸血 不良反應(yīng)，應(yīng)記錄反映情況，并將原血袋余血妥善保管，直至查明原因。三、如何決定輸血量？輸血量和輸血速度需根據(jù)輸血適應(yīng)癥、年齡、貧血程度、患者的一般狀況以及心肺 情況等決定。對(duì)血容量正常的慢性貧血患者，每次輸注12單位紅細(xì)胞為宜。四