20xx人教版高中生物選修一5-3血紅蛋白的提取和分離ppt同步課件-在線瀏覽
2025-01-19 22:30本頁面
【正文】 的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在 移動，路程 ，移動速度 ，從而使相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以 。 (2)配制 由 1～ 2種 溶解于水中配制而成 ， 通過 就可以得到在不同 pH范圍內(nèi)使用的緩沖液 。 (2)原理 在一定的 下 ， 多肽 、 核酸等生物大分子的可解離基團(tuán)會帶上 或 ， 在電場的作用下 ， 這些帶電分子會向著 的電極移動 。 (4)方法 常用的電泳方法有 和 。 帶電性質(zhì) 大小 形狀 遷移速度 各種分子的分離 瓊脂糖凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳 SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳 [思維激活 1] 凝 膠色譜法和電泳法在實現(xiàn)分子分離的原理方面有何不同 ？ 提示 凝膠色譜法分離分子是依據(jù)分子質(zhì)量大小 ， 利用凝膠色譜柱使大分子優(yōu)先洗脫出來 ， 而小分子后分離出來 。 蛋白質(zhì)分離的依據(jù) 蛋 白質(zhì)各種特性的差異 ， 如分子的形狀和大小 、 所帶電荷的性質(zhì)和多少 、 溶解度 、 吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力等 ， 可以用來分離不同種類的蛋白質(zhì) 。 ② 原理：一些生物大分子具有可解離的基團(tuán) ， 在一定 pH下 ， 會帶上正電或負(fù)電 ， 在電場的作用下 ， 這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動 。 ③ 常用方法：瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳 。 【 鞏固 1】 凝 膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理依據(jù)是 ( )。 相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離 。 2． 樣品處理 (1)紅 細(xì)胞的洗滌 采集血樣 ， ， 吸取血漿后加 洗滌 ，再低速短時間離心 ， 如此重復(fù)洗滌三次 ， 直至上清液中沒有黃色 。 血紅蛋白提取和分離的實驗操作與評價 樣品處理 粗分離 純化 純度鑒定 低速短時間離心 生理鹽水 除去雜質(zhì) (2)血紅蛋白的釋放 將洗滌好的紅細(xì)胞依次加入 至原血液體積 、 40%體積的 ， 置于磁力攪拌器上攪拌 10 min， 使紅細(xì)胞吸水 ， 血紅蛋白釋放出來 。 使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開 ， 便于下一步對血紅蛋白的純化 。 3． 凝膠色譜操作 (1)凝 膠色譜柱的制作：準(zhǔn)備材料 → 加工橡皮塞 → 安裝 。 (3)樣品的 。 洗滌次數(shù)過少 ，無法除去 ；離心速度 和時間 會使 等一同沉淀 ， 達(dá)不到分離效果 。 洗滌次數(shù) 離心速度 離心時間 血漿蛋白 過高 過長 白細(xì)胞 洗脫液 用沸水浴加熱 (3)凝膠色譜柱的裝填 在裝填凝膠柱時 ， 不得有 存在 。 (4)蛋白質(zhì)的分離 如果 ， 說明色譜柱制作成功 。 1． 樣品的處理 (1)紅 細(xì)胞的洗滌 ① 目的：去
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