20xx人教版高中生物選修一5-3血紅蛋白的提取和分離ppt同步課件(已改無錯字)
2022-12-29 22:30:09 本頁面
【正文】 血紅蛋白 的分離 ① 血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨洗脫液緩慢流出 → 分離成功 ② 血紅蛋白的紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬 → 分離效果不好，可能與凝膠色譜柱的裝填有關(guān) 特別提醒 SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，是根據(jù)大多數(shù)蛋白質(zhì)都能與陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)按重量比結(jié)合成復(fù)合物，使蛋白質(zhì)分子所帶的負(fù)電荷遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過天然蛋白質(zhì)分子的負(fù)電荷，消除了不同蛋白質(zhì)分子的電荷效應(yīng)，使蛋白質(zhì)分子相對遷移率的大小完全取決于相對分子質(zhì)量的高低，因此可從已知相對分子質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的對數(shù)和相對遷移率所作的標(biāo)準(zhǔn)曲線中求出供試品的相對分子質(zhì)量。 【 鞏固 2】 在 血紅蛋白的整個提取過程中 ， 不斷用磷酸緩沖液處理的目的是 ( )。 A． 防止血紅蛋白被氧化 B． 血紅蛋白是一種兩性物質(zhì) ， 需要酸中和 C． 磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程 D． 讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的 pH范圍內(nèi) ， 維持其結(jié)構(gòu)和功能 解析 利用磷酸緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的 pH環(huán)境 ， 保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能 ， 便于分離觀察 (紅色 )和研究 (活性 )。 答案 D 【 例 1】 下 圖中，可表示為相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的移動過程的是 ( )。 血紅蛋白提取和分離的基本原理 思維導(dǎo)圖： 深度剖析 本題考查凝膠色譜法原理 。 根據(jù)分子篩效應(yīng)可知 ， 相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子通過的路程較短 ， 移動速度較快；相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子通過的路程較長 ， 移動速度較慢 。因此 ， 樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出 ， 相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出 ， 故選 B。 答案 B 特別提醒 血紅蛋白的分離方法及相關(guān)原理比較： 方法 原理 凝膠色譜法 根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) 電泳法 根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同進(jìn)行分離 【 例 2】 下 圖是用除去 DNA的濾液進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)的裝置，下列有關(guān)敘述不正確的是 ( )。 血紅蛋白提取和分離的實(shí)驗(yàn)操作 A． 首先用圖甲裝置對濾液進(jìn)行處理 ， 其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) B． 圖乙裝置的試管中收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì) C． 用圖乙裝置分離血紅蛋白時 ， 待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時 ， 用試管收集流出液 ， 每管收集 5 mL， 連續(xù)收集 D． 圖丙裝置中電泳法分離提純血紅蛋白的原理是血紅蛋白帶有一定量的電荷 ， 在電場的作用下向一極移動 思維導(dǎo)圖： 深度剖析 用圖甲裝置對濾液進(jìn)行處理 ， 其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 。 圖乙裝置表示通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的過程 。 蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量較大 ， 被排阻在凝膠顆粒的外面 ， 在顆粒之間迅速通過 。 答案 B [歸納整合 ]蛋白質(zhì)的提取和分離 步驟 操作 樣品處理 通過紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液等操作收集到血紅蛋白溶液 粗分離 通過透析法去除血紅蛋白溶液中的相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 純化 通過凝膠色譜法分離相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì) 純度鑒定 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求 單擊此處進(jìn)入 隨堂達(dá)標(biāo)檢測 旁欄思考題 你 能從凝膠色譜的分離原理分析為什么凝膠的裝填要緊密 、均勻嗎 ？ 答案 凝膠 實(shí)際上是一些微小的多孔球體，小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)
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