研發(fā)部崗前培訓(xùn)細胞培養(yǎng)-在線瀏覽
2025-02-21 13:33本頁面
【正文】 至 20℃ ，若存放在 4℃ 不可超過一個月。 胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三種之間的區(qū)別： 這三種血清的成份，總體沒有什么明顯差別，只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān)，如上述有人說的抗體很等少。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的差別。 最為重要的一點是： 胎牛本身生活在一個潔凈環(huán)境當(dāng)中，其血清與外界隔絕，只要生產(chǎn)工藝科學(xué)規(guī)范，其質(zhì)量肯定要比后兩者好。 （ 2）新生牛血清：出生 1224小時新生牛靜脈采血 。： 。 （ 3）小牛血清：出生三月齡小牛動脈采血分離血清 。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。 胎牛血清是品質(zhì)最高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。 IN VITRO:（離體的，即在容器中）用培養(yǎng)細胞進行的實驗 IN VIVO:（在體的）完整機體內(nèi)進行的實驗 二、細胞培養(yǎng)的優(yōu)點與不足 （一）優(yōu)點： 1. 長時間直接觀察活細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動：細胞學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué) …… 2. 攝影、攝電影和閉路電視等方法記錄細胞變化 3. 細胞種類廣泛：從低等生物到高等生物（人）；從胚胎到成體；從正常細胞到腫瘤細胞 4. 便于使用各種技術(shù)：相差顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、組織化學(xué)、同位素標(biāo)記等 5. 易于使用物理、化學(xué)和生物因素等進行研究 6. 提供大量生物性狀相似的實驗對象，更經(jīng)濟 （二）不足： 1. 即使模擬體內(nèi)環(huán)境的技術(shù)發(fā)展很快，但是與體內(nèi)環(huán)境相比，仍有較大差異 2. 對無菌要求高 3. 失去神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細胞間的相互作用：去分化、永生或惡變 三、培養(yǎng)細胞的形態(tài)分類 （一）貼附型 這類細胞在培養(yǎng)時能貼附在支持物表面生長 大多數(shù)培養(yǎng)細胞呈貼附型生長 只依賴于貼附才能生長的細胞稱貼附性細胞 分類：成纖維型細胞（中胚層間充質(zhì)起源）、上皮型細胞（內(nèi)、外胚層起源）、游走型細胞（活躍的游走與變形運動）、多形型細胞（神經(jīng)細胞） （二）懸浮型 不貼附在支持物上生長 呈懸浮狀態(tài)生長，胞體為圓形 如某些癌細胞和血液白細胞 特點：生存空間大，容許長時間生長，能繁殖大量細胞，便于進行細胞代謝等研究 （三）細胞凍存與復(fù)蘇 培養(yǎng)細胞在傳代過程中性質(zhì)容易發(fā)生變化，且有支原體污染的危險 解決方法：細胞凍存，需要時復(fù)蘇 在培養(yǎng)液中加入冷凍保護劑（小分子：甘油、二甲亞砜），以減少細胞內(nèi)液形成冰晶對細胞的損傷。C 177。C 培養(yǎng)細胞對低溫的耐受力比其對高溫強 ≤39 176。也稱懸浮期。細胞株平均在 10分鐘 ～ 4小時貼壁 底物 ：膠原、玻璃、塑料、其它細胞等 血清中有促使細胞貼壁的冷析球蛋白和纖粘素、膠原等糖蛋白（ 生長基質(zhì) ），這些帶正電荷的糖蛋白的促貼壁因子先吸附于底物上，懸浮細胞再與吸附有促貼壁因子的附著 進口塑料培養(yǎng)瓶涂有 生長基質(zhì) （化學(xué)合成的功能基團） 細胞貼壁過程 細胞貼壁過程 潛伏期： 此時細胞有生長活動，但是無細胞分裂。飼細胞的代謝產(chǎn)物利于其它細 胞生長 （八）抑制細胞生長因素 制備培養(yǎng)基消毒不徹底：有毒物質(zhì)或微生物
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