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正文內(nèi)容

1基因工程概論-在線瀏覽

2025-02-17 07:33本頁面
  

【正文】 成的人腦激素和人胰島素 1981年,成功獲得了第一個轉(zhuǎn)基因小鼠,培育出轉(zhuǎn)基因果蠅 1982年,第一個由基因工程菌生產(chǎn)的藥物 :胰島素 1983年,第一個轉(zhuǎn)基因植物培育成功 1986年,基因工程生物在控制的情況下,實驗性地釋放到環(huán)境中 1988年,開始人類基因計劃 1994年,基因工程西紅柿在美國上市 2023年,人和擬南芥測序完成 2023年, 水稻基因組測序完成 第四節(jié) 基因工程的定義及其主要的研究內(nèi)容 一 .基因工程的誕生 1. Berg的開創(chuàng)性實驗 1972年斯坦福大學的 Paul Berg小組完成了首次體外重組實驗: 將 SV40的 DNA片斷與 ?噬菌體的 DNA片斷連接起來 (用 DNA末端轉(zhuǎn)移酶,而非限制性內(nèi)切酶 )。 后來又把非洲爪蟾核糖體基因片斷同 pSC101質(zhì)粒重組,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,并在菌體內(nèi)成功轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的 mRNA。 BoyerCohen實驗 Stanley Cohen Herb Boyer 1986 Nobel生理或醫(yī)學獎 二 .基因工程的定義和特征 1. 定義 在體外將核酸分子插入病毒、質(zhì)?;蚱渌d體分子,構(gòu)建遺傳物質(zhì)的新組合,并使之滲入到原先沒有這類分子的寄生細胞內(nèi),而能持續(xù)穩(wěn)定地繁殖 在 體外 對不同生物的 遺傳物質(zhì) (基因)進行剪切、 重組 、連接,然后插入到 載體 分子中(細菌質(zhì)粒、病毒或噬菌體DNA), 轉(zhuǎn)入 微生物、植物或動物細胞內(nèi)進行無性繁殖,并 表達 出基因產(chǎn)物 (1)按照人們的主觀愿望進行設(shè)計 (2)跨越物種屏障 外源基因到另一種不同的生物細胞內(nèi)進行繁殖 (3)無性擴增 外源 DNA在寄主細胞內(nèi)可大量擴增,和高水平表達 ( gene engineering)相關(guān)的概念: 基因操作( gene manipulation), 重組 DNA技術(shù)( rebinant DNA technique), 基因克?。?gene cloning), 分子克隆( molecular cloning) 4. Clone(名詞 ):是指從一個共同祖先無性繁殖下來的一群遺傳上同一的 DNA分子細胞或個體所組成的特殊的生命群體 Clone(動詞 ):是產(chǎn)生一個遺傳上同一的 DNA分子細胞或個體所組成的特殊的生命群體的過程 (1)目的基因的獲取 從復雜的生物基因組中,經(jīng)過酶切消化或 PCR擴增等步驟,分離出帶有 目的基因 的 DNA片斷 (2)重組體的制備 將目的基因的 DNA片斷插入到能 自我復制 并帶有 選擇性標記 (抗菌素抗性)的 載體 分子上 (3)重組體的轉(zhuǎn)化 將重組體(載體) 轉(zhuǎn)入 適當?shù)氖荏w細胞中 (4)克隆鑒定 挑選 轉(zhuǎn)化成功的細胞克?。ê心康幕颍? (5)目的基因表達 使導入寄主細胞的目的基因表達出我們所需要的基因產(chǎn)物 第五節(jié) 基因工程的安全性 一. 1996年美國國立衛(wèi)生研究院公布了 “ 重組 DNA研究準則 ” 在實驗室安全防護方面,明確規(guī)定了物理防護和生物防護兩個方面的統(tǒng)一標準。P1級實驗室為一般的裝備良好的普通微生物實驗室; P2級實驗室 , 在 P1級實驗室的基礎(chǔ)上 , 還需裝備負壓的安全操作柜; P3級實驗室 , 即全負壓的實驗室 , 同時還要裝備安全操作柜; P4級實驗室是具有最高安全防護措施的實驗室 , 要求建設(shè)專用的實驗大樓 , 周圍與其它建筑物之間應(yīng)留有一定距離的隔離帶 ,細菌操作帶手套進行 , 以及使用其他必要的隔離裝置 , 使研究者不會直接同細菌接觸 。 它是依據(jù)大腸桿菌在自然環(huán)境中的存活率為前提制定的 。 而符合 23級標準的大腸桿菌菌株 , 在自然環(huán)境中則是無法存活的 。 應(yīng)該是失去了自我遷移的能力 ,不會自動從“安全”的菌株轉(zhuǎn)移到“不安全”的菌株中。獲得這些耐性后的野生植物有可能會變成對一般除草劑有耐性的“超級”雜草。 2. 標記基因的傳遞可能引起的抗生素耐性 基因工程技術(shù)中應(yīng)用
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