植物基因工程-在線瀏覽
2025-02-17 04:55本頁面
【正文】 安裝植物細胞的篩選標記，如 neor 基因，使用植物基因的啟動子和 polyA化信號序列； ? 插入人工多克隆位點 ， 以利于外源基因的克隆 。 ? 雙元載體（ binary vectors） 既有大腸桿菌復(fù)制起點也有農(nóng)桿菌復(fù)制起點，是個穿梭載體。卡那霉素抗性（ Kanr ）基因（卡那霉素對植物有劇毒?。? 最終受體植物的選擇標記 位于 TDNA右半部分的胭脂堿合成酶基因（ nos）。只有這樣，土壤農(nóng)桿菌才能得到抗卡那霉素性狀。 ? 雙元載體的結(jié)構(gòu) Ti質(zhì)粒被剔除了 TDNA、冠癭堿代謝基因、vir基因。（ 10kb） Ti的精髓： Vir基因（轉(zhuǎn)移）和左右界（整合） 雙元載體的轉(zhuǎn)化 ? 基因插入 轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌之前，所有的克隆步驟都在大腸桿菌里操作。 左 右 外源基因 雙元載體 Vir 幫助質(zhì)粒 農(nóng)桿菌 Vir 農(nóng)桿菌 左 右 外源基因 感染植物 轉(zhuǎn)化 左 右 外源基因 進入植物細胞核，整合，表達 ? 雙元系統(tǒng)是 穿梭質(zhì)粒 和 Ti質(zhì)粒 兩個 質(zhì)粒 ，在接合后可以自主性地共存于同一農(nóng)桿菌細胞中。 ? 接合后，兩個質(zhì)?？梢宰灾鞴泊嬗谕晦r(nóng)桿菌細胞中。 雙元系統(tǒng)的特點 三、植物細胞的直接轉(zhuǎn)化程序 ?槍擊法 將待轉(zhuǎn)化的 DNA沉淀在細小金屬珠的表面 ， 用特制槍將金屬珠直接打入植物細胞 ， 槍的威力為430 m / s， 植物細胞通常是胚胎細胞 、 玉米籽 、葉子等 ， 但進去的 DNA片段整合效率極低 。它通過高速飛行的金屬顆粒將包被其外的目的基因直接導(dǎo)入到受體細胞內(nèi)，從而實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)化的方法。 Gene Gun Gene guns and electric shocks transfer DNA into plant cells 基因槍 電擊法 ? 將高濃度的質(zhì)粒 DNA加入到植物細胞的原生質(zhì)體懸浮液中 ， 混合物在 200 600 V / cm 的電場中處理若干秒鐘 ， 然后將原生質(zhì)體在組織培養(yǎng)基中生長 1 2 周 ， 再生出整株植物 。 ? 所有涉及到植物原生質(zhì)體的基因轉(zhuǎn)化方法均存在一個難題，即：原生質(zhì)體很難再生出整株植物。 （二）利用轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)功能蛋白和工業(yè)原料 （三）植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)在植物品種改良中的應(yīng)用 五、植物基因工程的應(yīng)用 目前植物中常用的報告基因： （ 1）大腸桿菌的 β 葡萄糖苷酸酶（ GUS） 該酶能催化許多 β–葡萄糖苷酯類物質(zhì)的水 解，將其與 X–葡萄糖苷酸（ Xgluc）保溫，產(chǎn)生 藍色反應(yīng)，借此可預(yù)測報告基因的表達程度。 （三）植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)在植物品種改良中的應(yīng)用 ? 控制果實成熟的轉(zhuǎn)基因植物 ? 抗病蟲害的轉(zhuǎn)基因植物 ? 抗除草劑的轉(zhuǎn)基因植物 ? 改變花卉形狀和顏色的轉(zhuǎn)基因植物 ? 抗環(huán)境壓力的轉(zhuǎn)基因植物 ? 產(chǎn)高品質(zhì)產(chǎn)物的轉(zhuǎn)基因植物 轉(zhuǎn)基因育種的程序 基因分離 體外重組 轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)化體 安全性評價 結(jié)合常規(guī)育種 轉(zhuǎn)基因品種 遺傳穩(wěn)定性
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1