基因工程練習-在線瀏覽
2025-02-08 17:43本頁面
【正文】 用該培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使基因表達載體 A中含有 _______ _____，作為標記基因。圖中 ①② 依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的 _________________。 江蘇 )下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖 圖 2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。 (2)若對圖中質粒進行改造，插入的 SmaⅠ 酶切位點越多，質粒的熱穩(wěn)定性越 ________。 (4)與只使用 EcoRⅠ 相比較，使用 BamHⅠ 和 HindⅢ 兩種限制酶同時處理質粒、外源 DNA的優(yōu)點在于可以防止 ______________。 (6)重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了 __________。 DNA連接 鑒別和篩選含有目的基因的細胞 蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質 考點二 基因工程基本操作程序分析 一、目的基因的獲取途徑 1．直接分離：從自然界已有的物種中分離，如從基因組文庫中獲取。 (2)以 RNA為模板，在逆轉錄酶作用下人工合成。 2．基因表達載體的構建方法 三、將目的基因導入受體細胞 生物種類 植物細胞 動物細胞 微生物細胞 常用方法 農桿菌轉化法 顯微注射技術 Ca2＋ 處理法 受體細胞 體細胞 受精卵 原核細胞 轉化過程 將目的基因插入 Ti質粒的 TDNA上 → 農桿菌→ 導入植物細胞 → 整合到受體細胞的 DNA→表達 將含有目的基因的表達載體提純 → 取卵 (受精卵 )→ 顯微注射 → 受精卵發(fā)育 → 獲得具有新性狀的動物 Ca2＋ 處理細胞→ 感受態(tài)細胞→ 重組表達載體與感受態(tài)細胞混合 → 感受態(tài)細胞吸收 DNA分子 四、目的基因的檢測與鑒定 1．分子水平檢測 (1)導入檢測： DNA分子雜交技術，即使用放射性同位素標記的含目的基因的 DNA片段作探針檢測。 【 案例 2】 (2023已知目的基因的兩端分別有包括 EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。若要從這些連接物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行 ______。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是 ___ _____；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是 ________________________________。 (4)在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是 ________。 廣東 )天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類 ,用作發(fā)酵原料的淀粉需經一系列復雜的轉化過程才能被利用。請回答下列問題： (1)將淀粉酶基因切割下來所用的工具是 __ _，用 __ 將淀粉酶基因與載體拼接成新的 DNA分子，下一步將該 DNA分子 __ _，以完成工程菌的構建。 ______________________。 (4)微生物在基因工程領域中有哪些重要作用？ ______。抗蟲棉、抗蟲番茄、抗蟲煙草都已獲得成功，既減少了殺蟲劑的使用，又保護了環(huán)境。 考點整合 多種抗病毒植株已培育成功并開始進行田間實驗、栽培。 4．利用轉基因改良植物品質：主要成果有培育賴氨酸含量較高的玉米、耐儲存的番茄、花色變異的矮牽?；ǖ?。 2．改善畜產品的品質：如導入腸乳糖酶基因，生產低乳糖乳汁。 4．用轉基因動物作器官移植的供體：利用基因工程抑制抗原決定簇基因的表達或除去抗原決定基因，培育出沒有免疫排斥反應的轉基因克隆豬器官。 四、基因治療 項目 類型 外源基 因類型及舉例 過程 特點 成果舉例 體外 基因 治療 腺苷酸 脫氨酶 基因 ① 從病人體內獲得某種細胞 ② 細胞培養(yǎng) ③ 體外完成基因轉移 ④ 篩選并擴增培養(yǎng) ⑤ 重新輸入患者體內 操作復雜，但成功率高 治療復合型免疫缺陷癥 體內 基因 治療 治療遺傳性囊性纖維化病的基因 外源基因 → 載體攜帶體內相應組織細胞
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