巴氏染色原理及操作步驟-在線瀏覽
2024-08-17 16:44本頁面
【正文】 核結構清晰、分色明顯、透明度好、胞漿受色鮮艷等特點。巴氏染色的操作方法及注意事項 染色有4個步驟：固定；核染色；胞漿染色；透明。 一、固定 固定的目的細胞制片的迅速固定是制片過程中關鍵的一步，否則會影響細胞學診斷的準確性。最為常用的固定方法是95％酒精作為固定液的濕固定法。對于巴氏染色來說，酒精固定最為重要的。 固定方法濕固定法：作為用95％酒精固定液固定的細胞學標本一定使用濕固定法。制片在固定液內至少保持1530min。這種制片染色后，顏色鮮艷，結構清晰。因為無論固定前或固定后的制片，如果發(fā)生干燥后都會影響染色的效果。使用過長的固定液，必須用酒精相對密度計測定，酒精濃度低于90％時應該及時更換新液。如蘇木素對細胞核的染色，巴氏染色中胞漿的特殊著色作用，均可因標本干燥后固定而大受影響。實驗室在收到標本后，先浸入95％酒精中，使甘油溶去，再進行染色。夏季或放置較久的蘇木素染液容易著色，時間要縮短；冬季或新配制的蘇木素染液和應用已久較稀釋的蘇木素液不易著色，時間要延長。這種方法能夠在酸化過程中把胞漿內黏附多余的蘇木素染料去掉，使胞漿染色更為鮮艷、清晰、多用于黏液多的標本。主要用于黏液少的標本，避免在酸化和自 來水沖洗的過程中使細胞成片地脫落。一般蘇木素染液可以使用較長時間，所以每日增加少量新鮮染液即可。更重要的是流水沖洗，可使藍色顯的更鮮艷。分化和堿化溶液至少每天更換新液。由于橘黃G是一種小分子染料，能夠很快地作用于胞漿，一般染色時間不宜過長，通常12min。 四、封固制片
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