巴氏染色原理及操作步驟-文庫吧資料
2025-07-13 16:44本頁面
【正文】 。 二、核染色 蘇木素液浸染時間一般在35min，但是必須隨氣溫和燃料情況而酌情改變。制片標(biāo)本的郵寄：標(biāo)本再固定15min后取出，立即加甘油數(shù)滴于制片上，裝入密封的小盒中。濕固定的重要性：標(biāo)本再新鮮時及時固定時保證染色效果的重要因素。 固定注意事項固定液的過濾：為了防止細(xì)胞污染，凡是使用過的固定液，必須過濾后才能再使用。如果細(xì)胞制片需要送至另一實驗室或郵寄他處染色時，可以固定15min后，把制片取出后立即密封的容器中或者使用甘油防止制片干燥。固定時間通常不超過1周。制片制備完后，趁標(biāo)本新鮮而又濕潤時，立即放入盛有95％酒精的固定缸內(nèi)。如果酒精濃度不足引起的固定不佳，可造成細(xì)胞的人為變化，并可導(dǎo)致假陽性或假陰性的診斷。酒精作為一種脫水劑能夠防止細(xì)胞內(nèi)的酶捋蛋白質(zhì)分解而自容，并凝固細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)如蛋白質(zhì)、脂肪和糖類等，使其保持與組織生活相仿的成分，從而使細(xì)胞各部分，尤其核染色質(zhì)易于著色。對于不同的標(biāo)本需要不同的固定方法。 主要達到以下要求：核的結(jié)構(gòu)清晰；透明度高；分色恰當(dāng)。 巴氏染色法將胞核染為深藍(lán)色；鱗狀上皮底層、中層及表層角化前細(xì)胞胞質(zhì)染綠色，表層不全角化細(xì)胞胞質(zhì)染粉紅色，完全角化細(xì)胞胞質(zhì)呈桔黃色；細(xì)菌：灰色；滴蟲：淡藍(lán)灰色；黏液：淡藍(lán)色或粉紅色；中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞、吞噬細(xì)胞胞質(zhì)均為藍(lán)色；紅細(xì)胞染粉紅色；高分化鱗癌細(xì)胞可染成粉紅色或桔黃色；腺癌胞質(zhì)呈灰藍(lán)色。EA50染液的酸堿度對于巴氏染色的成功起著關(guān)鍵作用，EA50染液由伊紅、亮綠、等染料配成。因酸能破壞蘇木素
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