巴氏染色原理及操作步驟(文件)
【正文】 ，一定要更換新液。所以對巴氏染色的制片需要嚴(yán)格遵守濕固定的原則。適當(dāng)加入幾滴鹽酸以增加濃度。 ?。?）如果胞漿不分色，均為淺紅色。經(jīng)過褪色后重新蘇木素可以糾正。如染色為紅色，可以加少許磷鎢酸溶液糾正；如染色均為藍(lán)色或綠色，可以加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。一般認(rèn)為，EA36和EA50用于婦科標(biāo)本，而EA65或改良EA用于非婦科標(biāo)本。此情況可以適當(dāng)增加染色時(shí)間能夠部分糾正不分色狀況。應(yīng)用95％酒精固定。使用堿性溶液。需要縮短分化時(shí)間或延長堿化時(shí)間；每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配制蘇木素液。這是在脫水與制片封固之間的一項(xiàng)重要步驟。對于宮頸、陰道上皮中非正常角化細(xì)胞和角化型鱗癌細(xì)胞的胞漿中都可以出現(xiàn)鮮艷的橘黃色。堿性溶液亦需要充分漂清才不會(huì)妨礙下一步的胞漿著色及標(biāo)本制成后的顏色保存。在使用蘇木素染色時(shí)，一定要每日進(jìn)行過濾，否則蘇木素結(jié)晶會(huì)影響染色的質(zhì)量。在使用蘇木素染色時(shí)，一般有2種方法： 1）過染法：首先有意識地進(jìn)行深染，然后通過鹽酸酸化過程使核染色趨于合適。制片標(biāo)本的郵寄：標(biāo)本再固定15min后取出，立即加甘油數(shù)滴于制片上，裝入密封的小盒中。 固定注意事項(xiàng)固定液的過濾：為了防止細(xì)胞污染，凡是使用過的固定液，必須過濾后才能再使用。固定時(shí)間通常不超過1周。如果酒精濃度不足引起的固定不佳，可造成細(xì)胞的人為變化，并可導(dǎo)致假陽性或假陰性的診斷。對于不同的標(biāo)本需要不同的固定方法。 巴氏染色法將胞核染為深藍(lán)色；鱗狀上皮底層、中層及表層角化前細(xì)胞胞質(zhì)染綠色，表層不全角化細(xì)胞胞質(zhì)染粉紅色，
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