巴氏染色原理及操作步驟-閱讀頁
2025-07-22 16:44本頁面
【正文】 封固制片對(duì)于避免空氣干燥的影響，制片經(jīng)長期存放不褪色是非常重要的。 五、透明 染色的最后一步是透明，使細(xì)胞的色度與細(xì)胞的重疊不致影響鏡下檢查。最常用的透明溶劑使二甲苯，兩者較為匹配。 巴氏染色操作流程 95％乙醇固定（15min）→清水沖洗多次→蘇木素染液（35min）→清水沖洗三次→藍(lán)化→95％乙醇漂洗→橙黃染液（110s）→95％乙醇漂洗→95％乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50（35m）→95％乙醇漂洗→95％乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇（2min）→二甲苯（2min）→中性樹膠封片 染色注意事項(xiàng)細(xì)胞核著色不佳 （1）細(xì)胞核著色過淺： 1）鹽酸分化時(shí)間過長或蘇木素染液時(shí)間過長。 2）在固定之前制片干燥。 3）自來水的PH值偏酸性。 （2）細(xì)胞核著色過深： 1）鹽酸溶液濃度不夠。 2）制片用高于95％以上濃度的酒精固定后可以出現(xiàn)染色過深。 細(xì)胞漿著色不佳 ?。?）如果全片內(nèi)胞漿都淡染，則需要延長染色時(shí)間或更換新液。制片在固定前干燥或制片被有大量球菌樣細(xì)菌影響胞漿染色。 ?。?）胞漿染成灰色或紫色，是由于蘇木素染色時(shí)間過長或鹽酸分化不佳。 ?。?）由于標(biāo)本的不同，同樣配方的EA染液可造成偏藍(lán)、偏綠和偏紅，對(duì)不同的標(biāo)本應(yīng)該使用不同的EA染液。 ?。?）胞漿不分色的另一重要原因是由于EA染液的PH值不恰當(dāng)所致。對(duì)于改良EA染液，每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳；染液使用更持久5
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