巴氏染色原理及操作步驟-免費(fèi)閱讀
【正文】 ?。?）由于標(biāo)本的不同，同樣配方的EA染液可造成偏藍(lán)、偏綠和偏紅，對(duì)不同的標(biāo)本應(yīng)該使用不同的EA染液。 2）制片用高于95％以上濃度的酒精固定后可以出現(xiàn)染色過深。 巴氏染色操作流程 95％乙醇固定（15min）→清水沖洗多次→蘇木素染液（35min）→清水沖洗三次→藍(lán)化→95％乙醇漂洗→橙黃染液（110s）→95％乙醇漂洗→95％乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50（35m）→95％乙醇漂洗→95％乙醇漂洗→無(wú)水乙醇漂洗→無(wú)水乙醇（2min）→二甲苯（2min）→中性樹膠封片 染色注意事項(xiàng)細(xì)胞核著色不佳 ?。?）細(xì)胞核著色過淺： 1）鹽酸分化時(shí)間過長(zhǎng)或蘇木素染液時(shí)間過長(zhǎng)。由于橘黃G是一種小分子染料，能夠很快地作用于胞漿，一般染色時(shí)間不宜過長(zhǎng)，通常12min。主要用于黏液少的標(biāo)本，避免在酸化和自 來(lái)水沖洗的過程中使細(xì)胞成片地脫落。如蘇木素對(duì)細(xì)胞核的染色，巴氏染色中胞漿的特殊著色作用，均可因標(biāo)本干燥后固定而大受影響。制片在固定液內(nèi)至少保持1530min。 一、固定 固定的目的細(xì)胞制片的迅速固定是制片過程中關(guān)鍵的一步，否則會(huì)影響細(xì)胞學(xué)診斷的準(zhǔn)確性。 分化：蘇木素染色之后，用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液，但是在細(xì)胞核中結(jié)合過多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明，把這個(gè)過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使色素與組織解離，分化不可過度。對(duì)于不同的標(biāo)本需要不同的固定方法。固定時(shí)間通常不超過1周。制片
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