巴氏染色原理及操作步驟(存儲(chǔ)版)
【正文】 標(biāo)本的郵寄：標(biāo)本再固定15min后取出，立即加甘油數(shù)滴于制片上，裝入密封的小盒中。在使用蘇木素染色時(shí)，一定要每日進(jìn)行過濾，否則蘇木素結(jié)晶會(huì)影響染色的質(zhì)量。對(duì)于宮頸、陰道上皮中非正常角化細(xì)胞和角化型鱗癌細(xì)胞的胞漿中都可以出現(xiàn)鮮艷的橘黃色。需要縮短分化時(shí)間或延長(zhǎng)堿化時(shí)間；每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配制蘇木素液。應(yīng)用95％酒精固定。一般認(rèn)為，EA36和EA50用于婦科標(biāo)本，而EA65或改良EA用于非婦科標(biāo)本。經(jīng)過褪色后重新蘇木素可以糾正。適當(dāng)加入幾滴鹽酸以增加濃度。如果二甲苯溶液出現(xiàn)顏色或變得渾濁，一定要更換新液。 三、胞漿染色 胞漿染色在巴氏方法中亦稱為OG—EA染色，它包括橘黃G（OG）和EA兩部分染色。 2）淡染法：在核染色過程中，嚴(yán)格掌握染色時(shí)間，使核染色適宜而不用鹽酸酸化，但是胞漿中少量的蘇木素會(huì)影響EA染色的質(zhì)量。濕固定的重要性：標(biāo)本再新鮮時(shí)及時(shí)固定時(shí)保證染色效果的重要因素。制片制備完后，趁標(biāo)本新鮮而又濕潤(rùn)時(shí)，立即放入盛有95％酒精的固定缸內(nèi)。 主要達(dá)到以下要求：核的結(jié)構(gòu)清晰；透明度高；分色恰當(dāng)。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。藍(lán)化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，而呈藍(lán)色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色，稱藍(lán)化作用，一般多用自來水浸洗即可變藍(lán)，也可用溫水（50度溫水最佳）變藍(lán)。最為常用的固定方法是95％酒精作為固定液的濕固定法。這種制片染色后，顏色鮮艷，結(jié)構(gòu)清晰。實(shí)驗(yàn)室
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