牡丹組織培養(yǎng)技術(shù)的研究概述畢業(yè)論文-在線瀏覽
2024-08-02 16:01本頁面
【正文】 still in the research stage, there exist many imperfections in the field, this paper, for the future of peony tissue culture work further development for reference, promote the peony tissue culture technology development.KEY WORDS: peony。 plant目 錄摘要 Abstract1 前言 12 牡丹組織培養(yǎng)技術(shù)各個(gè)階段研究 2 牡丹組培技術(shù)研究進(jìn)展 3 外植體選擇的研究 3 培養(yǎng)基選擇的研究 4 培養(yǎng)條件的研究 4 生根培養(yǎng)與移栽 43 牡丹不同組培方法的研究 5 牡丹愈傷組織培養(yǎng)的研究 5 花粉和花粉培養(yǎng)的研究 6 胚培養(yǎng)與體細(xì)胞培養(yǎng)的研究 64 牡丹組織培養(yǎng)過程中常見問題 7 玻璃化現(xiàn)象 7 褐化現(xiàn)象嚴(yán)重 8 生根率低以及生根質(zhì)量不高 8 牡丹組培苗移栽成活率低 8 體胚誘導(dǎo)率低且畸形體胚多 95 總結(jié)及展望 9參考文獻(xiàn) 11致 謝 121前言牡丹（Paeonia suffruticosa Andr），別名富貴花、百兩金、木芍藥，為芍藥科芍藥屬植物，為我國的傳統(tǒng)名花。牡丹不僅有極高的觀賞價(jià)值，還有相當(dāng)重要的藥用價(jià)值。然而，這些繁殖方法因受到各種因素的影響，且多種牡丹結(jié)實(shí)率低甚至不結(jié)實(shí)，且種子發(fā)育不良，用種子繁殖難以獲得優(yōu)良植株，無性繁殖則因受生長季節(jié)的限制、繁殖系數(shù)小、形不成規(guī)模，而無法滿足市場的需求。自1984年李玉龍等[4]人報(bào)道了牡丹快繁技術(shù)的研究，之后英國、法國、美國、荷蘭、朝鮮及日本等國家也進(jìn)行了研究。目前利用組培方法，已經(jīng)能育成生根的組培苗，但由于組培苗過渡到商品苗還存在許多問題，組培苗的生根、煉苗、出瓶，褐化現(xiàn)象的控制等都需要進(jìn)一步研究。2牡丹組培技術(shù)的研究現(xiàn)狀我國是牡丹第一資源大國，現(xiàn)有四大品種群近千個(gè)牡丹品種，但真正用于組培研究的卻非常少，與我國豐富的牡丹資源極不相稱。目前，牡丹組織培養(yǎng)采用的外植體多數(shù)主要有頂芽、腋芽、萌蘗芽、花芽和萌生條等，其中萌蘗芽的效果最好，分化高，花芽最差。這是因?yàn)槎鞙囟鹊停瑢⑼寥酪约爸仓晟细街募?xì)菌、病毒等生物凍死，減少了污染源；另外，低溫過程導(dǎo)致植株及芽內(nèi)的激素含量發(fā)生動(dòng)態(tài)變化，促進(jìn)萌發(fā)和生長的IAA，GA3增多，抑制萌發(fā)和生長的ABA減少，從而改善了芽外植體的培養(yǎng)效果[3]。常用的消毒劑有酒精、升汞（HgCl2）、次氯酸鹽、酒精和升汞混合液等。植物組培常用的消毒劑如表1[4]，所示常用消毒劑的使用方法及效果消毒劑使用濃度/%消毒時(shí)間/min去除的難易消毒效果對(duì)植物毒害升汞210較難最好劇毒酒精7075易好有次氯酸鈉2530易很好無漂白粉飽和溶液530易很好低毒過氧化氫1012515最易好無新潔爾滅30易很好很小硝酸銀1530較難好低毒抗菌素/(mg 尤楊等以牡丹頂芽為外植體，%HgCl2消毒劑，研究了不同消毒處理時(shí)間4min、6min、8min、10min、12min對(duì)頂芽污染率、褐化率及存活率的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：%HgCl2處理牡丹頂芽，時(shí)間在8min為最理想的消毒處理時(shí)間。目前，牡丹的組織培養(yǎng)主要采用MS培養(yǎng)基，附加不同的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)。蔗糖作為碳源也經(jīng)常被添加到培養(yǎng)基中，濃度多在2%3%的范圍內(nèi)。一般認(rèn)為，生長素能促使細(xì)胞進(jìn)入持續(xù)分裂增殖狀態(tài)，提高增殖倍數(shù)，而細(xì)胞分裂素促使細(xì)胞進(jìn)入分化狀態(tài)[6]。除此之外，有研究表明在初代培養(yǎng)中對(duì)愈傷組織增殖最有效的是2，4D,但它同時(shí)也是一種器官發(fā)生抑制劑，不能用于啟動(dòng)根和芽的分化。在牡丹組織培養(yǎng)過程中嚴(yán)重的褐化現(xiàn)象在很大程度上抑制了培養(yǎng)材料的再生、降低了增殖系數(shù)。何松林[8]等通過研究得出，10001500mg/L聚乙烯吡咯烷酮（PVP）對(duì)褐化的抑制效果最好。研究表明，牡丹組培所需溫度以24℃26℃最為適宜，超過26℃就會(huì)刺激玻璃化苗的產(chǎn)生，溫度較低則會(huì)降低光合作用，抑制試管苗的生長[9]。晝夜無溫差會(huì)導(dǎo)致物質(zhì)積累減少，葉綠素含量減少，酶功能失調(diào)，蛋白質(zhì)含量降低，從而導(dǎo)致玻璃化苗的產(chǎn)生。此外，在光照條件上，牡丹組織培養(yǎng)適宜條件為2000Lx、10h/d。濕度方面，一般認(rèn)為采用通透性較好的棉塞等
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