植物組織培養(yǎng)的原理、技術(shù)及其應(yīng)用-在線瀏覽
2025-01-01 08:44本頁面
【正文】 要包括培養(yǎng)基的配制、無菌條件和培養(yǎng)條件等。不同的外植體、不同的培養(yǎng)方法、不同的培養(yǎng)目的等，都要求采用不同的培養(yǎng)基。 首先，培養(yǎng)基中含有大量的水分，可以滿足外植體生長對水分的需要。碳源一般采用蔗糖 (質(zhì)量濃度 30～50g糖除了給外植體提供碳源外，還可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透勢。生長素類可采用 IAA、 IBA、 2，4D 和 NAA 等，細(xì)胞分裂素類常使用 KT、 6BA、 ZT 等。 維生素中， B1(硫胺素 )是必需的，而煙酸、 B6(吡哆醇 )和肌醇 (環(huán)己六醇 )雖不是必需的，但對生長有促進(jìn)作用，所以一般也添加到培養(yǎng)基中。 根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，可將植物組織培養(yǎng)分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。所采用的固化劑多為瓊脂，最適濃度一般為 %～ 1%(重量 /體積 )。為了保證液體培養(yǎng)時(shí)的氧氣供應(yīng)，可在液體培養(yǎng)基上架設(shè)紙橋或進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。因此，最后還要將培養(yǎng)基的 pH 值調(diào)節(jié)到適當(dāng)?shù)乃?。一般常用的培養(yǎng)基有下列幾種： MS 培養(yǎng)基 (Murashige 和 Skoog， 1962)、米勒培養(yǎng)劑 (Mil1er， 1963)， H培養(yǎng)基 (Bourgin 和 Nitsch， 1967)、改良懷特培養(yǎng)基 (White， 1963)、 N6 培養(yǎng)劑 (朱至清等，1974)。 外植體 (explant)的消毒通常采用氯化汞、過氧化氫、次氯酸鈣、次氯酸鈉或 70%的酒精等，消毒后需用無菌水充分沖洗。接種時(shí)須在超凈工作臺上進(jìn)行，操作人員的手也必須經(jīng)常用 70%的酒精擦拭、消毒。 培養(yǎng)條件 生長在自然界中的植物體所需的光、溫、
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