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發(fā)酵工藝學(xué)復(fù)習(xí)-在線瀏覽

2025-07-25 18:59本頁面
  

【正文】       對微生物的生長代謝無貢獻(xiàn)常為數(shù)種結(jié)構(gòu)極相似的化合物群體其生物合成常與微生物的分化過程同步  1).次級(jí)代謝產(chǎn)物合成與初級(jí)代謝的關(guān)系次級(jí)代謝產(chǎn)物合成所需要的前體由初級(jí)代謝產(chǎn)物提供次級(jí)代謝產(chǎn)物合成所需要的能量由初級(jí)代謝過程提供次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成一般受碳、氮分解代謝物的阻遏     由初級(jí)代謝產(chǎn)物衍生次級(jí)代謝產(chǎn)物的途徑主要有以下幾種:葡萄糖碳架(carbon skeleton)摻入途徑莽草酸(shikimate)途徑與核苷(nucleotide)有關(guān)的途徑聚酮體(polyketide)和聚丙酸途徑由氨基酸(amino acid)衍生的 途徑甲羥戊酸(mevalonate)途徑其他復(fù)合途徑2).次級(jí)代謝產(chǎn)物生物合成的調(diào)節(jié)方式酶的誘導(dǎo)有些次級(jí)代謝產(chǎn)物合成的關(guān)鍵酶(key enzymes)受分解代謝產(chǎn)物的阻遏,同時(shí),有些酶還受一些化合物(前體)的誘導(dǎo)色氨酸對生物堿合成酶的誘導(dǎo)作用蛋氨酸對頭孢菌素合成酶的誘導(dǎo)作用甘露聚糖對鏈霉素合成中aD甘露糖酶的誘導(dǎo)反饋調(diào)節(jié)青霉素的生物合成受賴氨酸的反饋抑制芳香族氨基酸反饋抑制殺假絲菌素的生物合成麥角生物堿的生物合成途徑中二甲烯丙基轉(zhuǎn)移酶受麥角堿的反饋抑制芳香族氨基酸為殺假絲菌素生物合成途徑的分枝途徑的終點(diǎn)產(chǎn)物,對早期共同途徑的一個(gè)酶具有反饋調(diào)節(jié)作用分解代謝物的調(diào)節(jié)能荷調(diào)節(jié)四環(huán)素、金霉素等的生物合成受能荷的調(diào)節(jié)――胞內(nèi)ATP含量高時(shí)抑制四環(huán)素和金霉素的生物合成能荷受培養(yǎng)基中的磷酸鹽含量、底物濃度等因素的影響4 酶生產(chǎn)的調(diào)節(jié) 調(diào)節(jié)酶合成效率的主要因素誘導(dǎo)作用(酶的誘導(dǎo))微生物細(xì)胞內(nèi)酶的合成通常要受到阻遏作用,需要加入誘導(dǎo)劑才能使酶能夠過量積累。用非誘導(dǎo)型基質(zhì)培養(yǎng)產(chǎn)生菌,如用2硝基苯a1阿拉伯糖為底物可以獲得阻成型的b半乳糖苷酶的產(chǎn)生菌。解除酶生產(chǎn)過程中代謝終點(diǎn)產(chǎn)物阻遏作用的方法加入某種代謝途徑的抑制劑,限制終點(diǎn)產(chǎn)物的積累在線分離某種代謝途徑的終點(diǎn)產(chǎn)物,如NH4+等篩選抗代謝終點(diǎn)產(chǎn)物類似物的突變株篩選某種代謝終點(diǎn)產(chǎn)物的營養(yǎng)缺陷型突變株分解代謝物阻遏作用二次生長現(xiàn)象(diauxie)分解代謝物阻遏作用的定義:當(dāng)微生物在含快速利用的碳源(如葡萄糖)的培養(yǎng)基中生長時(shí),會(huì)在轉(zhuǎn)錄的水平上抑制多種酶的合成?;騽┝刻岣呙负铣尚实姆椒ㄌ岣呙负铣尚手饕袃煞N方法提高單基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯效率,如添加誘導(dǎo)物、解除反饋?zhàn)瓒糇饔?、解除分解代謝物阻遏作用等提高細(xì)胞內(nèi)該酶基因的劑量:通過基因工程的手段進(jìn)行5 生產(chǎn)菌種的種類、來源和選育自然選育    誘變選育     雜交育種     分子育種1)自然選育的概念、原理、步驟和特點(diǎn)  概念:在生產(chǎn)過程中,不經(jīng)過人工處理,利用菌種的自發(fā)突變(spontaneous mutation)而進(jìn)行菌種篩選的過程稱為自然選育。對于放線菌和霉菌的孢子,則可采用玻璃株和石英砂打散后用濾紙或棉花過濾。步驟: 選擇出發(fā)菌株制備菌懸液誘變劑量的選擇誘變劑量的選擇復(fù)合誘變劑初篩根據(jù)菌落的形態(tài)變化篩選根據(jù)特定產(chǎn)物的合成機(jī)理或菌種特性篩選,即所謂的理性化篩選。3)幾種典型的誘變劑及其作用原理     紫外線 氮芥   亞硝酸 4)雜交育種   放線菌的雜交原理霉菌的雜交原理5)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體以及原生質(zhì)體融合的概念所謂原生質(zhì)體融合(protoplast fusion)就是在高滲的條件下把兩個(gè)親本的細(xì)胞通過酶解瓦解,得到原生質(zhì)體,并在助融合劑如PEG的作用下使兩個(gè)親本的原生質(zhì)體發(fā)生融合的過程。6 培養(yǎng)基1)碳源   定義以及常用碳源的名稱如葡萄糖、淀粉、乳糖等定義:“碳的來源”,是指經(jīng)微生物吸收轉(zhuǎn)化后可以提供菌體碳元素的營養(yǎng)物質(zhì)2)氮源    定義以及常用氮源的名稱如蛋白胨、黃豆餅粉、玉米漿、酵母抽提物等 定義:“氮的來源”,是指被微生物吸收轉(zhuǎn)化后可以提供組成菌體的氮元素的營養(yǎng)物質(zhì)。一般工業(yè)發(fā)酵培養(yǎng)基的碳氮比為100:碳氮比適中時(shí)有利于菌體生長,碳氮比過高或過低使有利于代謝產(chǎn)物的積累。6)前體    定義以及青霉素、紅霉素等生物合成中使用的前體前體(precursor):直接或經(jīng)轉(zhuǎn)化后可以作為次級(jí)代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)單元整合到次級(jí)代謝產(chǎn)物中,并促進(jìn)次級(jí)代謝產(chǎn)物合成的小分子化合物。d、消沫槳:耙式消沫槳渦輪式消沫器e、溫度控制裝置:蛇管和夾套f、空氣分布器環(huán)型、置于罐底g、視鏡h、管道與閥門進(jìn)氣與排氣放料管道蒸汽管道取樣閥補(bǔ)料管道i、電極(probe),包括溫度
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