酶的結(jié)構(gòu),純化及活性十一-在線瀏覽
2025-02-23 09:42本頁面
【正文】 鍵 要求嚴(yán)格，而不管鍵兩端所連基團(tuán)的性質(zhì) 2. 基團(tuán)特異性 要求底物具有特定的 化學(xué)鍵 ，而且對鍵的一端所連 基團(tuán) 也有一定要求 3. 絕對特異性 酶對作用的底物要求相當(dāng)嚴(yán)格，甚至 只能催化一種底物進(jìn)行化學(xué)反應(yīng) 絕對特異性 酶只作用于特定結(jié)構(gòu)的底物，進(jìn)行一種專一的反應(yīng)，生成一種特定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物 。 酶僅作用于立體異構(gòu)體中的一種。 六、酶原和酶原的激活 酶原： 沒有活性的酶的前體。 本質(zhì)： 酶原的激活實(shí)質(zhì)上是酶活性部位形成或暴露的過程（ 不可逆 ）。舉例：胰蛋白酶 消化酶以酶原形式存在，可保護(hù)消化腺不被破壞 ?參與凝血因子的激活過程 凝血因子在機(jī)體受傷時(shí)被激活為蛋白酶，參與凝血。 ?參與代謝調(diào)控和信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 六、同工酶（ isoenzyme） （一）定義： 催化相同的化學(xué)反應(yīng)，但其蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和免疫性能等方面都存在明顯差異的一組酶。 心肌梗死和肝病病人血清 LDH同工酶譜的變化 1 酶活性 心肌梗死酶譜 正常酶譜 肝病酶譜 2 3 4 5 第四節(jié) 酶的分離純化與活力測定 一 .酶的分離純化 基本原則： 提取過程中避免酶變性而失去活性 ? 防止強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫和劇烈攪拌等； ? 要求在低溫下操作，加入的化學(xué)試劑 不使酶變性，操作中加入緩沖溶液。 粗制分離： 用鹽析法、等電點(diǎn)沉淀法、有機(jī)溶劑分級分離法等對目標(biāo)酶進(jìn)行粗分離 精制分離： 用柱層析法、梯度離心等對粗酶進(jìn)一步純化 酶制劑的脫鹽、濃縮、干燥和保存 ? 用透析法、超濾法、凝膠過濾法來脫鹽； ? 用沉淀法、吸收法、超濾法等除去水分，稱濃縮； ? 用冷凍真空干燥法對酶做處理，便于運(yùn)輸；酶需低溫保存 基本操作程序 酶分離純化時(shí)的注意事項(xiàng) ?純化時(shí)保持低溫，溫度越低越好 ?使用溫和的操作條件 ?使用一些保護(hù)試劑，如金屬螯合劑等 ?盡量縮短純化時(shí)間 二、酶活力的測定 酶活力 ： 又稱為酶活性，通常以在一定條件下酶所催化的 化學(xué)反應(yīng)速度 來表示。 酶活力測定 酶活力測定就是測定一定量的酶，在單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物 (P)的生成量或底物（ S）的消耗量。 酶活測定時(shí)一般測定產(chǎn)物的增加量 在反應(yīng)過程中產(chǎn)
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