【正文】 過正常生產(chǎn)過程中最大次數(shù)的清洗 和滅菌，成功通過微生物侵入實驗。 物理方法：染料染色試驗、鹽水侵浸試驗、高壓微孔檢漏機 …… . （三）容器密封性測試 用物理或微生物挑戰(zhàn) 的方法測試容器密封性，來證明無菌藥品在有效期內(nèi)的無菌性。 無菌工藝和終端滅菌工藝驗證的區(qū)別 工藝驗證：培養(yǎng)基灌裝驗證，即系統(tǒng)驗證。 小水針和凍干粉針劑驗證項目的差異 不同劑型驗證項目 小容量注射劑 凍 干粉 針 劑 過濾系統(tǒng)驗證 需要 需要 培養(yǎng) 基灌裝驗證 驗證至灌裝結(jié)束 除灌裝外，尚包括部分凍干程序，目的是尚要考察凍干區(qū)域的裝 載和卸載過程 無菌分裝工藝 嚴格執(zhí)行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（ GMP），是無菌粉針劑生產(chǎn)的重要質(zhì)量保證。 濾膜的微生物截流量 測試：進行除菌的過濾挑戰(zhàn)試驗，因為濾膜的過濾能力可能同藥液的性質(zhì)有關(guān)（比如粘度等），故推薦采用藥液進行。 濾膜的完整性測試：采用起泡點試驗或擴散流量試驗進行濾膜過濾前后的完整性測試。 過濾系統(tǒng)相容性測試：包括過濾溶出物的測定、濾液同過濾系統(tǒng)是否可能發(fā)生相互作用（如濾液的pH、色澤、濁度等是否發(fā)生改變）。 批量大于 5000瓶；灌裝和培養(yǎng)的數(shù)量不小于 5000瓶 判斷標準：根據(jù) 95%的可信限，污染概率不超過 %計算而得，具體見下表。 模擬生產(chǎn)過程：模擬最差生產(chǎn)條件（最長生產(chǎn)時間：最多人員；可能的生產(chǎn)設(shè)備現(xiàn)場調(diào)整 … ） 培養(yǎng)基灌裝驗證 除菌過濾系統(tǒng)適應(yīng)性驗證，包括過濾 系統(tǒng)相容性測試、過濾前后濾膜完整性測試、濾膜的微生物截留量測試。 培養(yǎng)基模擬灌裝驗證，屬于對生產(chǎn)系統(tǒng)的驗證。 凍干粉針劑 分料 配制藥液、除菌過濾 無菌 凍干 軋蓋 燈 包 入 西林瓶清洗和滅菌 灌裝 壓塞 外洗 檢 裝 庫 涉及除菌的工藝步驟 um（或更少） 避免人員直接接觸除菌后的藥液、容器 無菌生產(chǎn)過程 以防止污染為目的，消除后續(xù)導致污染的各種可能性 控制藥液存放溫度和時間 嚴格的原料微生物標準 EU 靜態(tài) 動態(tài) BU潔凈區(qū)微生物污染限度參考標準（動態(tài) ) 級別 塵粒最大允許數(shù) /m3 級別 空氣樣 cfu/ m3 沉降菌 (Ф 90mm) cfu/4 小時 (b) 接觸碟 (Ф 55mm) cfu/碟 5 指手套 cfu/手套 ≥ (d) ≥ 5um ≥ (d) ≥ 5um A 3500 1 3500 1 A ＜ 1 ＜ 1 ＜ 1 ＜ 1 B 3500 1 350000 2020 B 10 5 5 5 C 350000 2020 3500000 20200 C 100 50 25 D 3500000 20200 不做規(guī)定 不做規(guī)定 D 200 100 50 終端滅菌及無菌生產(chǎn)工藝質(zhì)量保證的差異 （二）無菌生產(chǎn)工藝及驗證 過濾除菌工藝 無菌分裝工藝 比較項目 終端滅菌工藝 無菌生產(chǎn)工藝 SAL 106 103 關(guān)鍵區(qū)環(huán) 境潔凈度 大輸液：灌封為百級環(huán)境下的局部百級 小水針：灌封萬級 灌封為萬級環(huán)境下的局部百級，其他同 中控指標 微生物負荷、耐熱性滅菌釜中的溫度控制 微生物負荷（設(shè)置警戒線）灌封區(qū)不得檢出 污染菌，過濾前后濾膜的完整性 人 員 要求嚴格 更嚴格（ EG：操作方式、走動緩慢、身體表面微生物的檢測 …… ） 熱分布和微生物挑戰(zhàn)試驗同時考察了滅菌設(shè)備在執(zhí)行特定滅菌工藝是賦予產(chǎn)品的 F0 值。 芽孢接種量的計算： Ni=10Do（ lgNo＋ 6） /Di 其中 Ni為生物指示劑耐熱孢子接種數(shù)量 No為預定產(chǎn)品中滅菌前污染微生物的限度 Do為污染微生物允許的最大 D值 Di為生物指示劑耐熱孢子在產(chǎn)品中的 D值 總結(jié)： 運行滅菌程序后，含芽孢的產(chǎn)品應(yīng)同無菌檢查。 植入芽孢的產(chǎn)品放置在冷點部位。 根據(jù)芽 孢的 D值，可計算每瓶產(chǎn)品中需要接種的芽孢數(shù)量。 微生物調(diào)賬試驗：證明該工藝能殺滅一定污染量和 D值的微生物，并使無菌保證值不小于 6. 不同裝載方式：最小裝載量、最大裝載量 同一產(chǎn)品不同濃度：不同藥液濃度對熱穿透的影響 重要標準：產(chǎn)品中 F0MEAN177。 放置位置 1 5 2 9 3 6 4 10 7 8 11 12 以空載試驗結(jié)果為基礎(chǔ) 空載熱分布試驗 找出 冷點和熱點 空載熱分布、滿載熱分布、熱穿透試驗 熱效應(yīng)的物理學測量 工藝驗證要求 四、終端滅菌、無菌生產(chǎn)工藝及驗證 （一）終端滅菌工藝及驗證 （ 3）對于過濾除菌工藝同時采用了流通蒸汽輔助滅菌的產(chǎn)品，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特性明確為終端滅菌工藝或無菌生產(chǎn)工藝。 小容量注射劑 （ 1）應(yīng)首選終端滅菌工藝，計數(shù)要求和工藝驗證要求同大容量注射劑。 除菌過濾系統(tǒng)適應(yīng)性驗證試驗：包括過濾系統(tǒng)相容性測試、過濾前后濾膜完整性測試、濾膜的微生物截留量測試。 培養(yǎng)基模擬灌裝驗證試驗：最少在線灌裝 3批。 微生物挑戰(zhàn)試驗：所用生物指示劑的耐熱性及數(shù)量應(yīng)對滅菌工藝構(gòu)成必要的挑戰(zhàn)：生物指示劑的耐熱性應(yīng)大于產(chǎn)品中常見污染菌的耐熱性。 （ 3）工藝驗證 （三）不同劑型無菌保證工藝的要求 大容量注射劑 （ 1）應(yīng)采取終端滅菌工藝，建議首選過度殺滅法（ F0≥ 12），如產(chǎn)品不能耐受，可考慮采用殘存概率法（ F0值為 8～ 12），但均應(yīng)保證產(chǎn)品滅菌后的 SAL不大于 106。 注射劑中大容量注射劑、小容量注射劑和粉針劑之間的互改。對于有充分的依據(jù)證明不適宜采用終端滅菌工藝（ F0≥ 8）且臨床必需的品種。原則上首選劑型應(yīng)能采用終端滅菌工藝（ F0≥ 8） ,以使 SAL小于 106。 （二）注射劑劑型懸著的原則 F0 EG：嗜熱脂肪芽孢桿菌（常規(guī) D值在 ～ Ft 鐘）在復方氨基酸注射液中的 D值為 ， 在 30%的葡萄糖溶液中的 D值為 。無菌保證水平：（ SAL， Sterility Assurance level） SAL = F0 / D121 － lgN0 F0：標準滅菌時間 N0：滅菌前染菌量 D121： 121℃下滅殺微生物 90%或殘存率為 10%時所需的時間 SAL：為產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物殘存概率的負對數(shù) lgN F0值既標準滅菌時間， 相當于產(chǎn)品在 121℃下的滅菌時間 lgN0 F0 = D121（ lgN0－ lgNt） F0和 SAL的關(guān)系 △ lgN F0 = 8 N0 = 100CFU SAL = 6（濕熱滅菌） D121 = 1時 lgNt SAL除了和 F0有關(guān)，尚且同染菌量及所染菌的耐熱 121℃ 117℃ 參數(shù)有關(guān)。無菌生產(chǎn)工藝：無菌系統(tǒng)環(huán)境下，通過除菌過濾或無菌操作，消除導致污染的可能性而保證。終端滅菌工藝：在控制微生物污染量的基礎(chǔ) 上，灌封后濕熱滅菌。生產(chǎn)過程控制 原材料 環(huán)境 與藥監(jiān)系統(tǒng)相關(guān)部門的共同實施 技術(shù)難度大、缺少理論與實踐經(jīng)驗 不合理的滅菌工藝 :將 F0、 SAL引入工藝評價中 實施中的關(guān)注點 注射劑劑型改變的合理性：無菌保證水平的高低、穩(wěn)定性的考慮。 現(xiàn)階段擬著重解決的問題 滅菌工藝缺乏必要的驗證 注射劑劑型選擇不合理 二、 整體考慮 面臨主要問題： 2020年 8月 14日中心正式印發(fā)并上網(wǎng)公布。經(jīng)主任辦公會先后三次審核，提出了更細致全面的要求，相關(guān)人員對此反復進行討論與修改，使之更趨完善。 2020年 11月起先后組織三次實地調(diào)研，根據(jù)調(diào)研報告提出初 步的原則要求，經(jīng)部間協(xié)調(diào)會討論形成修改稿。 前期的工作：中心各層面對注射劑滅菌檢查學術(shù)活動對國外相關(guān)技術(shù)指導原則的學習、參考組織展開對滅菌工藝的實地調(diào)研。 注射制劑無菌保證工藝研究與驗證技術(shù)要求 專 題 研 討 會 國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心 2020年 11月 16日 北京 注 射劑無菌保證工藝研究與驗證的原則性要求 一、 前言 “欣佛”事件的啟示。 在審注射劑品種的妥善處理。 起草經(jīng)過： 該過程充分反映了問題的復雜性與重要性，體現(xiàn)了藥品審評中心對此的高度重視。注射劑滅菌工藝不合理 滅菌工藝研究不全面 GMP與發(fā)達國家要求還存在差距，理念與認知不到位。提升理念與認知：無菌檢查的局限性、驗證的 重要性等 涉及的品種廣、時間緊 對臨床安全有效性可能產(chǎn)生的影響 充分認識其現(xiàn)實性、以實踐促進完善 三、具體原則及要求 （一）基本概念： A） 與產(chǎn)品無菌保證相關(guān)的所有工藝體系 設(shè)備 滅菌工藝 人員衛(wèi)生 B）注射劑無菌保證工藝主要為： t 注意：污染菌在不同的產(chǎn)品中可能耐熱性不同。 溶液劑型產(chǎn)品滅菌方法選擇的決策樹 產(chǎn)品是否可以在 121℃濕熱滅菌 15分鐘 否 是 產(chǎn)品是否可以濕熱滅菌 F0≥ 8分鐘 ，達到 SAL≤ 106 采 用 高壓滅菌鍋 121℃ 15 分鐘 是 否 處方是否可以通過微生物滯留過濾器過濾 采用濕熱滅菌 F0≥ 8分鐘 是 否 無菌配液和灌封 除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合 無菌生產(chǎn)工藝品種，其 SAL