【正文】 DF1 ④ TDC interaction CCR7 ELC ⑤ TB interaction CXCR5 CCR4 BCA1 MDC ⑥ Th2 Eosinphil Basophil ⑧ Th1 Macrophage ⑦ 1. 在白血病中的作用： CCR9 T淋巴性細(xì)胞性白血病 CD4+ T細(xì)胞 抗凋亡 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞惡性增殖； 結(jié)果： CXCR5 正常細(xì)胞細(xì)胞 促進(jìn)凋亡 參與免疫細(xì)胞更新； 作用： CK及 CKR與臨床疾?。? 銀屑病素 小膠質(zhì)細(xì)胞 哮 喘 自 身 免 疫 性 疾 病 銀屑素生理功能 — 趨化作用 J. Invest. Dermatol. 1996, 107:5. 小膠質(zhì)細(xì)胞表面不同的趨化因子受體的表達(dá) —— 兩類新的小膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定 J. Immunol. 2022, 177: 364456 NKT細(xì)胞 CCR9信號通路與哮喘的 直接因果關(guān)系 J. Immunol. 2022, 175:4914 趨化因子受體 SLECD4+ T細(xì)胞向 Th2偏倚 Immunology. 2022, 11: 2274 J. Immunol. 2022, 174: 1281 (Growth factor) ? 具有促進(jìn)不同類型細(xì)胞生長效應(yīng)的細(xì)胞因子，如 TGFβ 、 FGF、 EGF、 VEGF、 NGF、PDGF等。 L選擇素 SLex 整合素 ICAM1 粘附 內(nèi)皮細(xì)胞 炎癥 趨化因子 5. 趨化因子 (Chemokine， CK): 能使細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動的小分子蛋白。 ? 與自身免疫病： ? 與腫瘤：引起腫瘤組織缺氧，血管損傷和血栓形成，誘發(fā)局部炎癥，促進(jìn) T細(xì)胞、 NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，提高宿主免疫力，抑制腫瘤生長。 TNF主要有 2種： TNFα: 巨噬細(xì)胞產(chǎn)生； TNFβ: 又稱為淋巴毒素 α(lymphotoxin α ， LTα ），主要由活化 T細(xì)胞產(chǎn)生； TNFα 和 TNFβ 共用受體，功能相似。 ? 1984, TNFa的 cDNA得以克隆，后來相繼克隆了該家族的多個成員，構(gòu)成了 TNF超家族細(xì)胞因子。 ? 腫瘤：直接或間接抑制腫瘤生長，但是對某些腫瘤反而有促進(jìn)作用。 病毒 病毒復(fù)制 抑制病 毒復(fù)制 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) IFNa IFN誘導(dǎo)蛋白 誘導(dǎo)刺激 胞核 胞核 I型干擾素 α：抗病毒 10 –12 g干擾素能在培養(yǎng)組織中保護(hù)一百萬個細(xì)胞免受一千萬個病毒顆粒的感染 ? IFN與臨床： ? 自身免疫?。捍傺?/抑炎，一些實(shí)驗(yàn)表明 IFNγ 通過抑制 Th17的分化，從而調(diào)節(jié)炎癥和自身免疫性疾病。有抗病毒、抗腫瘤的活性，但免疫調(diào)節(jié)的作用比 IFNα/β 重要的多，有較嚴(yán)格的種屬特異性。 抗細(xì)胞增殖：與抗病毒蛋白合成的機(jī)制相似 。 ? 成熟的 IFNβ 有 166個氨基酸 ,3個半胱氨酸 ? 成熟的 IFNγ 由 143個氨基酸組成，以同源雙體形式存在，對酸不穩(wěn)定。 ? 1957年從病毒感染細(xì)胞培養(yǎng)中分離到一種生物活性物質(zhì)，因它可以干擾其它病毒的復(fù)制而被命名為干擾素。 ? 根據(jù)刺激不同造血細(xì)胞系或不同分化階段的細(xì)胞有不同的命名 GCSF(粒細(xì)胞集落刺激因子 ) ? 1983年命名 ,1986年克隆成功 . ? 人 GCSF基因位于 17號染色體 , ? 人類有兩種不同的 GCSF DNA,分別編碼含 207和 204個氨基酸的前體蛋白 ,均有 30個氨基酸的先導(dǎo)序列 ,除了在 35位插入了 3個氨基酸外 ,其余序列相同 . ? 有 5個半胱氨酸 36=42,64=74,17游離 . ? 來源 ? 多種細(xì)胞可產(chǎn)生 – 內(nèi)毒素、 TNFα 、 IL IFNγ 活化單核 /巨噬細(xì)胞可產(chǎn)生， – 刺激成纖維、內(nèi)皮細(xì)胞也可產(chǎn)生， – 某些腫瘤細(xì)胞可產(chǎn)生 生物學(xué)活性 ? 主要作用于中性粒細(xì)胞譜系造血細(xì)胞的增殖、分化和活化 ? 對人粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、成纖維、平滑肌細(xì)胞等有趨化作用。 TSF ( thymocyte stimulating factor ). ? 1983年 Taniguchi從 ConA刺激的 Jurkat白血病 T細(xì)胞中克隆成功 – IL2含有 133aa，分子量為 – N端有糖基化修飾 – 三個半胱氨酸： 5 10 125位 ? IL2主要產(chǎn)生細(xì)胞： – 主要由活化 CD4+ Th1分泌 ,CD8+T和 NK也能產(chǎn)生 – T細(xì)胞腫瘤細(xì)胞系 :如人 Jurkat和小鼠 EL4 – T淋巴細(xì)胞雜交瘤 :、 HT24A等 ? IL2受體： CD25(α)； CDl22(β)； CDl32(γc) IL2的生物學(xué)活性 ? 作用具有沿種系譜向上有約束性，向下無約束性： 促進(jìn)活化的 T細(xì)胞進(jìn)入 S期，維持細(xì)胞的增殖，刺激產(chǎn)生： MHCII， IFNγ ， IL 6， LTα ， CSF。 TMF ( Tcell mitogenic factor )。 TMF ( thymocyte mitogenic factor )。 TCPA ( T colonypromoting activity )。 SCIF ( secondary cytotoxic Tcell inducing factor )。 MAFC I ( macrophageactivating factor for cytotoxicity I )。 LMF ( lymphocyte mitogenic factor )。 EDF ( eosinophil differentiation factor )。 34 IL2 ? 1976發(fā)現(xiàn) ,1979年命名 ,1983年克隆成功 ? 1965年發(fā)現(xiàn)混合白細(xì)胞培養(yǎng)上清中存在一種可溶性因子，可促進(jìn)細(xì)胞生長，命名為母細(xì)胞形成因子 （ Blastogenic Factor， BF) ? 1976年發(fā)現(xiàn)小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中含有一種刺激胸腺細(xì)胞生長的因子，故稱為 T細(xì)胞生長因子 （ T cell growth factor，TCGF） ? 1979年統(tǒng)一命名為白細(xì)胞介素 2（ interleukin 2， IL2） ? IL2別名 – BF ( blastogenic factor )。 16 11 ? IL8（趨化因子） ? 其它 IL： IL 13 5 ? 集落刺激因子 IL3 27 29 (結(jié)構(gòu)相似 ) ? IL12 家族 IL12 26 22 19 30 11 15 7 33 ? IL2 家族： IL2 1Ra Interleukin 來自 interleukin，意指白細(xì)胞之間信使分子，中文譯為白細(xì)胞介素。 ? 基因工程技術(shù) – 從工程細(xì)胞如大腸桿菌、酵母菌等產(chǎn)生重組細(xì)胞因子。 篩選潛在的細(xì)胞因子的策略 ? 未知蛋白的生物信息學(xué)分析： – 無功能性文章報道或無免疫相關(guān)的功能性報道 – 具有潛在的信號肽或被證實(shí)為分泌蛋白 – 蛋白氨基酸數(shù)目少于 300個 – 主要在免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)中表達(dá) 5 獲得的基因， ORF克隆連接在真核表達(dá)載體 轉(zhuǎn)染 293T細(xì)胞，檢測其分泌表達(dá) ? 正常細(xì)胞： – 未活化時，產(chǎn)生很少； – 活化后，產(chǎn)量可提高成百上千倍；如活化的淋巴細(xì)胞、活化的單核 /巨噬細(xì)胞、 NK細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。目前的新細(xì)胞因子克隆化策略主要利用反向生物學(xué)原理，從人類基因組發(fā)現(xiàn)新細(xì)胞因子或其受體編碼基因。人類基因組研究顯示，不僅有新成員存在于已有的細(xì)胞因子家族中，還會找到全新的家族，尚有多種細(xì)胞因子有待發(fā)現(xiàn)。細(xì)胞因子和細(xì)胞因子受體 Cytokine and Cytokine Receptor 王 露 北京大學(xué)人類疾病基因研究中心 細(xì)胞因子概念 ? 細(xì)胞因子（ Cytokine）是細(xì)胞應(yīng)對各類刺激而分泌的小分子蛋白，它們調(diào)控細(xì)胞生長與分化、組織的發(fā)育與修復(fù)等多種生命過程，在天然免疫和獲得性免疫中起著重要作用。 細(xì)胞因子研究歷史 ? 1957年，發(fā)現(xiàn)干擾素（ IFN） ? 1969年，提出淋巴因子（ lymphokine）的概念 ? 1974年，定名細(xì)胞因子（ cytokine） ? 近年來，細(xì)胞因子發(fā)展迅猛，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn) 200多種細(xì)胞因子，成立專門的細(xì)胞因子學(xué)會，如國際細(xì)胞因子學(xué)會（ international cytokine society）；創(chuàng)辦研究細(xì)胞因子的專門雜志，如 《 Cytokine》 等。 怎樣確定一種物質(zhì)是細(xì)胞因子？ ? 從人類基因組發(fā)現(xiàn)新細(xì)胞因子 由于體內(nèi)含量較高的細(xì)胞因子大部分已被克隆化，傳統(tǒng)的路線已經(jīng)難以發(fā)現(xiàn)新免疫分子。 傳統(tǒng)生物學(xué)策略 發(fā)現(xiàn)生物活性－鑒定細(xì)胞因子蛋白－克隆基因－細(xì)胞表型－動物模型－人體內(nèi)功能及與疾病關(guān)聯(lián) 反向生物學(xué)策略 數(shù)據(jù)庫 DNA序列 －生物信息學(xué)－蛋白質(zhì)表達(dá)－細(xì)胞表型－動物模型－人體內(nèi)功能及與疾病關(guān)聯(lián)。 IL IL IL1 IL18 和 TNF— 主要由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子 細(xì)胞因子的來源 ? 腫瘤細(xì)胞 – 如 Jurkat細(xì)胞 (IL2,3)、骨髓瘤細(xì)胞 (IL6) 、WEHI3 (IL3)等。 細(xì)胞因子的分類 根