【正文】 C C C X C3C chemokine receptor (XCR) CC chemokine receptor (CCR) CXC chemokine receptor (CXCR) CX3C chemokine receptor (CX3CR) Chemokine receptors CK及 CKR生物學(xué)功能： CXC CC SDF1 GRO IL8 IP10 PF4 Mig MIP1α MCP4 TECK Eotaxin 調(diào) 節(jié) 造 血 促 進(jìn) 血 管 生 成 抑 制 血 管 生 成 參 與 器 官發(fā)生 CK及 CKR在免疫應(yīng)答中的作用： Lymph node B cells Th Effector T cells Allergic reaction CCR3 eotaxin DTH reaction CCR5 MIP、 RANTES CXCR3 IP Mig CCR1 CCR5 Inflammatory Chemokines APC recruitment ① mature DC DC maturation CCR CCR CCR5 CCR CXCR4 Pathogens LPS、dsRNA、 TNFα、IL1 immature DC immature DC ② DC drainage CCR7 SLE ③ Homing of naive T and B cell CCR7 SLE CXCR4 SDF1 ④ TDC interaction CCR7 ELC ⑤ TB interaction CXCR5 CCR4 BCA1 MDC ⑥ Th2 Eosinphil Basophil ⑧ Th1 Macrophage ⑦ 1. 在白血病中的作用： CCR9 T淋巴性細(xì)胞性白血病 CD4+ T細(xì)胞 抗凋亡 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞惡性增殖； 結(jié)果： CXCR5 正常細(xì)胞細(xì)胞 促進(jìn)凋亡 參與免疫細(xì)胞更新； 作用： CK及 CKR與臨床疾病： 銀屑病素 小膠質(zhì)細(xì)胞 哮 喘 自 身 免 疫 性 疾 病 銀屑素生理功能 — 趨化作用 J. Invest. Dermatol. 1996, 107:5. 小膠質(zhì)細(xì)胞表面不同的趨化因子受體的表達(dá) —— 兩類新的小膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定 J. Immunol. 2022, 177: 364456 NKT細(xì)胞 CCR9信號(hào)通路與哮喘的 直接因果關(guān)系 J. Immunol. 2022, 175:4914 趨化因子受體 SLECD4+ T細(xì)胞向 Th2偏倚 Immunology. 2022, 11: 2274 J. Immunol. 2022, 174: 1281 (Growth factor) ? 具有促進(jìn)不同類型細(xì)胞生長效應(yīng)的細(xì)胞因子，如 TGFβ 、 FGF、 EGF、 VEGF、 NGF、PDGF等。 ? 1984, TNFa的 cDNA得以克隆，后來相繼克隆了該家族的多個(gè)成員，構(gòu)成了 TNF超家族細(xì)胞因子。 抗細(xì)胞增殖：與抗病毒蛋白合成的機(jī)制相似 。 TSF ( thymocyte stimulating factor ). ? 1983年 Taniguchi從 ConA刺激的 Jurkat白血病 T細(xì)胞中克隆成功 – IL2含有 133aa，分子量為 – N端有糖基化修飾 – 三個(gè)半胱氨酸： 5 10 125位 ? IL2主要產(chǎn)生細(xì)胞： – 主要由活化 CD4+ Th1分泌 ,CD8+T和 NK也能產(chǎn)生 – T細(xì)胞腫瘤細(xì)胞系 :如人 Jurkat和小鼠 EL4 – T淋巴細(xì)胞雜交瘤 :、 HT24A等 ? IL2受體： CD25(α)； CDl22(β)； CDl32(γc) IL2的生物學(xué)活性 ? 作用具有沿種系譜向上有約束性，向下無約束性： 促進(jìn)活化的 T細(xì)胞進(jìn)入 S期，維持細(xì)胞的增殖，刺激產(chǎn)生： MHCII， IFNγ ， IL 6， LTα ， CSF。 SCIF ( secondary cytotoxic Tcell inducing factor )。 34 IL2 ? 1976發(fā)現(xiàn) ,1979年命名 ,1983年克隆成功 ? 1965年發(fā)現(xiàn)混合白細(xì)胞培養(yǎng)上清中存在一種可溶性因子，可促進(jìn)細(xì)胞生長，命名為母細(xì)胞形成因子 （ Blastogenic Factor， BF) ? 1976年發(fā)現(xiàn)小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中含有一種刺激胸腺細(xì)胞生長的因子，故稱為 T細(xì)胞生長因子 （ T cell growth factor，TCGF） ? 1979年統(tǒng)一命名為白細(xì)胞介素 2（ interleukin 2， IL2） ? IL2別名 – BF ( blastogenic factor )。 ? 集落刺激因子 IL3 22 15 Interleukin 來自 interleukin，意指白細(xì)胞之間信使分子，中文譯為白細(xì)胞介素。人類基因組研究顯示，不僅有新成員存在于已有的細(xì)胞因子家族中，還會(huì)找到全新的家族，尚有多種細(xì)胞因子有待發(fā)現(xiàn)。 傳統(tǒng)生物學(xué)策略 發(fā)現(xiàn)生物活性－鑒定細(xì)胞因子蛋白－克隆基因－細(xì)胞表型－動(dòng)物模型－人體內(nèi)功能及與疾病關(guān)聯(lián) 反向生物學(xué)策略 數(shù)據(jù)庫 DNA序列 －生物信息學(xué)－蛋白質(zhì)表達(dá)－細(xì)胞表型－動(dòng)物模型－人體內(nèi)功能及與疾病關(guān)聯(lián)。 18 27 28A/B 6 KHF ( killer cell helper factor )。 TDF ( thymocyte differentiation factor )。 GCSF與臨床 粒細(xì)胞減少癥 腫瘤化療引起血細(xì)胞減少癥 貧血和骨髓發(fā)育異常綜合癥 (Interferon,IFN) ? 具有干擾病毒感染和復(fù)制功能的細(xì)胞因子。 ? IFNγ 上調(diào) MHCI類、 II類分子的表達(dá)； 促進(jìn) Th1細(xì)胞分化； 激活 NK、巨噬細(xì)胞； 抑制 Th2細(xì)胞、肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。 ? TNFa具有三條不同的信號(hào)通路： ? 細(xì)胞凋亡通路 ? NFKB通路 ? JNK信號(hào)通路 ? 通過不同的信號(hào)通路， TNFa可以產(chǎn)生不同的生物學(xué)效應(yīng)。 活化的淋巴細(xì)胞 TGFβ 水平增高。 EMT的核心過程是細(xì)胞極性模式的變遷 上皮細(xì)胞的穩(wěn)定極性模式消失，代之以間質(zhì)細(xì)胞的動(dòng)態(tài)極性模式。胞外區(qū)有 35個(gè)由 40個(gè)氨基酸殘基組成的重復(fù)亞單位；每個(gè)重復(fù)亞單位含有 46個(gè)保守的半胱氨酸；形成 “ 配體結(jié)合區(qū)域。 ?C 高親和力IL2 受體 ? ? ? ? a a 低親和力IL2受體 中等親和力IL2 受體 IL2 IL2 受 體 IL2R IL4R IL7R IL9R IL15R IL21R ? 鏈參與組成的細(xì)胞因子受體 共用的 ? 鏈 ?C突變導(dǎo)致 T細(xì)胞發(fā)育障礙 Cytokine receptors that share ?C subunit and their functions. gp130參與造血因子受體家族高親和力受體形成和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，不直接參與配體結(jié)合 細(xì)胞因子受體共用鏈的意義 ? 節(jié)約； ? 細(xì)胞因子功能替代； ? 共用鏈缺失或功能缺陷，將引起嚴(yán)重后果，如 IL2R亞家族的 g 鏈缺陷，將引起 SCID。 髓系細(xì)胞： GMCSF， GCSF， MCSF。 （ 5） NKT：促活化（ IL2, 12）。 ? 與細(xì)胞因子相關(guān)的疾病舉例： ? 慢阻肺：以中性粒細(xì)胞為主的多種炎性細(xì)胞活化后釋放過量的炎癥介質(zhì)，促進(jìn)氣道反復(fù)損失與修復(fù)，導(dǎo)致氣道重塑，引起狹窄，固定性氣流阻塞。 ? 集落形成實(shí)驗(yàn) ： 半固體培養(yǎng)系統(tǒng) ,造血因子集落刺激因子誘導(dǎo)干細(xì)胞形成某一或某些種類的集落 . ? 直接殺傷靶細(xì)胞 ： [3H]TdR、 51Cr釋放法 ? 抗病毒活性 ： 干擾素抑制病毒致病變的程度 ,計(jì)算樣品中 IFN的活性單位 ? 凋亡實(shí)驗(yàn)： 各種試劑盒、流式細(xì)胞儀 ? 趨化實(shí)驗(yàn) ： 瓊脂糖中的趨化實(shí)驗(yàn)、微孔小室趨化實(shí)驗(yàn) ? 遷移、侵襲實(shí)驗(yàn) ：劃痕試驗(yàn)、 transwell 細(xì)胞增殖常用方法 3Hthymidine incoroperation 法 將 PBMC 2 106/ml 置於 96well plate, 再加入 RPMI 培 養(yǎng) 基或添加有 LPS (lipopolysaccharide) , Con A, PHA, PWM 等 細(xì) 胞絲 裂 原 的培基。我們將細(xì)胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細(xì)胞生長、運(yùn)動(dòng)等的影響 。 細(xì)胞因子抑制劑： （ 1）可溶性細(xì)胞因子受體 , 可溶性 TNFα 受 體治療 RA類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 (RA) ； （ 2）細(xì)胞因子抑制物 , IL1受體拮抗劑（ IL1ra） 治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 （ 3）抗細(xì)胞因子或細(xì)胞因子受體抗體，抗 TNFα 治療 RA。人們最感興趣之一的便是細(xì)胞因子