【文章內(nèi)容簡介】 ons ? The first 26 VEGF constitute the signaling peptide showing that ? VEGF is a secreted protein. ? Alternative splicing of the VEGF gene produces four different isoforms—VEGF121, ? VEGF165, ? VEGF189, ? VEGF206 ? VEGF145 and VEGF183 ? In VEGF secreting cells, the most frequent isoform is VEGF165, a ? homodimer with molecular mass 45 kD 轉(zhuǎn)化生長因子 （ TGFβ ） ? TGFβ 超家族是一組調(diào)節(jié)細胞生長和分化的蛋白質(zhì)家族 ,這個家族至少有 25個成員，除了 TGFβ 外還有活化素，抑制素，骨形成蛋白，膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子家族等 ? TGFβ 的命名是根據(jù)這種細胞因子能使正常的成纖維細胞的表型發(fā)生轉(zhuǎn)化 ,即從貼壁 ?瓊脂中生長。 ? 分子結(jié)構(gòu)和編碼基因 ? 1985年克隆成功 ,哺乳動物有 : TGFβ1, TGF β2, TGFβ3, TGF β4 四個亞型 ,前三種為同源二聚體分子 PreproTGFβ Pre proTGFβN pro TGFβ TGFβ( 有活性 ) TGFβ 的產(chǎn)生 機體多種細胞都可分泌非活性狀態(tài)的 TGFβ 。 活化的淋巴細胞 TGFβ 水平增高。 幾乎所有腫瘤細胞均可檢測到 TGFβmRNA 。 生物學(xué)活性 抑制細胞增殖：對大多數(shù)細胞的增殖具有抑制作用，因此TGFβ 具有形態(tài)發(fā)生、免疫抑制和腫瘤抑制的作用。 它在腫瘤的轉(zhuǎn)移中又可以發(fā)揮促進作用，特別是在 EMT中發(fā)揮了重要作用。 對細胞表型的調(diào)節(jié)：抑制 IL2誘導(dǎo) T細胞表達 IL2R， TfR等，抑制 IFNγ 誘導(dǎo)黑色素細胞表達 MHCII抗原 促進 Treg,Th17細胞的增殖分化。 、抑制細胞因子的產(chǎn)生：如 TNFα/β ， IFNγ ， IL4， IL12 上皮間質(zhì)變遷 （ epithelialmesenchymal transition,EMT） EMT是細胞轉(zhuǎn)分化的一種方式。 特點： 上皮細胞的極性消失 細胞與細胞之間的連接喪失； 細胞骨架和細胞器的分布狀態(tài)發(fā)生改變等； 細胞表達間質(zhì)細胞特有的某些分子如波形蛋白（ vimentin), 上皮細胞的標志分子如 Ecadherin則消失 。 細胞出現(xiàn)遷移和運動能力。 EMT的核心過程是細胞極性模式的變遷 上皮細胞的穩(wěn)定極性模式消失，代之以間質(zhì)細胞的動態(tài)極性模式。 ? EMT的生物學(xué)意義： ? 發(fā)育 ? 腫瘤 ? 器官纖維化等 上皮間質(zhì)變遷與癌細胞演變 癌癥的傳統(tǒng)定義是上皮組織的惡性細胞病變。起源于上皮組織的癌細胞從原發(fā)上皮細胞的穩(wěn)定極性模式演變?yōu)樯贁?shù)具有遷移能力的細胞才具有的動態(tài)極性模式，從而獲得了侵襲和轉(zhuǎn)移的能力，此即癌細胞演進的 EMT學(xué)說。 與 EMT相關(guān)分子 ? 許多抑癌基因的功能喪失性突變或表達下調(diào)與 EMT有關(guān) ,如： APC,CDH1,β catenin， PTEN等 , ? 許多生長因子參與了 EMT,如 EGF,TGFβ,HGF,FGF 等，特別是 TGFβ 在 EMT中起到了重要作用，在多條通路中都發(fā)揮作用 vector AKT/Δ AKT Transient adV 4Day＋ Stable Sylvia Julien Grille et al., “The Protein Kinase Akt Induces Epithelial Mesenchymal Transition and Promotes Enhanced Motility and Invasiveness of Squamous Cell Carcinoma Lines,” Cancer Res 63, no. 9 (May 1, 2022): 21722178. 一個新的抑制 EMT細胞因子的發(fā)現(xiàn) Part Ⅱ . ECadherin redistribution amp。 downregulation Sylvia Julien Grille et al., “The Protein Kinase Akt Induces Epithelial Mesenchymal Transition and Promotes Enhanced Motility and Invasiveness of Squamous Cell Carcinoma Lines,” Cancer Res 63, no. 9 (May 1, 2022): 21722178. AKT STABLE shRNA A549穩(wěn)轉(zhuǎn)株 遷移能力顯著增強 Cltr.B Cltr.C Cltr.E sh sh3.C sh3.E 0H 24H 36H 0H 24H 36H 細胞因子受體 細胞因子發(fā)揮廣泛多樣的生物學(xué)功能是通過與靶細胞膜表面的受體相結(jié)合并將信號傳遞到細胞內(nèi)部。因此，了解細胞因子受體的結(jié)構(gòu)和功能對于深入研究細胞因子的生物學(xué)功能是必不可少的 。 從細胞因子結(jié)合其受體開始，到某些基因轉(zhuǎn)錄的啟動，要經(jīng)歷復(fù)雜的細胞內(nèi)分子間的相互作用，這樣的作用過程稱為細胞因子的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)； 細胞因子受體都是跨膜蛋白， 由胞膜外區(qū)、跨膜區(qū)和胞漿區(qū) 組成。 CC C C C1C3C2 C1C3C2 C1C3C2 C1C3C2 G 蛋白 I類細胞因子受體 II類細胞因子受體 TNFR 趨化因子受體 ： （ 造血因子受體家族） 2.Ⅱ 型細胞因子受體家族：（干擾素受體家族） 3.Ⅲ 型細胞因子受體家族：（腫瘤壞死因子受體家族） （ CKR）家族： （ I類） ? 結(jié)構(gòu)特征：是細胞因子受體中最大的一個家族，多數(shù)成員屬于多亞單位受體，其中一種或兩種亞單位多肽負責(zé)結(jié)合細胞因子 ? 膜外區(qū)序列結(jié)構(gòu)相似于 EpoR,即膜外 N端含 4個高度保守 Cys,近膜側(cè)含 1個TrpSerXaaTrpSer(WSXWS)的基序 D200 (II類細胞因子受體家族 ) ? 結(jié)構(gòu)特征：兩條肽鏈組成，胞外區(qū) Fn3樣結(jié)構(gòu)域由 200個氨基酸殘基組成，也稱 D200，并含有 4個不連續(xù)的半胱氨酸，包括 IFN和IL10受體 7個 aa 22個aa IL10 TNF a TNF ? CD40L Nerve growth factor (NGF) FASL 3. TNFR超家族 ? 主要包括： TNF、 Fas、 CD神經(jīng)生長因子受體 等 ? 結(jié)構(gòu)特征： 這類受體富含半胱氨酸，在與細胞因子結(jié)合后三聚體化。胞外區(qū)有 35個由 40個氨基酸殘基組成的重復(fù)亞單位；每個重復(fù)亞單位含有 46個保守的半胱氨酸；形成 “ 配體結(jié)合區(qū)域。 ? TNFR I（ P55， CD120a）：胞內(nèi)同源序列即 “ 死亡結(jié)構(gòu)域 ” ? TNFR II（ P75， CD120b）不含死亡結(jié)構(gòu)域 L 腫瘤壞死因子受體可發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用 ? 腫瘤壞死因子受體家族的 CD40和 FAS具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用 : – CD40 B細胞，巨噬細胞 – CD40L， FASL效應(yīng) T細胞 – CD40L+B細胞 CD40— B細胞增生， Ig類別轉(zhuǎn)換 – CD40L+巨噬細胞 CD40巨噬細胞分泌 TNF – FAS+FASL表達 FASL的 CTL可清除表達 FAS的淋巴細胞，這是一種重要的免疫應(yīng)答的負反饋調(diào)節(jié)機制。 4. 趨化因子受體 （ GPCRs， Gprotein coupled receptors ） 屬于 7次跨膜受體超家族，胞內(nèi)環(huán)狀結(jié)構(gòu)與 Gi/Go蛋白偶聯(lián) 胞外 細胞膜 細胞質(zhì) COOH NH2 G 蛋白 α β γ ? CKR分類 根據(jù)結(jié)合配體的不同，分為 CXCR， CCR， XCR, CX3CR； 根據(jù)特異性不同，分為特異性受體、共享性受體、雜合性受體（ DARC： Duffy血型抗原，紅細胞趨化因子受體）、孤兒受體、病毒受體等。 CC類趨化因子 CC類趨化因子 前兩個 Cys相鄰排列 大部分染色體定位于 嗜酸性粒 細胞 嗜堿性粒細 胞 單核 /巨噬 細胞 淋巴細胞 CCL2/MCP1 CCL3/MIP1 CCL5/RANTES CCL11/Eotaxin CXC類趨化因子 前兩個 Cys之間含有一個其他的殘基 染色體主要定位于4q12q13或 CXCL8/IL8 CXCL4/PF4 CXCL1/GROα CXCL10/IP10 ELRCXC nonELRCXC ELR? 血管生長因子，直接作用于內(nèi)皮細胞促進血管生成。 抑制血管生長的因子 ,能抑制 ELRCXC誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞趨化。 淋巴細胞 內(nèi)皮細胞 中性粒細胞 C類趨化因子 CX3C 類趨化因子