【正文】 IFNγ 由 143個氨基酸組成，以同源雙體形式存在，對酸不穩(wěn)定。 ? 腫瘤：直接或間接抑制腫瘤生長，但是對某些腫瘤反而有促進(jìn)作用。 L選擇素 SLex 整合素 ICAM1 粘附 內(nèi)皮細(xì)胞 炎癥 趨化因子 5. 趨化因子 (Chemokine， CK): 能使細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動的小分子蛋白。 它在腫瘤的轉(zhuǎn)移中又可以發(fā)揮促進(jìn)作用，特別是在 EMT中發(fā)揮了重要作用。 與 EMT相關(guān)分子 ? 許多抑癌基因的功能喪失性突變或表達(dá)下調(diào)與 EMT有關(guān) ,如： APC,CDH1,β catenin， PTEN等 , ? 許多生長因子參與了 EMT,如 EGF,TGFβ,HGF,FGF 等，特別是 TGFβ 在 EMT中起到了重要作用，在多條通路中都發(fā)揮作用 vector AKT/Δ AKT Transient adV 4Day＋ Stable Sylvia Julien Grille et al., “The Protein Kinase Akt Induces Epithelial Mesenchymal Transition and Promotes Enhanced Motility and Invasiveness of Squamous Cell Carcinoma Lines,” Cancer Res 63, no. 9 (May 1, 2022): 21722178. 一個新的抑制 EMT細(xì)胞因子的發(fā)現(xiàn) Part Ⅱ . ECadherin redistribution amp。 CC類趨化因子 CC類趨化因子 前兩個 Cys相鄰排列 大部分染色體定位于 嗜酸性粒 細(xì)胞 嗜堿性粒細(xì) 胞 單核 /巨噬 細(xì)胞 淋巴細(xì)胞 CCL2/MCP1 CCL3/MIP1 CCL5/RANTES CCL11/Eotaxin CXC類趨化因子 前兩個 Cys之間含有一個其他的殘基 染色體主要定位于4q12q13或 CXCL8/IL8 CXCL4/PF4 CXCL1/GROα CXCL10/IP10 ELRCXC nonELRCXC ELR? 血管生長因子，直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)血管生成。 ? IL1受體拮抗劑 ? 病毒產(chǎn)生的細(xì)胞因子結(jié)合蛋白， TNF， IL1 細(xì)胞因子受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo) ?細(xì)胞因子受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)主要利用 2個信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑： – JAK(Janus kinase)STAT – Ras－ MAPK激酶途徑 細(xì)胞因子介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo) Cytokine induced signal transduction 細(xì)胞因子結(jié)構(gòu)與功能特點 ? 結(jié)構(gòu)：同源性低，小分子蛋白，多為單鏈，少為雙鏈、三聚體（ TNF）、多含糖基 ? 量微而活性強(qiáng)（ pmol/L） 細(xì)胞因子作用是作為細(xì)胞之間的信使 細(xì)胞因子作用特點： ? 旁分泌或自分泌，瞬時、距離范圍小 ? 通過與相應(yīng)受體結(jié)合發(fā)揮作用 ? 細(xì)胞因子誘導(dǎo)的受體亞單位聚合可以活化蛋白酪氨酸激酶 (JAK),導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子 STAT酪氨酸磷酸化而激活靶基因轉(zhuǎn)錄 ? 多效性、重疊性、拮抗性、協(xié)同性、網(wǎng)絡(luò)性： 生理調(diào)節(jié)、病理反應(yīng) 90 細(xì)胞因子間可相互誘生： IL1能誘生 IFN、 IL IL IL4等， IL2能誘生 TNF、 IL LT等。 免疫調(diào)節(jié) 固有免疫： （ 1） DC：定向遷移（ CCL3， 4， 5， 7； CCL19， 21 ）；促成熟（ IL1β 、 TNFα ）；促抗原提呈 (IFNγ ) 。 The EMBO Journal (2022), 1–10 CKR在 DC遷移和功能成熟中具有不同的表達(dá)模式 CXCL8參與 Neu的遷移和活化 趨化因子參與免疫細(xì)胞在周圍免疫器官的定位 趨化因子及其受體在免疫系統(tǒng)的表達(dá)和功能 Ye H. Oo et al, Journal of Autoimmunity 34 (2022) 45–54. （ 1） B：促增殖、活化、分化： IL4， 5， 6， 13， BAFF； 調(diào)控 Ig類別轉(zhuǎn)換： IL4， 5等。 ? ? 抑郁癥：抑郁癥狀在多發(fā)性硬化、 過敏性疾病、 中風(fēng)及風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等這類非感染性慢性免疫激活性疾病中較為常見。 ? Cell Counting Kit8簡稱 CCK8試劑盒，是一種基于 WST8的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。 ? transwell侵襲實驗，原理簡單地說就是用一層膜將高營養(yǎng)的培養(yǎng)液和低營養(yǎng)的培養(yǎng)液隔開，細(xì)胞放在低營養(yǎng)的培養(yǎng)液里，為了找吃的，細(xì)胞會往高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面跑，但是有膜擋著，所以要穿過膜才行。 Yrina Rochman et al. Nature Bubbleboy (IL2R的 γ鏈缺陷引起 SCID) XSCID 基因治療原理 表達(dá)細(xì)胞因子 VEGF的腺病毒或裸 DNA直接體內(nèi)注射 治療梗塞性血管病 細(xì)胞因子佐劑 細(xì)胞因子在免疫應(yīng)答的產(chǎn)生和調(diào)節(jié)中具有重要作用，可作為免疫佐劑增強(qiáng)疫苗的免疫效果。 ? 3 同時增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)的細(xì)胞因子 ? GMCSF是另外一種新型的免疫佐劑，能誘導(dǎo)分化、增殖和活化多種免疫活性細(xì)胞，它不僅可以刺激巨噬細(xì)胞的生成，還可以誘導(dǎo)體液免疫和細(xì)胞免疫。 思考題 （ 2個以上細(xì)胞因子）。 核酸疫苗通常比復(fù)制性完整的病原體的免疫原性差，需要多次免疫才能使動物得到有效保護(hù)。 免疫學(xué)檢測法 (1) ?可溶性細(xì)胞因子檢測 : – 放射免疫測定（ RIA） 特異 Ab包被 +待測樣品和同位素標(biāo)記的細(xì)胞因子 竟?fàn)幰种茖嶒? – 酶聯(lián)免疫吸附實驗（ ELISA） 雙抗體加心法 – Western Blot – 檢測單個細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子：細(xì)胞斑點、酶聯(lián)斑點 免疫學(xué)檢測法 (2) ? 細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞膜上的細(xì)胞因子的研究 – 檢測單個細(xì)胞結(jié)合的細(xì)胞因子：生物素、堿性磷酸酶、免疫熒光 – 檢測細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞因子 細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞因子的熒光檢測 分子生物學(xué)檢測 ? Southern Blot ? Northern Blot ? 原位雜交 ? RTPCR 體內(nèi)功能研究 ? 基因敲除、轉(zhuǎn)基因 ? 利用特異性抗體觀察細(xì)胞因子在體內(nèi)的生物學(xué)作用 細(xì)胞因子的應(yīng)用 ? 在臨床治療： ? 重組細(xì)胞因子： – 抗腫瘤細(xì)胞因子： IL IFNa – 促進(jìn)造血的細(xì)胞因子： GCSF、 GMCSF、 EPO、 IL11 – 最近發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子可以增強(qiáng)化療藥治療白血病的療效。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。 ? 急性肺損傷 /急性呼吸窘迫綜合癥：是在致病因子的作用下發(fā)生的過度炎癥反應(yīng)，細(xì)胞因子 TNF,IL8， IL1β 等在其發(fā)生發(fā)展中都起了重要的作用。 促 CTL殺傷： IL2， 6， IFNγ 。：定向遷移（ CCL18,1215）、活化（ IFNγ ，GMCSF, MCSF）、促抗原提呈 (IFNγ )。 B細(xì)胞和 T細(xì)胞活化過程中，常需要兩種以上細(xì)胞 因子的協(xié)同作用或彼此調(diào)節(jié) 。 淋巴細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞 中性粒細(xì)胞 C類趨化因子 CX3C 類趨化因子 N端前兩個半胱氨酸之間含有其他 3個氨基酸殘基 染色體主要定位于 16q13 T淋巴細(xì)胞 單核細(xì)胞 NK細(xì)胞 Fractalkine 膜結(jié)合型 分泌型 ? 介導(dǎo)細(xì)胞間的粘附，并傳遞活化信號 ? 行使細(xì)胞趨化功能 N端只含兩個半胱氨酸 染色體主要定位于 1q23 T細(xì)胞 骨髓細(xì)胞 XCL1/Lymphotactin XCL2/SCM1β CXCR4和 CCR5是 HIV感染的共受體 (Co receptors) 2. CXCR4（ T細(xì)胞）與 CCR5（巨噬細(xì)胞） 是 HIV感染靶細(xì)胞的共受體。因此，了解細(xì)胞因子受體的結(jié)構(gòu)和功能對于深入研究細(xì)胞因子的生物學(xué)功能是必不可少的 。 、抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生：如 TNFα/β ， IFNγ ， IL4， IL12 上皮間質(zhì)變遷 （ epithelialmesenchymal transition,EMT） EMT是細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的一種方式。 CX3CR CXCR CX3C CXC CK及 CKR分類 CC C CCR XCR 1999年國際命名委員會根據(jù) CK的結(jié)構(gòu)特征命名 依據(jù) N端前兩個半胱氨酸 (Cys)的相對位置不同分為 : ELR? ELRCXC nonELRCXC Chemokine families Chemokine is derived from Chemoattractant and cytokine C C C CC C C C CCC X C CC CXCC X XX C