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gneaaa蛋白質(zhì)的測定使用凱氏定氮法解說-展示頁

2025-08-14 01:24本頁面
  

【正文】 熱消化 ,使蛋白質(zhì)分解,分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸胺。 ? 氨基酸~ HCl~ N ? 〖 注意 〗 ? 此法測定得到的蛋白質(zhì)含量,實(shí)際上包括核酸、生物堿、含氮類脂、葉啉和含氮色素等非蛋白質(zhì)氮化合物,故稱為 粗 pro。 b消化完全的指示劑 :藍(lán)綠色,澄清,透明; c蒸餾時(shí)堿性反應(yīng)的指示劑 :變深藍(lán)色或產(chǎn)生黑色沉淀 硫酸鉀 提高溶液沸點(diǎn) ,從而加快有機(jī)物分解 濃硫酸 氧化作用 :有機(jī)物質(zhì)氧化分解為 H2O和 CO2 子任務(wù) 2:樣品預(yù)處理 固體試樣 ~2g 半固體試樣 2~5g 液體試樣 10~25g 樣品充分混勻 直接消化 子任務(wù) 3:樣品稱量、消化 6g硫酸鉀 20mL濃硫酸 玻璃珠 小火加熱炭化 至泡沫完全停止 輕搖 大火加熱 保持瓶中液體微沸 至藍(lán)綠色澄清透明 繼續(xù)加熱 ~ 1h 冷卻 加 20mL水 冷卻 同時(shí)做試劑空白試驗(yàn) 思考 ? 玻璃珠的作用? ? 小漏斗的作用? ? 消化過程為什么要不斷轉(zhuǎn)動(dòng)凱氏瓶? ? 開始消化時(shí)為什么用小火? ? 消化液不易澄清透明時(shí)可采用的措施? ? 消化完成時(shí)的產(chǎn)物? ? 加 20mL水的作用? ? 空白試驗(yàn)的目的? 任務(wù)二:堿法蒸餾、硼酸吸收 ? 子任務(wù) 1:儀器及試劑的準(zhǔn)備 ? 儀器: 10mL 100mL 3只 子任務(wù) 1:儀器及試劑的準(zhǔn)備 ? 水蒸氣發(fā)生器: ? 裝水至 2/3處,加入數(shù)粒 玻璃珠 ,加 甲基橙指示劑數(shù)滴及 硫酸 數(shù) ml,使水呈微紅色 → 按上圖所示搭好裝置 ? 〖 注意 〗 ? ① 裝置搭建好了之后要先進(jìn)行撿漏,利用虹吸原理。 子任務(wù) 1:儀器及試劑的準(zhǔn)備 ? 試劑: ? 40%氫氧化鈉 ? 20%硼酸溶液 ? 混合指示劑 ? 1份 甲基紅乙醇溶液 ( 1g/L)與 5份 溴甲酚綠乙醇 溶液( 1g/L)臨用時(shí)混合 酒紅色 → 綠色 ? 2份 甲基紅乙醇溶液( 1g/L) 與 1份 亞甲基藍(lán)乙醇 溶液( 1g/L)臨用時(shí)混合 紫紅色 → 綠色 子任務(wù) 2:堿化蒸餾、硼酸吸收 ? 100mL三角瓶 加 1~ 2滴混合指示劑 冷凝管下端插入三角瓶液面下 準(zhǔn)確吸取10mL試樣 由小玻杯流入反應(yīng)室 少量水洗滌小
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