凱氏定氮法原理-展示頁
2025-08-02 17:22本頁面
【正文】 然后移開煤氣燈。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應(yīng)室，但玻杯內(nèi)的水不要放光，塞上棒狀玻塞，保持水封，防止漏氣。仔細(xì)檢查各個(gè)連接處，保證不漏氣。儀器使用前，微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌，以除去管道內(nèi)可能殘留的氨，正在使用的儀器，每次測(cè)樣前，蒸氣洗滌5min即可。凱氏定氮蒸餾裝置種類甚多，大體上都由蒸氣發(fā)生、氨的蒸餾和氨的吸收三部分組成。消化完全后，關(guān)閉火焰，使燒瓶冷卻至室溫。消化時(shí)放出的氣體內(nèi)含SO2，具有強(qiáng)烈刺激性，因此自始自終應(yīng)打開抽水泵將氣體抽入自來水排出。待泡沫消失停止產(chǎn)生后，加大火力，保持瓶?jī)?nèi)液體微沸，至溶液澄清后，再繼續(xù)加熱使消化液微沸15min。將加好試劑的各燒瓶放置消化架上，接好抽氣裝置。6號(hào)燒瓶作為空白對(duì)照，用以測(cè)定試劑中可能含有的微量含氮物質(zhì)，對(duì)樣品測(cè)定進(jìn)行校正。，樣品要加到燒瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶頸上。凱氏定氮法測(cè)定出的含氮量，即為蛋白質(zhì)含量。反應(yīng)式如下：，濃H2SO4 作用下，消化生成（NH4）2SO4 反應(yīng)式為： H2SO4==SO2+H2O+[O] R. +[O]==+NH3 NH3 +[O]==nCO2+mH2O 2NH3+H2SO4==(NH4)2SO4，通過蒸餾釋放出NH3 ，收集于 H3BO3 溶液中反應(yīng)式為： 2NH4++OH==NH3+H2O NH3+H3BO3==NH4++H2BO33. 再用已知濃度的HCI標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)HCI消耗的量計(jì)算出氮的含量，然后乘以相應(yīng)的換算因子，既得蛋白質(zhì)的含量。在滴定過程中，滴定終點(diǎn)采用甲基紅次甲基藍(lán)混合指示劑顏色變化來判定。消化完成后，將消化液轉(zhuǎn)入凱氏定氮儀反應(yīng)室，加入過量的濃氫氧化鈉，將NH4+轉(zhuǎn)變成NH3，通過蒸餾把NH3驅(qū)入過量的硼酸溶液接受瓶?jī)?nèi)，硼酸接受氨后，形成四硼酸銨，然后用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸滴定，直到硼酸溶液恢復(fù)原來的氫離子濃度。凱氏定氮法中可用的催化劑種類很多，除硫酸銅外，還有氧化汞、汞、硒粉、鉬酸鈉等，但考慮到效果、價(jià)格及環(huán)境污染等多種因素，應(yīng)用最廣泛的是硫酸銅。為了加速和完全有機(jī)物質(zhì)的分解，縮短消化時(shí)間，在消化時(shí)通常加入硫酸鉀、硫酸銅、氧化汞、過氧化氫等試劑，加入硫酸鉀可以提高消化液的沸點(diǎn)而加快有機(jī)物分解，除硫酸鉀外，
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