高效液相色譜儀ppt課件-展示頁
2025-05-14 07:32本頁面
【正文】 板引起柱壓升高。 常用的反向填 料有 :C18(ODS)、 C8(MOS)、 C4(Butyl)、 C6H5(Phenyl)等。反向色譜所使用的流動相極性較強，通常為水、緩沖液與甲 醇，乙腈等的混合物。由于硅膠表面的硅羥基 (SiOH)或其他極性基 團(tuán)極性較強，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小，即 極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱；正相色譜使用的流動相極性相 對比固定相低，如正已烷、氯仿 、二氯甲烷等。 C18較 C8極性小， C18更適合分析中等到小極性的化合物， C8更適合中等偏大極性 化合物。 規(guī)格：常規(guī)分析柱 (常量柱 ) 內(nèi)徑 2～ 5mm(常用 ， )，柱長 10～ 30cm (15cm， 25cm居多） 制備柱 （ 、 30mm、 50mm） 半制備柱（ 〉 5mm， 、 、 10mm） C18柱（ C8柱） SiSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiOOOSiCH3H3CCH3 SiCH3H3CCH3HHHHHHH主要是由于修飾到硅膠上的 硅烷化 試劑不同。 填料：多以硅膠為基質(zhì)，適用 PH 2～ 8 粒度多為 ～ 20 μm(以 5～ 10μm居多 ) 。 自動進(jìn)樣器 色譜柱是高效液相色譜的心臟，在 HPLC的使用中， 保持色譜柱的柱效，延長柱子的使用壽命非常重要。 將樣品環(huán)裝滿后進(jìn)樣，進(jìn)樣量即為樣品環(huán)的容積，此種進(jìn)樣方式稱為“滿環(huán)進(jìn)樣”或“定量環(huán)進(jìn)樣”。L等不同容積， 可以根據(jù)需要選配。L、 20181。 六通進(jìn)樣閥具有使用方便，進(jìn)樣量準(zhǔn)確等優(yōu)點。 氣動放大泵 往復(fù)柱塞泵 (2) 進(jìn)樣裝置 手動進(jìn)樣閥通常使用耐高壓的六通閥 (美國 Rheodyne 公司專利技術(shù) )， 其結(jié)構(gòu)如圖所示： 進(jìn)樣裝置 （正面） 進(jìn)樣裝置 （背面） 圖中 a為進(jìn)樣閥處于“裝樣 load”位置的情況，此時流動相直接進(jìn)入色譜柱， 樣品注入口與樣品環(huán)連接，用微量進(jìn)樣針將一定體積的樣品溶液從樣品 注入口注入，裝于樣品管內(nèi)。其中又分單頭往復(fù)泵和雙頭往復(fù)泵。 常用的 壓力范圍 ： 150～ 350 105 Pa 歐美等國家習(xí)慣使用 psi作單位 PSI英文全稱為 Pounds per square inch。 也即是貯液瓶中的有機溶劑或緩沖溶液靠 高壓泵 送入色譜柱。高 效 液 相 色 譜 2022/8/21 一、高效液相色譜儀 Agilent 1100 Waters 2487 借助氣相色譜的理論演變 二、高效液相色譜法的特點 經(jīng)典的柱色譜 高效液相色譜的模塊 20世紀(jì) 70年代后發(fā)展迅速，它在技術(shù)上采用 高壓泵 ， 高效固定相 和 高靈敏度的檢測器 ， 實現(xiàn)了 分析速度快 ， 分離效率高 和 操作自動化 。 特點：高壓、高效、高速 分離對象 ：適用高沸點、熱不穩(wěn)定有機及生化試樣分離分析 （與 GC區(qū)分） 三、流程及主要部件 1. 流程 2. 主要部件 (1) 高壓輸液泵 單元泵 雙 元 泵 高壓泵作用 ：輸送流動相。由于色譜柱的阻力很大， 高壓泵 必須克服阻力以恒定流速輸送流動相，這是保證色譜儀精確度的前提。 定義為英鎊 /平方英寸， 它們之間的換算關(guān)系為： 1bar≈ =105Pa ， 145psi = 1Mpa 1psi = = 高壓泵 應(yīng)具有以下性能 ? 流量穩(wěn)定，
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