【正文】 以下 5種影響因素： ? （ 1）營養(yǎng)物質(zhì)濃度 ? （ 2）溫度 ? （ 3） PH值 ? （ 4）溶解氧濃度 ? （ 5）產(chǎn)物 （ 1）營養(yǎng)物質(zhì)濃度 ? 營養(yǎng)物質(zhì)的限制性濃度 當某一種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度下降到一定程度之后，就會影響細菌的生長，此時的濃度就稱為營養(yǎng)物質(zhì)的限制性濃度。 指數(shù)生長期 細胞的倍增時間 指細胞濃度增長一倍所需要的時間。 即在小型生物反應(yīng)器中接入少量種子 經(jīng)過分批培養(yǎng)，來獲得較大數(shù)量的細胞作為種子 再轉(zhuǎn)入到大型生物反應(yīng)器中 分批培養(yǎng)的設(shè)備要求較少 操作也較簡單 工業(yè)微生物生產(chǎn)中經(jīng)常采用 分批培養(yǎng)的生長過程 ? 培養(yǎng)中的細胞經(jīng)過 4個生長階段： ? （ 1）延遲期 ? （ 2）指數(shù)生長期 ? （ 3）靜止期 ? （ 4）衰亡期 延遲期 （ 1）種齡越長，延遲期越長， （ 2）接種量越少、延遲期越長 衰亡期 營養(yǎng)物質(zhì)消耗貽盡 培養(yǎng)液中有害物質(zhì)積累太多 導(dǎo)致培養(yǎng)液中的細胞開始死亡， 稱為衰亡期。待生物反應(yīng)進行到一定程度之后，將全部培養(yǎng)液倒出、進行后道工序的處理。 利用熒光素測定細胞中 ATP的數(shù)量，測定活細胞的濃度。 利用發(fā)酵過程中營養(yǎng)物質(zhì)的消耗量來測定細胞的濃度。 粘度 培養(yǎng)液的粘度與所含的細胞數(shù)量有關(guān)。 （二）間接測量法 測定細胞成份 可以通過測定培養(yǎng)液中蛋白質(zhì)、 DNA、RNA的含量來確定細胞的濃度。 其優(yōu)點是 可用于測定活細胞的濃度 濁度法 ? 由于培養(yǎng)液的濁度和光密度與培養(yǎng)液中的細胞濃度成正比關(guān)系，因此，可以通過分光光度計法用 600700nm波長進行測定。 （ 3）由于細菌太小，不適于進行計數(shù)。 缺點是： （ 1）不適用于絲狀生物體的計數(shù)。 不足之處是此方法不適用于統(tǒng)計含有不溶性沉淀物的培養(yǎng)液。 使用硫酸銨時， 由于其殘留的硫酸根使得發(fā)酵液 PH值變小 必須用堿性物質(zhì)中和 微量因子 ? 主要是指維生素，它是微生物生長所不可缺少的營養(yǎng)成份所需。 測定培養(yǎng)劑的溶解氧是一個技術(shù)關(guān)鍵。 氧氣 ? 微生物的類別有需氧菌、厭氧菌、兼性菌三種。 溫度 ? 一般為 3033℃ ? 超過 33℃ 時應(yīng)該進行冷卻。 移至 10L的曲汁卡瓦罐中 30℃ 培養(yǎng) 48小時。 大規(guī)模發(fā)酵生產(chǎn) ? 一般采用幾千升、幾萬升的培養(yǎng)罐。 （ 2）真正的方法是必須把氧氣抽除，采用真空泵來抽去氧氣。 ? 在我國，抗生素、檸檬酸的生產(chǎn)常常采用此法。國內(nèi)醬油廠多采用此法。 厚層通風(fēng)培養(yǎng) ? 此方法用于固體培養(yǎng)。 ?下面分別介紹其中重要的 5種方法： 淺盤培養(yǎng) ? 該方法選用于固體培養(yǎng)法、也適用于液體培養(yǎng)法。 ? 按操作方式分為 分批培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)、連續(xù)培養(yǎng)。 培養(yǎng)霉菌則專用蔡氏霉菌培養(yǎng)劑 蔗糖 2030g、硝酸鈉 3g、磷酸二氫鉀 1g、氯化鉀 、 七水硫酸鎂 、硫酸亞鐵 、蒸餾水 1L。 微量生長因子 生物素 硫銨素 玉米漿最常用 （二）培養(yǎng)基的分類 細菌用培養(yǎng)基 以肉湯 +蛋白胨 +酵母膏作為其組成物質(zhì)。 ?氮源 ?主要有硫酸銨、 ?尿素、豆餅水解液。 二：微生物的培養(yǎng)技術(shù) ? （一）培養(yǎng)基組成 ? （二）培養(yǎng)基的分類 ? （三）培養(yǎng)方法 ? （四）培養(yǎng)條件 （一）培養(yǎng)基組成 ?碳源 ?一般為蔗糖、葡萄糖。橘青霉（ ）可產(chǎn)生核酸酶 P1。 ? （ 2）黑霉屬（ ） 能產(chǎn)生酸性蛋白酶、蛋白酶。 卡那霉素鏈霉菌（ ） 能產(chǎn)生卡那霉素 ?金霉素鏈霉菌（ S. aureofaciens） ?能產(chǎn)生金霉素。 ? （ 8）大腸桿菌（ Escherichia coli）用來作為基因工程的克隆菌。 ? （ 6）芽孢桿菌屬 枯草桿菌（ Bacillus subtilis）可以用來生產(chǎn)α 淀粉酶、肌苷、鳥苷等核苷。 ? （ 4）片球菌屬（ Pediococcus） 用來生產(chǎn)乳酸。 ? （ 2）乳桿菌屬 德氏乳桿菌（ Lactobacillus delbriiekii）可以將糖轉(zhuǎn)變?yōu)槿樘恰? ?一：最常用的工業(yè)微生物 ?二：微生物的培養(yǎng)技術(shù) ?三：細胞濃度的測量 ?四：微生物發(fā)酵的工藝學(xué)原理 ?五：工業(yè)微生物菌種的制備和改良 ?六：發(fā)酵生產(chǎn)過程 ?七：滅菌技術(shù) ?八：分離純化技術(shù) ?九：干燥技術(shù) 講解分章節(jié)內(nèi)容 一：最常用的工業(yè)微生物 ? 1：細菌 ? 2：放線菌 ? 3：霉菌 ? 4：酵母 ? 青霉菌 1：細菌 ? （ 1）醋桿菌屬 醋化醋桿菌（ Acetobacter aceti）可以將酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿?。生物制藥工藝學(xué) 發(fā)酵工程制藥 第一節(jié)：微生物細胞工程（發(fā)酵工程制藥）生產(chǎn)原理 第二節(jié)：利用微生物進行藥物的生產(chǎn)實例 第一節(jié)：微生物工程（發(fā)酵工程制藥）生產(chǎn)原理 ? 人工培養(yǎng)的微生物，通過體內(nèi)的特定酶系，經(jīng)過復(fù)雜的生物化學(xué)反應(yīng)過程和代謝作用，最終合成人們所需要的藥物如抗生素、氨基酸、有機物、維生素。這種方法稱為微生物細胞工程。弱氧化醋桿菌（ Acetobacter suboxydans）可以將山梨糖醇轉(zhuǎn)變?yōu)樯嚼嫣恰? ? （ 3）鏈球菌屬（ Streptococcus） 用來生產(chǎn)乳酸。 ? （ 5）串珠菌屬（ Leuconostoc） 用來生產(chǎn)乳酸。 ? （ 7）梭菌屬 丙酮丁醇梭菌（ Clostridium acetobutylium）用來生產(chǎn)丙酮、丁醇。 2：放線菌 ? 有以下分類 紅霉素鏈霉菌（ ） 能產(chǎn)生紅霉素。 ?委內(nèi)瑞拉鏈霉菌（ ） ?能產(chǎn)生氯霉素 3：霉菌 ? （ 1）曲霉屬 米曲霉（ Aspergillus oryzae）能產(chǎn)生高峰淀粉酶。 ? （ 3）青霉屬 點青霉（ ）、產(chǎn)黃青霉（ ）能產(chǎn)生青霉素。 4：酵母 ? 酵母屬 最常用的是釀酒酵母，用于進行酒精發(fā)酵。 ?工業(yè)用碳源為淀粉水解液、 ?糖蜜、干薯粉、甲醇、乙醇、 ?石油、醋酸等等材料。 ?無機鹽 ?磷酸二氫鉀、 ?磷酸氫二鉀 ?七水硫酸鎂。 酵母、霉菌用培養(yǎng)基 以曲汁和麥芽汁為最常用 將米曲（或者麥芽汁）添加適量水，在 55℃ 下糖化 2小時， 經(jīng)過過濾，濾液稀釋至糖度 10度，備用。 工業(yè)用培養(yǎng)基 定量組成培養(yǎng)基配方 （三）培養(yǎng)方法 ? 按培養(yǎng)基類型分為 固體培養(yǎng)法、液體培養(yǎng)法。 ? 按氧氣供應(yīng)分為 需氧培養(yǎng)、厭氧培養(yǎng)。 ? 其方法是將固體或者液體培養(yǎng)基盛于不銹鋼制的淺盤內(nèi)，接種菌種，在保溫室內(nèi)培養(yǎng)。 ? 這種方法的優(yōu)點是培養(yǎng)量大，并且節(jié)省勞動力。 所用設(shè)備是在水面建造大型水泥槽 水泥槽底部鋪上多孔板 板上放置固體培養(yǎng)基 接種之后 將空氣由多孔板下部通入培養(yǎng)基內(nèi) 液體通風(fēng)深層培養(yǎng) ? 簡稱深層培養(yǎng)法，是最先進的方法。 厭氧培養(yǎng) ? （ 1）簡單的方法是，用一般的發(fā)酵槽，撤去通風(fēng)設(shè)備。 較為先進的方法是 加拿大的 BBL Gas Pak 150的厭氧培養(yǎng)器 采用由水發(fā)生氫氣的方法 此氫氣與氧氣反應(yīng)，遂形成真空。采用逐步擴大法生產(chǎn) 將酵母進行 斜面培養(yǎng) 移至 500L的種子罐 作為工業(yè)發(fā)酵的種醪 移至含 5ml曲汁的試管之中 30℃ 培養(yǎng) 24小時。 移至 500ml的巴士瓶中 30℃ 培養(yǎng) 48小時 最后進行 大規(guī)模培養(yǎng) （四）培養(yǎng)條件 ? 培養(yǎng)基濃度 ? 溫度 ? PH值 ? 氧氣 ? 氮源 ? 微量因子 培養(yǎng)基濃度 ? 一般為含葡萄糖 10% ? 最高可以通過流加法達到 15%。 PH值 ? （ 1）酵母菌為 PH= ? （ 2）細菌的 PH=6. ? （ 3）霉菌生產(chǎn)的 PH值則在 。 ? 各自需要不同的氧氣條件。 氮源 ? 一般情況下，是以使用尿素為最適合，因為一則尿素可以維持