菌種的傳代與保藏ppt課件-展示頁(yè)
2025-03-31 05:51本頁(yè)面
【正文】 乏營(yíng)養(yǎng)等環(huán)境條件都有抑制微生物的代謝作用。 選擇保藏方法時(shí) ， 首先應(yīng)考慮方法能否長(zhǎng)期地保持菌種原有的特性 ， 同時(shí)也應(yīng)兼顧到方法的經(jīng)濟(jì)和簡(jiǎn)便 。 （ 二 ） 菌種保藏步驟 ① 挑選特征典型的單個(gè)菌落； ② 確定保藏的合適菌體形態(tài)； ③ 選擇最適宜的保藏方法； ④ 定期對(duì)保藏菌種進(jìn)行檢查 ， 觀察是否發(fā)生變化 ， 若有變化 ， 須改變保藏方法 。 ? （ 1）方法：將經(jīng)常使用的菌種的典型菌落接種在斜面（某些特殊菌種可用液體培養(yǎng)基）上，按規(guī)定的溫度和時(shí)間培養(yǎng)，待充分生長(zhǎng)后，把培養(yǎng)好的新鮮菌種用牛皮紙包好，可將菌種保藏管的棉花塞換成橡膠塞，以減緩培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，延長(zhǎng)保藏時(shí)間。每隔 2~3個(gè)月移種一次，繼續(xù)進(jìn)行保藏。 ? （ 2） 適用范圍：細(xì)菌 、 霉菌 、 酵母菌保藏 。黑曲霉孢子相當(dāng)穩(wěn)定，可以保存于 4 ℃ %氯化鈉溶液中較長(zhǎng)時(shí)間，作為孢子懸液儲(chǔ)備液使用。 各類菌種保藏條件及時(shí)間 菌 種 培 養(yǎng) 基 保存溫度 傳 種 時(shí) 間 細(xì) 菌 一般多用于營(yíng)養(yǎng)瓊脂或根據(jù)菌種規(guī)定選用培養(yǎng)基 4~6℃ 芽孢桿菌 3~6個(gè)月 ，其它細(xì)菌每個(gè)月 酵母菌 一般用麥芽汁瓊脂或麥芽汁酵母膏瓊脂 4~6℃ 一般 4~6個(gè)月 絲狀真菌 一般用 PDA瓊脂 、 蔡氏瓊脂或麥芽汁瓊脂等 4~6℃ 每 4 個(gè)月移植一次（ 每 2個(gè)月移植一次 ） （ 3）特點(diǎn)： 優(yōu)點(diǎn)是 —— 簡(jiǎn)便，易于推廣；一般不需要另選擇保藏用培養(yǎng)基；對(duì)大多數(shù)微生物都適用。 （ 4） 注意事項(xiàng)： ? 實(shí)驗(yàn)用的菌種應(yīng)是生命活力旺盛的新鮮培養(yǎng)物 ， 至少應(yīng)是第三代的培養(yǎng)物 。 ? 必須定期檢查保藏菌種冰箱的溫度 、 濕度以及菌種管的棉塞是否松動(dòng)或生霉 ， 如有異常應(yīng)及時(shí)處理 。 ? 保藏菌種的培養(yǎng)基應(yīng)無糖 ， 若含糖 ，一般小于 2 %為宜 ， 以免產(chǎn)酸過多 ，影響菌種存活 。 如 銅綠假單胞菌在冰箱中易發(fā)生菌體自溶而死亡 ， 不宜用本法保存 。 （ 1）方法： ? 將菌種接種于斜面或穿刺于 ~ %瓊脂半固體高層培養(yǎng)基中 ， 培養(yǎng)好備用 。 ? 將上述液體石蠟加入培養(yǎng)好的菌種試管內(nèi) ， 液體石蠟液面以高出培養(yǎng)基最上端 1 ㎝ 為宜 ， 將試管直立 ，放入 4℃ 冰箱中保藏 。 液體石蠟對(duì)各類菌種保藏效果 菌 種 菌株數(shù) 保存時(shí)間（年） 存活率（ %） 細(xì)菌 霉菌 酵母菌 放線菌 87 586 400 380 5 5 2 4 各類菌種保藏條件及時(shí)間 菌種 保存方法 溫度 傳種時(shí)間 大腸桿菌 營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面 營(yíng)養(yǎng)肉湯菌懸液 4～ 6℃ 0℃ 以下 2～ 3個(gè)月 1年 乙型副傷寒沙門菌 營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面 營(yíng)養(yǎng)肉湯菌懸液 4～ 6℃ 0℃ 以下 2～ 3個(gè)月 2年 金黃色葡萄球菌 營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面 營(yíng)養(yǎng)肉湯菌懸液 4～ 6℃ 0℃ 以下 2～ 3個(gè)月 4年 滕黃微球菌 營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面 營(yíng)養(yǎng)肉湯菌懸液 4～ 6℃ 0℃ 以下 2～ 3個(gè)月 4年 銅綠假單胞菌 營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面 液體石蠟覆蓋保存法 室溫 室溫 2～ 3個(gè)月 2年 枯草芽孢桿菌 營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面 半固體 營(yíng)養(yǎng)肉湯菌懸液 4～ 6℃
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