過(guò)氧化物酶ppt課件-展示頁(yè)
2025-01-14 19:57本頁(yè)面
【正文】 2022/2/2 ? 從圖可知，反應(yīng)速度只在最初一段時(shí)間內(nèi)保持恒定，隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，酶反應(yīng)速度逐漸下降。酶促反應(yīng)隨時(shí)間增加，產(chǎn)物增加。 ? 酶促反應(yīng)速度可用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中底物的減少量或產(chǎn)物增加量來(lái)表示。速度愈墁，酶的活力就愈低。同樣重量的酶，酶活力可以不同，活力高，價(jià)值就大。催化能力強(qiáng) (大 )，酶活力就高 (大 )，也表示酶量多。酶的存在和含量多少應(yīng)體現(xiàn)在催化能力大小，即用酶活力 (活性 )表示。 2022/2/2 ? 2．酶活力測(cè)定 ? (1) 酶活力 ? 表示酶量的多少不能像一般物質(zhì)那樣，用重量(g)或體積 (ml)。這是因?yàn)檫^(guò)氧化物酶能使組織中所含的某些碳水化合物轉(zhuǎn)化成木質(zhì)素，增加木質(zhì)化程度，而且發(fā)現(xiàn)早衰減產(chǎn)的水稻根系中過(guò)氧化物酶的活性增加，所以過(guò)氧化物酶可作為組織老化的一種生理指標(biāo)。在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中它的活性不斷發(fā)生變化。 2022/2/2 二、實(shí)驗(yàn)原理 過(guò)氧化物酶（簡(jiǎn)稱(chēng) POD)簡(jiǎn)介 過(guò)氧化物酶廣泛存在于植物體中，是活性較高的一種酶。2022/2/2 實(shí)驗(yàn)二 過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定 2022/2/2 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 法。 測(cè)定方法。它與呼吸作用、光合作用及生長(zhǎng)素的氧化等都有關(guān)系。一般老化組織中活性較高，幼嫩組織中活性較弱。此外，過(guò)氧化物同工酶在遺傳育種中的重要作用也正在受到重視。因?yàn)槊甘且环N生物催化劑。 ? 酶活力（酶活性）指酶催化某一特定化學(xué)反應(yīng)的能力。酶本身的重量不能說(shuō)明酶的實(shí)際含量多少。 2022/2/2 ? (2) 酶促反應(yīng)速度 ? 酶活力具體用它所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度來(lái)表示，即在最適條件下 (最適 pH、最適 T) 酶催化的反應(yīng)速度愈快，酶活力就愈高。所以測(cè)定酶的活力 (實(shí)質(zhì)上就是酶的定量 )測(cè)定就是測(cè)定酶促反應(yīng)的速度 (用 v表示 ) 。單位：濃度 /單位時(shí)間 ? 常用產(chǎn)物增加量表示，因?yàn)樗鼜臒o(wú)到有，變化明顯。 2022/2/2 若將產(chǎn)物濃度對(duì)反應(yīng)時(shí)間作圖得到酶促反應(yīng)的速度曲線。引起下降的原因很多，如底物濃度降低，產(chǎn)物濃度增加而加速了逆反應(yīng)的進(jìn)行，產(chǎn)物對(duì)酶有抑制作用等。具體指酶促反應(yīng)速度曲線的斜率。測(cè)定產(chǎn)物增加量的方法很多： ? 化學(xué)方法：滴定、比色、氣體測(cè)壓、電化學(xué)等。 ? 同位素方法等。 ? 國(guó)際單位 (IU)定義： 1個(gè)酶活力單位，是指在特定條件下，在 1分鐘內(nèi)能轉(zhuǎn)化 1微摩爾( 181。 2022/2/2 測(cè)定原理 過(guò)氧化物酶催化過(guò)氧化氫氧化酚類(lèi)的反應(yīng)，產(chǎn)物為醌類(lèi)化合物，此化合物進(jìn)一步縮合或與其他分子縮合，產(chǎn)生顏色較深的化合物。 4 2022/2/2 2 1 3 4 5 6 7 8 0 0 2 4 6 8 反應(yīng)時(shí)間 （分鐘） 生 成 物 光 吸 收 2022/2/2 2. pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 (1) 影響酶促反應(yīng)速度的因素 * 底物濃度 米氏公式 * 溫度 * 酶濃度 * 激活劑、抑制劑 * pH 2022/2/2 ? (2) pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 ? 大多數(shù)酶的活力受其環(huán)境 pH影響。通常各種酶只有在一定 pH范圍內(nèi)才具有活性，并在一定 pH下，酶促反應(yīng)具有最大反應(yīng)速度，此 pH稱(chēng)最適 pH，高于或低于此值反應(yīng)速度都下降。 2022/2/2 木瓜蛋白酶 胃蛋白酶 膽堿脂酶 2022/2/2 ? 不同酶的最適 pH也不同，如胃蛋白酶為 pH 、胰蛋白酶為 pH 8。一般最適 pH在 6 8之間。 2022/2/2 ? 本實(shí)驗(yàn)測(cè)定三亇不同 pH下過(guò)氧化物酶的時(shí)間－光吸收關(guān)系曲線，比較三亇不同pH ( ,)條件對(duì)過(guò)氧化物酶活力的影響。 ②再加入 3ml磷酸緩沖液浸提 20分鐘后，以6000r/min離心 15分鐘。 2022
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