【正文】 出限。例如重復(fù)測定 20 次，根據(jù)測量結(jié)果的平均值（ M）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD），計算 M+2SD及其對應(yīng)的濃度值，結(jié)果應(yīng)符合企業(yè)規(guī)定要求。 （ LOD）申請人應(yīng)評估空白限（ LOB）和檢出限（ LOD）。用待評價系統(tǒng)對待回收分析樣本和基礎(chǔ)樣本進行測定，通常對樣本進行 3 次重復(fù)測定，計算均值，取其均值進行下述計算，求得回收率。 方法：選擇接近參考區(qū)間的常規(guī)檢測樣本，分為體積 相同的 3— 4份，在其中 2— 3份樣本中加入不同濃度相同體積的待測物標(biāo)準(zhǔn)液制備待回收分析樣本，加入體積小于原體積的 10%，制成 2— 3 個不同濃度的待回收分析樣本，計算加入的待測物的濃度。每份樣本按待測試劑及選定比對系統(tǒng)的要求分別進行檢測，每份樣本各測定 1 遍，用線性回歸方法對兩組結(jié)果進行線性擬合，得到線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)（ r）和斜率，計算各個樣本的待測試劑測定值與比對系統(tǒng)測定值的絕對偏差或相對偏差。 比對試驗參考體外診斷試劑分析性能評估相關(guān)技術(shù)審查指導(dǎo)原則的要求完成準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對）評估。 ?????（ 1）式中： Bi—— 相對偏差； Xi—— 測量濃度； T—— 標(biāo)定濃度。如果大于等于 2 次的結(jié)果不合格，即判為不合格。 ，其結(jié)果應(yīng)滿足相關(guān)國際 /國家及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求： 相對偏差根據(jù)企業(yè)提供的試劑盒線性區(qū)間，將有證參考物質(zhì)或其他公認的參考物質(zhì)，或由參考方法定值的人源性樣品（可適當(dāng)添加被測物，以獲得高濃度的樣品）作為樣本，合理設(shè)置 2~3 個濃度，將其作為樣本按照待測試劑盒說明書的步驟進行檢測，每個樣品重復(fù)測定 3 次，測試結(jié)果記為（ Xi），按式（ 1）分別計算相對偏差（ Bi）。 對于適用多個機型的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用儀器】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。 （四）分析性能評估資料企業(yè)應(yīng)提交產(chǎn)品研制階段的所有性能驗證的研究資料，包括具體研究方法、質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)、實驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細資料。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對可用于樣本稀釋的基質(zhì)或處理方法進行研究，通過試驗確定樣本稀釋基質(zhì)或處理方法。 ：申請人應(yīng)考慮反應(yīng)模式、反應(yīng)時間、反應(yīng)溫度、洗滌次數(shù)等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。 。反應(yīng)體系主要包括：反應(yīng)條件、樣本用量、試劑用量等確定的依據(jù)。明確校準(zhǔn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)并提供校準(zhǔn)品的溯源性文件，校準(zhǔn)品應(yīng)溯源至現(xiàn)行的國家標(biāo)準(zhǔn)品或國際標(biāo)準(zhǔn)品。 （如有）的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料。如抗原 /抗體為申請人自制，則應(yīng)詳述抗原 /抗體的名稱及生物學(xué)來源，申請人對該抗原 /抗體技術(shù)指標(biāo)的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價等），且其生產(chǎn)工藝必須相對穩(wěn)定，并對其工藝有相關(guān)的驗證。應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申 報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021年第 44 號）的相關(guān)要求。目前認為， AntiTPO 抗體為人類自身免疫性甲狀腺炎較理想的標(biāo)志抗體，陽性結(jié)果可用于自身免疫性甲狀腺疾病的輔助診斷。檢測該類抗體的主要適用癥為自身免疫性甲狀腺疾病（包括突眼性甲狀腺腫和橋本甲狀腺炎等）。 TPO 也是自身免疫性甲狀腺疾病一種重要的自身抗 原 ， 可 以 刺 激 機 體 免 疫 系 統(tǒng) 產(chǎn) 生 抗 TPO 抗體（ Antibodiestothyroidperoxidase， AntiTPO）。其主要成分是由 933個氨基酸 殘基組成的分子量 103kD的 10%糖化的血色素樣蛋白質(zhì)，表達在細胞表面，在濾泡腔面的微絨毛處分布最為豐富。 （二）化學(xué)發(fā)光免疫分析法原理之外的其他抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑盒。本指導(dǎo)原則適用于進行首次注冊申報和相關(guān)許可事項變更的產(chǎn)品?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法主要有直接化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光、酶促間接化學(xué)發(fā)光等。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn) 體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。 本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細的研究資料和驗證資料?？辜谞钕龠^氧化物酶抗體測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（共五則范文） 第一篇：抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 5 抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。 本指導(dǎo)原則是對抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。 一、適用范圍從方法學(xué)考慮，在本文中抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑盒是指采用化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)，利用全自動、半自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，對人血清或血漿等樣本中抗甲狀腺過氧化物酶抗體的含量進行體外定量分析的試劑。 根據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）和《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔 2021〕 242號），抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑盒的管理類別為二類，分類代碼為 6840。 本指導(dǎo)原則不適用于： （一）單獨申請注冊的抗甲狀腺過氧化物酶抗體校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。 二、注冊申報資料要求（一）綜述資料甲狀腺過氧化物酶（ thyroidperoxidase， TPO），是催化甲狀腺激素的重要酶，由甲狀腺濾泡細胞合成。該酶可與甲狀腺球蛋白（ Thyroglobulin， Tg）協(xié)同作用將 L酪氨酸碘化，并將一碘酪氨酸和二碘酪氨酸聯(lián)結(jié)成為甲狀腺激素 T T3 和 rT3。 AntiTPO 作為自身免疫性甲狀腺疾病一種主要的自身抗體，可通過激活補體、抗體依賴細胞介導(dǎo) 的細胞毒作用和致敏的 T 殺傷細胞直接殺傷等作用機制，引起甲狀腺濾胞損傷，間接的抑制甲狀腺素的合成，導(dǎo)致甲狀腺功能減退。 AntiTPO抗體主要以 IgG 類為主，該抗體主要見于自身免疫性甲狀腺病，如橋本甲狀腺炎（陽性率 85%~100%）、 Graves ?。栃月?65%）、原發(fā)性黏液性水腫患者； 也見于其他器官特異性自身免疫病，如 1型糖尿病（陽性率 14%）、Addison ?。栃月?31%）、惡性貧血（陽性率 55%） 及產(chǎn)后甲狀腺炎（陽性率 15%）等。 綜述資料應(yīng)主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性方面的說明、研究結(jié)果的總結(jié)評價以及同類產(chǎn)品在國內(nèi)外上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、申報注冊產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同方面進行介紹。 （二）主要原材料研究資料（如需提供） /抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細試驗資料。同時確定該抗原 /抗體作為主要原材料的依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)； 如為申請人外購，則應(yīng)詳述其名稱及生物學(xué)來源，外購方名稱，提交外 購方出具的抗原 /抗體性能指標(biāo)及檢驗證書，詳述申請人對該抗原 /抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請人確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。 GB/T21415— 2021/ISO17511： 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》提供所用校準(zhǔn)品的來源、賦值過程和相應(yīng)指標(biāo)、以及不確定度等內(nèi)容。 （三）主要 生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）生產(chǎn)工藝主要包括：各組分制備工藝的研究，包括試劑的配方及工藝關(guān)鍵參數(shù)的確定依據(jù)等。 ，可以流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。 /抗體包被工藝研究：申請人應(yīng)考慮如包被緩沖液及添加量、濃度、時間、溫度等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述指標(biāo)的最佳組合。 ：申請人應(yīng)考慮樣本加樣方式、加樣量以及試劑添加順序、添加量對產(chǎn)品檢測結(jié)果的影響，通過實驗確定最佳的樣本及試劑的添加方式和添加量。確定反應(yīng)所需其他試劑用量（校準(zhǔn)品、標(biāo)記物、底物等）的研究資料。建議選擇不少于 3 批產(chǎn)品對以下分析性能進行研究，包括檢出限、線性、準(zhǔn)確度、重復(fù)性、批間差、特異性等指標(biāo)。如產(chǎn)品涉及不同包裝規(guī)格，則需要提供每個包裝規(guī)格在不同型號儀器上的評估資料； 如不同包裝規(guī)格之間不存在性能上的差異，需要提交包裝規(guī)格間不存在性能差異的說明。如果 3 次結(jié)果都符合要求，即判為合格。如果有 1 次結(jié)果不符合要求 ，則應(yīng)重新連續(xù)測試 20 次，并分別按照公式（ 1）計算相對偏差，如果大于等于 19 次測試的結(jié)果符合要求。 注：優(yōu)先考慮使用國家標(biāo)準(zhǔn)品或國際標(biāo)準(zhǔn)品、參考品。 取不少于 40 個合理分布在線性區(qū)間內(nèi)不同濃度的人血清或 /和血漿樣本，待測 AntiTPO 試劑與生產(chǎn)企業(yè)選定的比對系統(tǒng)進行比對試驗。 回收實驗參考體外診斷試劑分析性能評估相關(guān)技術(shù)審查指導(dǎo)原則要求完成準(zhǔn)確度（回收實驗）評估。在另一份樣本中加入同樣體積的無待測物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報告： 用公式（ 2）計算回收率： ??（ 2）式中： R— 回收率； V— 加入待測物標(biāo)準(zhǔn)液的體積； V0— 基礎(chǔ)樣本的體積 C— 基礎(chǔ)樣本加入待測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)后的檢測濃度； C0— 基礎(chǔ)樣本的檢測濃度； Cs— 待測物標(biāo)準(zhǔn)液的濃度。 空白限的建立可使用檢測零濃度校準(zhǔn)品或樣本稀釋液的方法進行。 檢出限的確立可采用系列稀釋參考品的方法進行。最低檢出限應(yīng)不高于 12IU/ml。 測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的人血清 /血漿，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。例如，將預(yù)期測定范圍加寬至 130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)實驗結(jié) 果逐漸減少數(shù)據(jù)點直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，確定線性范圍。按試劑說明書操作，對每一濃度的樣本均重復(fù)檢測不少于 2 次，計算其平均值，將結(jié)果平均值和稀釋比例用最小二乘法進行直線擬合，計算線性相關(guān)系數(shù) r，應(yīng)不低于，線性區(qū)間應(yīng)不窄于 [12， 400]IU/mL。 6） IU/mL和（ 200177。 分別用不同濃度的樣本各重復(fù)檢測 10 次，計算 10 次測量結(jié)果的平均值（ M）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD），根據(jù)公式（ 3）得出變異系數(shù)（ CV）。 CLSI的 EP7A2《臨床生化干擾實驗批準(zhǔn)指南》或《 WS/T4162021干擾實驗指南》進行特異性評估。 干擾物質(zhì)：樣本中常見干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響，如血紅蛋白、高脂、黃疸、類風(fēng)濕因子、抗核抗體、嗜異性抗體、總蛋白以及說明書中聲稱其他的干擾物質(zhì)對檢測結(jié)果的影響。建議將研究結(jié)果在說明書中進行說明。方法為對模擬添加樣本分別進行驗證，樣本量選擇應(yīng)體現(xiàn)一定的統(tǒng)計學(xué)意義，說明樣本的制備方法及干擾試驗的評價標(biāo) 準(zhǔn)，確定可接受的干擾物質(zhì)極限濃度，被測物濃度至少應(yīng)包括其醫(yī)學(xué)決定水平的濃度。每個濃度重復(fù) 3 份，對鉤狀效應(yīng)進行合理的驗證。 過度稀釋可能影響樣本基質(zhì)，研究過程應(yīng)注意基質(zhì)效應(yīng)影響，必要時應(yīng)提供基質(zhì)效應(yīng)研究有關(guān)的資料。AntiTPO 已有國家標(biāo)準(zhǔn)品和國際標(biāo)準(zhǔn)品，試劑盒配套校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，應(yīng)參照 GB/T21415— 2021 的要求溯源至國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品。 （如適用）如果試劑盒適用樣本類型包括血漿樣本，應(yīng)采用各種適用抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進行對比實驗研究 ，樣本量的選擇應(yīng)符合統(tǒng)計學(xué)意義。如同一病人的不同抗凝劑抗凝的高值血漿樣本難以獲得，可采用高值血清樣本分別添加到健康人的血清和不同抗凝劑抗凝的血漿樣本中進行驗證。具體研究方法建議參考相關(guān)國內(nèi)外有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進行。樣本來源覆蓋年齡、性別等因素，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。建議參考 CLSIC28A3c或 WS/T4022021《臨床實驗室檢驗項目參考區(qū)間的制定》進行相應(yīng)研究。 （六）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑盒的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。 樣本穩(wěn)定性研究主要包括樣本在室溫、冷藏或冷凍保存條件下抗甲狀腺過氧化物酶抗體含量的穩(wěn)定性驗證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點（溫度范圍）， 每間隔一定的時間段即對儲存樣本進行穩(wěn)定性驗證，從而確定不同類型樣本的保存條件及使用期限。 試劑盒穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中分別進行詳細說明。申請人如無法或不適于按照上述要求對產(chǎn)品進行臨床評價，則應(yīng)按照《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求開展臨床試驗。 、臨床普遍認為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對比試