【正文】 出限。例如重復測定 20 次，根據測量結果的平均值（ M）和標準差（ SD），計算 M+2SD及其對應的濃度值，結果應符合企業(yè)規(guī)定要求。 （ LOD）申請人應評估空白限（ LOB）和檢出限（ LOD）。用待評價系統(tǒng)對待回收分析樣本和基礎樣本進行測定，通常對樣本進行 3 次重復測定，計算均值，取其均值進行下述計算，求得回收率。 方法：選擇接近參考區(qū)間的常規(guī)檢測樣本，分為體積 相同的 3— 4份，在其中 2— 3份樣本中加入不同濃度相同體積的待測物標準液制備待回收分析樣本，加入體積小于原體積的 10%，制成 2— 3 個不同濃度的待回收分析樣本，計算加入的待測物的濃度。每份樣本按待測試劑及選定比對系統(tǒng)的要求分別進行檢測，每份樣本各測定 1 遍，用線性回歸方法對兩組結果進行線性擬合，得到線性回歸方程的相關系數（ r）和斜率，計算各個樣本的待測試劑測定值與比對系統(tǒng)測定值的絕對偏差或相對偏差。 比對試驗參考體外診斷試劑分析性能評估相關技術審查指導原則的要求完成準確度（方法學比對）評估。 ?????（ 1）式中： Bi—— 相對偏差； Xi—— 測量濃度； T—— 標定濃度。如果大于等于 2 次的結果不合格，即判為不合格。 ，其結果應滿足相關國際 /國家及行業(yè)標準的要求： 相對偏差根據企業(yè)提供的試劑盒線性區(qū)間，將有證參考物質或其他公認的參考物質，或由參考方法定值的人源性樣品（可適當添加被測物，以獲得高濃度的樣品）作為樣本，合理設置 2~3 個濃度，將其作為樣本按照待測試劑盒說明書的步驟進行檢測，每個樣品重復測定 3 次，測試結果記為（ Xi），按式（ 1）分別計算相對偏差（ Bi）。 對于適用多個機型的產品，應提供產品說明書【適用儀器】項中所列的所有型號儀器的性能評估資料。 （四）分析性能評估資料企業(yè)應提交產品研制階段的所有性能驗證的研究資料，包括具體研究方法、質控標準、實驗數據、統(tǒng)計分析等詳細資料。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進行處理后方可用于最終檢測，申請人還應對可用于樣本稀釋的基質或處理方法進行研究，通過試驗確定樣本稀釋基質或處理方法。 ：申請人應考慮反應模式、反應時間、反應溫度、洗滌次數等條件對產品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。 。反應體系主要包括：反應條件、樣本用量、試劑用量等確定的依據。明確校準品的質量標準并提供校準品的溯源性文件，校準品應溯源至現行的國家標準品或國際標準品。 （如有）的原料選擇、制備、定值過程及試驗資料。如抗原 /抗體為申請人自制，則應詳述抗原 /抗體的名稱及生物學來源，申請人對該抗原 /抗體技術指標的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價等），且其生產工藝必須相對穩(wěn)定，并對其工藝有相關的驗證。應符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）和《關于公布體外診斷試劑注冊申 報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021年第 44 號）的相關要求。目前認為， AntiTPO 抗體為人類自身免疫性甲狀腺炎較理想的標志抗體，陽性結果可用于自身免疫性甲狀腺疾病的輔助診斷。檢測該類抗體的主要適用癥為自身免疫性甲狀腺疾病（包括突眼性甲狀腺腫和橋本甲狀腺炎等）。 TPO 也是自身免疫性甲狀腺疾病一種重要的自身抗 原 ， 可 以 刺 激 機 體 免 疫 系 統(tǒng) 產 生 抗 TPO 抗體（ Antibodiestothyroidperoxidase， AntiTPO）。其主要成分是由 933個氨基酸 殘基組成的分子量 103kD的 10%糖化的血色素樣蛋白質，表達在細胞表面，在濾泡腔面的微絨毛處分布最為豐富。 （二）化學發(fā)光免疫分析法原理之外的其他抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑盒。本指導原則適用于進行首次注冊申報和相關許可事項變更的產品。化學發(fā)光免疫分析法主要有直接化學發(fā)光、電化學發(fā)光、酶促間接化學發(fā)光等。 本指導原則是在現行法規(guī)、標準體系及當前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標準 體系的不斷完善和科學技術的不斷發(fā)展，本指導原則相關內容也將適時進行調整。 本指導原則是供申請人和審查人員使用的指導文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應提供詳細的研究資料和驗證資料?？辜谞钕龠^氧化物酶抗體測定試劑注冊技術審查指導原則（共五則范文） 第一篇：抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑注冊技術審查指導原則 附件 5 抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑注冊技術審查指導原則本指導原則旨在指導注冊申請人對抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術審評部門審評注冊申報資料提供參考。 本指導原則是對抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑的一般要求，申請人應依據產品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據，并依據產品的具體特性對注冊申報資料的內容進行充實和細化。應在遵循相關法規(guī)的前提下使用本指導原則。 一、適用范圍從方法學考慮，在本文中抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑盒是指采用化學發(fā)光免疫分析技術，利用全自動、半自動化學發(fā)光免疫分析儀，對人血清或血漿等樣本中抗甲狀腺過氧化物酶抗體的含量進行體外定量分析的試劑。 根據《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）和《食品藥品監(jiān)管總局關于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔 2021〕 242號），抗甲狀腺過氧化物酶抗體測定試劑盒的管理類別為二類，分類代碼為 6840。 本指導原則不適用于： （一）單獨申請注冊的抗甲狀腺過氧化物酶抗體校準品和質控品。 二、注冊申報資料要求（一）綜述資料甲狀腺過氧化物酶（ thyroidperoxidase， TPO），是催化甲狀腺激素的重要酶，由甲狀腺濾泡細胞合成。該酶可與甲狀腺球蛋白（ Thyroglobulin， Tg）協(xié)同作用將 L酪氨酸碘化，并將一碘酪氨酸和二碘酪氨酸聯結成為甲狀腺激素 T T3 和 rT3。 AntiTPO 作為自身免疫性甲狀腺疾病一種主要的自身抗體，可通過激活補體、抗體依賴細胞介導 的細胞毒作用和致敏的 T 殺傷細胞直接殺傷等作用機制，引起甲狀腺濾胞損傷，間接的抑制甲狀腺素的合成，導致甲狀腺功能減退。 AntiTPO抗體主要以 IgG 類為主，該抗體主要見于自身免疫性甲狀腺病，如橋本甲狀腺炎（陽性率 85%~100%）、 Graves ?。栃月?65%）、原發(fā)性黏液性水腫患者； 也見于其他器官特異性自身免疫病，如 1型糖尿?。栃月?14%）、Addison ?。栃月?31%）、惡性貧血（陽性率 55%） 及產后甲狀腺炎（陽性率 15%）等。 綜述資料應主要包括產品預期用途、產品描述、有關生物安全性方面的說明、研究結果的總結評價以及同類產品在國內外上市情況介紹等內容，其中同類產品上市情況介紹部分應著重從方法學、臨床應用情況、申報注冊產品與目前市場上已獲批準的同類產品之間的異同方面進行介紹。 （二）主要原材料研究資料（如需提供） /抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細試驗資料。同時確定該抗原 /抗體作為主要原材料的依據和質量標準； 如為申請人外購，則應詳述其名稱及生物學來源，外購方名稱，提交外 購方出具的抗原 /抗體性能指標及檢驗證書，詳述申請人對該抗原 /抗體技術指標的要求以及申請人確定該抗體作為主要原材料的依據。 GB/T21415— 2021/ISO17511： 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質賦值的計量學溯源性》提供所用校準品的來源、賦值過程和相應指標、以及不確定度等內容。 （三）主要 生產工藝及反應體系的研究資料（如需提供）生產工藝主要包括：各組分制備工藝的研究，包括試劑的配方及工藝關鍵參數的確定依據等。 ，可以流程圖方式表示，并簡要說明主要生產工藝的確定依據。 /抗體包被工藝研究：申請人應考慮如包被緩沖液及添加量、濃度、時間、溫度等指標對產品性能的影響，通過試驗確定上述指標的最佳組合。 ：申請人應考慮樣本加樣方式、加樣量以及試劑添加順序、添加量對產品檢測結果的影響，通過實驗確定最佳的樣本及試劑的添加方式和添加量。確定反應所需其他試劑用量（校準品、標記物、底物等）的研究資料。建議選擇不少于 3 批產品對以下分析性能進行研究，包括檢出限、線性、準確度、重復性、批間差、特異性等指標。如產品涉及不同包裝規(guī)格，則需要提供每個包裝規(guī)格在不同型號儀器上的評估資料； 如不同包裝規(guī)格之間不存在性能上的差異，需要提交包裝規(guī)格間不存在性能差異的說明。如果 3 次結果都符合要求，即判為合格。如果有 1 次結果不符合要求 ，則應重新連續(xù)測試 20 次，并分別按照公式（ 1）計算相對偏差，如果大于等于 19 次測試的結果符合要求。 注：優(yōu)先考慮使用國家標準品或國際標準品、參考品。 取不少于 40 個合理分布在線性區(qū)間內不同濃度的人血清或 /和血漿樣本，待測 AntiTPO 試劑與生產企業(yè)選定的比對系統(tǒng)進行比對試驗。 回收實驗參考體外診斷試劑分析性能評估相關技術審查指導原則要求完成準確度（回收實驗）評估。在另一份樣本中加入同樣體積的無待測物的溶劑，制成基礎樣本。 數據處理及結果報告： 用公式（ 2）計算回收率： ??（ 2）式中： R— 回收率； V— 加入待測物標準液的體積； V0— 基礎樣本的體積 C— 基礎樣本加入待測標準物質后的檢測濃度； C0— 基礎樣本的檢測濃度； Cs— 待測物標準液的濃度。 空白限的建立可使用檢測零濃度校準品或樣本稀釋液的方法進行。 檢出限的確立可采用系列稀釋參考品的方法進行。最低檢出限應不高于 12IU/ml。 測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預期測定上限的人血清 /血漿，且應充分考慮多倍稀釋對樣本基質的影響。例如，將預期測定范圍加寬至 130%，在此范圍內選擇更多的濃度水平，然后依據實驗結 果逐漸減少數據點直至表現出線性關系，確定線性范圍。按試劑說明書操作，對每一濃度的樣本均重復檢測不少于 2 次，計算其平均值，將結果平均值和稀釋比例用最小二乘法進行直線擬合，計算線性相關系數 r，應不低于，線性區(qū)間應不窄于 [12， 400]IU/mL。 6） IU/mL和（ 200177。 分別用不同濃度的樣本各重復檢測 10 次，計算 10 次測量結果的平均值（ M）和標準差（ SD），根據公式（ 3）得出變異系數（ CV）。 CLSI的 EP7A2《臨床生化干擾實驗批準指南》或《 WS/T4162021干擾實驗指南》進行特異性評估。 干擾物質：樣本中常見干擾物質對檢測結果的影響，如血紅蛋白、高脂、黃疸、類風濕因子、抗核抗體、嗜異性抗體、總蛋白以及說明書中聲稱其他的干擾物質對檢測結果的影響。建議將研究結果在說明書中進行說明。方法為對模擬添加樣本分別進行驗證，樣本量選擇應體現一定的統(tǒng)計學意義，說明樣本的制備方法及干擾試驗的評價標 準，確定可接受的干擾物質極限濃度，被測物濃度至少應包括其醫(yī)學決定水平的濃度。每個濃度重復 3 份，對鉤狀效應進行合理的驗證。 過度稀釋可能影響樣本基質，研究過程應注意基質效應影響，必要時應提供基質效應研究有關的資料。AntiTPO 已有國家標準品和國際標準品，試劑盒配套校準品和質控品，應參照 GB/T21415— 2021 的要求溯源至國家（國際）標準品。 （如適用）如果試劑盒適用樣本類型包括血漿樣本，應采用各種適用抗凝劑抗凝的血漿樣本分別與血清樣本進行對比實驗研究 ，樣本量的選擇應符合統(tǒng)計學意義。如同一病人的不同抗凝劑抗凝的高值血漿樣本難以獲得，可采用高值血清樣本分別添加到健康人的血清和不同抗凝劑抗凝的血漿樣本中進行驗證。具體研究方法建議參考相關國內外有關體外診斷產品性能評估的文件進行。樣本來源覆蓋年齡、性別等因素，盡可能考慮樣本來源的多樣性、代表性。建議參考 CLSIC28A3c或 WS/T4022021《臨床實驗室檢驗項目參考區(qū)間的制定》進行相應研究。 （六）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內容，申報試劑盒的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。對于實時穩(wěn)定性研究，應提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。 樣本穩(wěn)定性研究主要包括樣本在室溫、冷藏或冷凍保存條件下抗甲狀腺過氧化物酶抗體含量的穩(wěn)定性驗證，可以在合理的溫度范圍內選擇溫度點（溫度范圍）， 每間隔一定的時間段即對儲存樣本進行穩(wěn)定性驗證，從而確定不同類型樣本的保存條件及使用期限。 試劑盒穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內容的研究結果應在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中分別進行詳細說明。申請人如無法或不適于按照上述要求對產品進行臨床評價，則應按照《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》的要求開展臨床試驗。 、臨床普遍認為質量較好的同類產品作為對比試