【正文】 說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。 如注冊申請中包含不同的包裝規(guī)格，需要對不同包裝規(guī)格之間的差異進(jìn)行分析或驗證。同時，應(yīng)對校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的瓶間均勻性進(jìn)行評價。其中，所添加潛在干擾物與含有孕酮的樣本之間體積比例為不大于 1： 9，對照樣本組的基質(zhì)盡可能與待測樣本組樣本的基質(zhì)一致。 15%），待測樣本 測量結(jié)果的平均值（ n≥2）應(yīng)在對照樣本組孕酮目標(biāo)濃度 M177。 15%），重復(fù)測定（ n≥ 7）并計算平均值（ M）與標(biāo)準(zhǔn)差（ SD）。 溶血（血紅蛋白）、脂血（甘油三酯）、黃疸（膽紅素）等干擾因素對檢測結(jié)果的影響； 樣本中其他可能干擾試劑反應(yīng)的物質(zhì)對檢 測結(jié)果的影響； 資料中所提到的干擾物質(zhì)，其干擾程度均不應(yīng)使用模糊的描述方式，而應(yīng)細(xì)化到干擾量，并提供相應(yīng)的實驗數(shù)據(jù)予以支持。 《 WS/T4162021 干擾實驗指南》或相關(guān)國際、國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)行特異性評估。其中，低值濃度的樣本須接近線性范圍的下限。 低于申請人提供的空白限數(shù)值的檢測結(jié)果數(shù)量應(yīng)小于等于 3個； 無高于 。根據(jù)提供信息，對 5 份濃度近似檢出限的低值樣本進(jìn)行測定，每份樣本測定 5 次。線性回歸計算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)（ r）、斜率及偏差，結(jié)果應(yīng)符合企 業(yè)規(guī)定要求。 比對實驗參考相關(guān)國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估的文件進(jìn)行準(zhǔn)確度評估。 回收率應(yīng)在 85%— 115%范圍內(nèi)。在另一份樣本中加入同樣體積的無待測物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。如果有 1次結(jié)果不符合要求，則應(yīng)重新連續(xù)測試 20 次，并分別按照公式（ 2）計算相對偏差，如果大于等于 19 次測試的結(jié)果符合要求，則準(zhǔn)確度符合企業(yè)規(guī)定要求。 對企業(yè)參考品進(jìn)行檢測用參考方法定值的企業(yè)參考品對試劑（盒）進(jìn)行測試，重復(fù)檢測 3次，取測試結(jié)果記為（ Xi），按公式（ 2）計算相對偏差（ Bi）。 Bi=（ Xi－ T） /T?????????（ 2）式中： Xi— 單次測試結(jié)果； T— 有證參考物質(zhì)標(biāo)示值或各濃度人源樣本定值； Bi— 單次相對偏差。如果大于等于 2 次的結(jié)果不合格，即判為不合格。 ： 可用于評價常規(guī)方法的參考物質(zhì) /有證參考物質(zhì)（ CRM）對試劑（盒）進(jìn)行測試，重復(fù)檢測 3 次，取測試結(jié)果記為（ Xi），按公式（ 2）計算相對偏差（ Bi）。按公式（ 1）計算變異系數(shù)（ CV）。 重復(fù)性在重復(fù)性條件下，對濃度（ 2— 14） nmol/L 和（ 46— 85） nmol/L 的樣品分別重復(fù)測定 10次，計算 10 次測定結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD），根據(jù)公式（ 1）得出變異系數(shù)（ CV），其測量結(jié)果的變異系數(shù)（ CV）應(yīng)不大于 10%（儀器自動操作法）或不大于 15%（手工操作法）。應(yīng)當(dāng)對多批（至少 3 批）產(chǎn)品進(jìn)行性能評估。 （三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供） 生產(chǎn)工藝介紹，可以圖表方式表示； ； ：含樣本采集、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品、測試步驟、結(jié)果計算等； ：含樣本采集及處理、樣本要求、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件、校準(zhǔn)方法（如有）、質(zhì)控方法等的研究資料； 。 、校準(zhǔn)品的原料選擇、制備、定值過程及實驗資料 準(zhǔn)品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。 其他主要原材料的選擇及驗證資料，申請人應(yīng)詳述每一原材料技術(shù)指標(biāo)的要求以及確定該原材料作為主要原材料的依據(jù)，確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。同時確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)； 如為申請人外購，則應(yīng)詳述其名稱及生物學(xué)來源，外購方名稱，提交外購方出具的抗體性能指標(biāo)及檢驗報告，詳述申請人對該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及申請人確定該抗體作為主要原材 料的依據(jù)。 （二）主要原材料研 究資料（如需提供） 、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及實驗驗證研究資料檢測試劑所用抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗資料。 孕酮的檢測方法主要為酶聯(lián)免疫法、化學(xué)發(fā)光免 疫分析法，化學(xué)發(fā)光免疫分析法是目前臨床檢測孕酮應(yīng)用較多的檢測方法。（ 2）黃體功能不全、卵巢黃體發(fā)育不全時，孕酮含量相應(yīng)降低。（ 3）妊娠毒血癥、先兆子癇、葡萄胎及原發(fā)性高血壓時，孕酮含量也會升高。 血中孕酮升高可見于以下情況：（ 1）觀察婦女排卵 的時間及黃體酮的生成情況：在排卵的－ 0、 +1 天，孕酮含量成倍增加，提示為有排卵。臨床研究證明孕酮在非孕期女性體內(nèi)發(fā)揮著促進(jìn)排卵和維持黃體的正常功能。若受孕，黃體不會凋落，繼續(xù)分泌孕酮，使孕酮保持在相當(dāng)于黃體中期的水平，并一直持續(xù)到妊娠的第六周。排卵之后，由黃體產(chǎn)生的孕酮迅速升高，并在排卵后 5— 7 天達(dá)到濃度最大值 10ng/mL— 20ng/mL，使子宮內(nèi)膜從增生狀態(tài) 轉(zhuǎn)為分泌狀態(tài)。 孕酮的主要功能是使子宮為受精卵的著床做好準(zhǔn)備，并維持妊娠。正常男性和女性卵泡期產(chǎn)生的孕酮水平很低，分泌入血后主要結(jié)合于白蛋白和性激素結(jié)合蛋白在體內(nèi)進(jìn)行循環(huán)。 （二）化學(xué)發(fā)光免疫分析法原理之外的其他孕酮檢測試劑。依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號）、《體外診斷試劑注冊管理辦法修正案》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 30 號）和《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔 2021〕 242 號），孕酮檢測試劑管理類別為Ⅱ類醫(yī)療器械，分類編碼為 6840。 本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。 本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。孕酮檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（大全五篇） 第一篇：孕酮檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則 附件 3 孕酮檢測試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對孕酮檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。 本指導(dǎo)原則是對孕酮檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。 一、適用范圍從方法學(xué)考慮，在本文中孕酮檢測試劑是指采用化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)，以競爭法為基本原理，利用全自動、半自動化學(xué)發(fā)光免疫分析 儀，在醫(yī)學(xué)實驗室對人體樣本中孕酮的含量進(jìn)行體外定量分析的試劑。 本指導(dǎo)原則不適用于： （一）單獨申請注冊的孕酮校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。 二、注 冊申報材料要求（一）綜述資料孕酮是一種重要的孕激素，屬于類固醇激素，相對分子量 ，主要由卵巢黃體和妊娠期胎盤生成，是睪酮、雌激素及腎上腺皮質(zhì)激素的前體。孕酮水平與黃體的發(fā)育和萎縮有關(guān)。在月經(jīng)周期的卵泡期，孕酮水平很低。若未受孕，在月經(jīng)周期的最后 4天黃體萎縮，孕酮濃度降低。在懷孕期間，胎盤逐漸成為孕酮的主要來源，濃度從懷孕前 3 個月的10ng/mL— 50ng/mL 升高到 7— 9個月的 50ng/mL— 280ng/mL。如果黃體產(chǎn)生的孕酮不足，可能說明黃體功能不足，而黃體功能不足與不孕及早期流產(chǎn)有關(guān)。（ 2）正常妊娠、雙胎和多胎妊娠時孕酮合成量明顯增加，血液中孕酮水平相對升高。 血中孕酮含量降低見于以下情況：（ 1）先兆流產(chǎn)、宮外孕、早產(chǎn)、閉經(jīng)、不孕癥。（ 3）腎上腺、甲狀腺功能嚴(yán)重失調(diào)也可影響卵巢功能，使排卵發(fā)生障礙，孕酮含量也會相應(yīng)降低。 綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、生物安全性方面的說明、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、申報注冊產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同方面進(jìn)行介紹，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021年第 44 號）的相關(guān)要求。如抗體為申請人自制，則應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，申請人對該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求（如外觀、純度、蛋白濃度、效價等），且其生產(chǎn)工藝必須相對穩(wěn)定，并對其工藝有相關(guān)的驗證。供貨商應(yīng)相對固定。若為外購，應(yīng)提供外購方名稱并提交外購方出具的檢驗報告。申請人應(yīng)根據(jù) GB/T21415— 2021/ISO17511:2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》提供所用校準(zhǔn)品的來源 、賦值過程和相應(yīng)指標(biāo)，以及不確定度等內(nèi)容。 （四）分析性能評估資料申請人應(yīng)提交在產(chǎn)品研制階段對試劑盒進(jìn)行的所有性能驗證的研究資料，包括具體研究方法、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法等詳細(xì)資料。對于孕酮檢測試劑，建議著重對以下分析性能進(jìn)行研究。 CV=SD/ 100%........................................（ 1） 3個批次試劑盒對濃度在（ 2— 14） nmol/L 和（ 46— 85）nmol/L范圍內(nèi)的樣本各重復(fù)測定 10 次，計算 30 個測量值的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD）。其測量結(jié)果的變異系數(shù)（ CV）應(yīng)不大于 15%。如果 3 次結(jié)果都符合要求，即判為合格。如果有 1次結(jié)果不符合要求，則應(yīng)重新連續(xù)測試 20次，并分別按照公式（ 2）計算相對偏差，如果大于等于 19 次測試的結(jié)果符合要求，則準(zhǔn)確度符合企業(yè)規(guī)定要求。 注：首選國家參考物質(zhì)，如無國家參考物質(zhì)可選用國際參考物質(zhì)。如果大于等于 2 次的結(jié)果不合格，即判為不合格。 回收實驗選擇接近參考區(qū)間的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的 3— 4 份，在其中 2— 3 份樣本中加入不同濃度相同體積的待測物標(biāo)液制備待回收分析樣本，加入體積不大于原體積的 10%，制成 2— 3 個不同濃度的待回收分析樣本，計算加入的待測物的濃度。用待評價系統(tǒng)對待回收分析樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測定，通常對樣本進(jìn)行 3 次重復(fù)測定，計算均值，取其均值進(jìn)行下述計算。用公式（ 3）計算回收率： ????????????? （ 3）式中： R回收率； V加入待測物標(biāo)準(zhǔn)液的體積； V0基礎(chǔ)樣本的體積 C樣本加入待測標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)后的檢測濃度； C0基礎(chǔ)樣本的檢測濃度； Cs待測物標(biāo)準(zhǔn)液的濃度。 用不少于 40 個覆蓋檢測濃度范圍內(nèi)不同濃度的人源樣品，以申請人指定的試劑（盒）作為比對方法，每份樣品按待測試劑（盒）及比對試劑（盒）的操作方法分別檢測。 、檢出限及參考區(qū)間等相關(guān)信息。對測量結(jié)果按照大小進(jìn)行排序，符合如下條件，即可認(rèn)為所提供的空白限和檢出限的設(shè)置基本合理。 稀釋為至少 5 個濃度。將每一濃度的樣本重復(fù)測定最少 2 次，計算平均值，將結(jié)果平均值和稀釋比例用最小二乘法進(jìn)行直線擬合，并計算線性相關(guān)系數(shù)（ r）。孕酮的干擾物質(zhì)選取可參見表 1，企業(yè)可在不低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的前提下根據(jù)實際情況選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行評估干擾程度。 表 1 孕酮干擾物參考表序號干擾物質(zhì)序號干擾物質(zhì)序號干擾物質(zhì)111去氧皮質(zhì)酮 617β 雌二醇 11 克羅米酚 2孕烯醇酮 7雌酮 1211脫氧皮質(zhì)醇 3皮質(zhì)醇 8雌三醇 13 保泰松 4皮質(zhì)酮 9醛甾酮 14睪酮 517a羥基孕酮 10 丹那唑 15 強的松龍評估方法：設(shè)置對照樣本組，使孕酮目標(biāo)濃度為 64nmol/L（允許相對偏差為177。設(shè)置待測樣本組，分別添加潛在干擾物于含有孕酮的樣本中，獲得待測樣本中孕酮的目標(biāo)濃度為64nmol/L（允許相對偏差為177。 2SD 范圍內(nèi)。 GB/T21415— 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品溯源相關(guān)資料，提供質(zhì)控品賦值及其質(zhì)控范圍確定的相關(guān)資料。 對于適用多 個機型的產(chǎn)品，應(yīng)提供如產(chǎn)品說明書【適用機型】項中所列的所有適用機型的性能評估資料。如不同的包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交采用每個包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行的上述項目評估的試驗資料及總結(jié)。 （五）參考區(qū)間確定資料應(yīng)提交驗證參考值（區(qū)間）所采用樣本來源及詳細(xì)的試驗資料。建議參考相關(guān)國際、國內(nèi)有關(guān)體外診斷產(chǎn)品性能評估文件開展評估。如：非孕正常女性卵泡期、黃體期、絕經(jīng)后； 孕早期、中期、晚期等，以下列舉具有代表性的國內(nèi)外廠家參考區(qū)間僅供參考（見表 2）。 表 2 各 廠 家 參 考 區(qū) 間 篩 選 分 組 示 例 廠 家 篩 選 分 組Ang/mLBng/mLCng/mLDng/mL男性 — — — — 卵泡期 — — — — 排卵期 /—— — 黃體期 — — 27/— 絕經(jīng)期 ND— — — — 早期妊娠 0— 12 周 //—46/中期妊娠 13— 28 周 //— 74/晚期妊娠 29— 40周 //45— 143/（六）穩(wěn)定性研究資料穩(wěn)定性研究