dna聚合酶的定義-文庫吧資料
2025-08-11 00:27本頁面
【正文】 體作用扔不十分清楚?！ 〈竽c桿菌DNA聚合酶Ⅲ(DNApolⅢ)：DNA pol Ⅲ全酶由多種亞基組成(見下表)，而且容易分解?？赡茉贒NA的損傷修復(fù)中該酶起到一定的作用。→339。但是用單鏈結(jié)合蛋白(SSBP)可以提高其聚合速率，可達(dá)原來的50100倍。該酶的最適模板是雙鏈DNA而中間有空隙(gap)的單鏈DNA部份，而且該單鏈空隙部份不長于100個核苷酸。該酶的催化特性如下：人們開始尋找另外的DNA聚合酶，并于1970年發(fā)現(xiàn)了DNApolⅡ。外切酶活性位點，用以結(jié)合和切除生長鏈上未配對的339。[6]339。外切酶活性位點，用以結(jié)合生長鏈前方的539。[5]539。OH。[2]DNA生長鏈或引物結(jié)合位點?！ NAPolⅠ在空間結(jié)構(gòu)上近似球體，直徑約65A。在無模板和引物時還可以從頭合成同聚物或異聚物。經(jīng)過枯草桿菌蛋白酶處理后，酶分子分裂成兩個片段，大片段分子量為76KD，通常稱為Klenow片段，小片段的分子量為34KD。每個酶分子中含有一個Zn2+，在DNA聚合反應(yīng)起著很重要的作用。分子含有一個二硫鍵和一個SH基。大腸桿菌DNA聚合酶 大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ(DNApolymeraseⅠ，DNApolⅠ)這是1956年由ArthurKornberg首先發(fā)現(xiàn)的DNA聚合酶，又稱Kornber酶。[3]而在另一些突變株中，DNApolⅠ的活力中只是野生型的1%，但是DNA復(fù)制卻正常，而且此突變株增加了對紫外線、烷化劑等突變因素的敏感性。主要證據(jù)如下:[1]純化的DNApolⅠ催化dNTP摻入的速率為667堿基/分，而體內(nèi)DNA合成速率要比此高二倍數(shù)量級。這樣，從切口開始合成了一條與被取代的舊鏈完全相同的新鏈。這種反應(yīng)叫缺口平移(Nick translation)?！?39。反應(yīng)式為32P32Pi+dNPPP←dNP32P32P+PPi→DNA(dNMP)n+XPPi←(dNMP)nx+X(dNPPP)→DNA末端焦磷酸解DNA分子。對岡崎片段539。外切酶活力達(dá)10倍以上。每次能切除10個核苷酸，而且DNA的聚合作用能刺激539。這種酶活性只對DNA上配對部份(雙鏈)磷酸二酯鍵有切割活力作用，方向是539。方向水解DNA生長鏈前方的DNA鏈，主要產(chǎn)生539。外切酶活性就是從539。外切酶活性──切除修復(fù)作用:539。 [3]539?！?39。外切酶活性比野生型高得多，因此，其DNA復(fù)制真實性好，變異率低。相反，另外一些具有抗突變能力的T4突變株中的T4DNA聚合酶的339?！?39。外切酶切除，以便重新在這個位置上聚合對應(yīng)的核苷酸。外切酶活性的主要功能是校對作用，當(dāng)加入的核苷酸與模板不互補(bǔ)而游離時則被339。由此推論，339。末端與模板發(fā)生分離的機(jī)會更多，因而降解作用加強(qiáng)。外切酶活性所降解。當(dāng)反應(yīng)體系中沒有反應(yīng)底物dNTP時，由于沒有聚合作用而出現(xiàn)暫時的游離現(xiàn)象，從而被339?！?39?！?39。539。PO4結(jié)合生成磷酸二酯鍵。dNTP進(jìn)入結(jié)合位點后，可能使酶的構(gòu)象發(fā)生變化，促進(jìn)339。OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去，就是DNApolⅠ的聚合作用。→339。OH末端。[3]不能起始合成新的DNA鏈。這類酶的共同性質(zhì)是:[1]以脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)為前體催化合成DNA。DNA pol Ⅲ是一種多亞基的蛋白
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