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聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)-文庫吧資料

2024-11-17 05:24本頁面

　　

【正文】的大小決定延伸的時間，片段越大，中溫延伸的時間 _____ ；引物的堿基數(shù)量和組成則決定著復(fù)性溫度的選擇，如果引物越短， A 、 T 含量越多，復(fù)性溫度就 ______ ，反之引物越長， G 、 C 含量越多，復(fù)性溫度就 ______ ，這是因為 G 、 C 之間是由 ___ 條氫鍵連接， A 、 T 之間是由 ___條氫鍵連接。儲備區(qū) 學(xué)習(xí) ( 2) 離心管中要加入少量石蠟油，目的是 ___________________ 。探究區(qū) 自我閱讀教材，完善下列內(nèi)容： 1 ． DNA 片段的 P C R 擴(kuò)增準(zhǔn)備移液混合離心第 15課時學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開關(guān) 知識探究區(qū) 自我第 15課時學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開關(guān) 知識 ( 3) 由于作為原料的四種脫氧核苷酸被32P 標(biāo)記，所以新合成的子鏈均含有放射性，一次循環(huán)后的兩個 D N A 各有一條鏈含32P ，若復(fù)制 n 次，產(chǎn)生子鏈共 2n 2 ，其中只有親本的兩條母鏈不含32P ，則其所占比例為 2 / ( 2n 探究區(qū) 自我檢測區(qū) 答案 ( 1 ) 5 ′ — G — A — OH ( 3 ) 每個 DNA 分子各有一條鏈含 32 P 標(biāo)記 1 / 2 n 解析 ( 1 ) D N A 聚合酶不能從頭開始合成 DNA ，只能從3 ′ 端延伸 DNA 鏈，所以引物就提供了 3 ′ 端，子鏈延伸方向 5 ′ → 3 ′ ，引物 Ⅰ 與 b 鏈部分堿基互補(bǔ)，引物 Ⅱ則與 a 鏈部分堿基互補(bǔ)，且連接到 a 鏈的 3 ′ 端，故引物 Ⅱ 的結(jié)構(gòu)為 5 ′ — G — A — OH ，復(fù)性結(jié)果為：第 15課時學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開關(guān) 知識儲備區(qū) 學(xué)習(xí) ( 3) 若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P 標(biāo)記，請分析循環(huán)一次后生成的 DNA 分子的特點是______________________________ ；循環(huán) n 次后生成的DNA 分子中不含放射性的單鏈占總單鏈的比例為________ 。檢測區(qū) ( 1) 在相應(yīng)的橫線上寫出引物 Ⅱ ，并在復(fù)性這一步驟中將引物 Ⅱ 置于合適的位置。儲備區(qū) 學(xué)習(xí) 檢測區(qū) 活學(xué)活用 1 ．在遺傳病及刑偵破案中常需要對樣品 DNA 進(jìn)行分析， P C R技術(shù)能快速擴(kuò)增 DNA 片段，在幾個小時內(nèi)復(fù)制出上百萬份的 DNA 拷貝，有效地解決了因為樣品中 DNA 含量太低而難以對樣品進(jìn)行分析研究的難題。儲備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我 2n 72 四種脫氧核苷酸 TaqDNA聚合酶歸納提煉細(xì)胞內(nèi) DNA 復(fù)制與 P C R 的比較第 15課時學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開關(guān) 知識若開始加入了 N 個 DNA 模板片段，理論上，循環(huán) n 次后能獲得 ________ 個 DNA 片段。根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的 DNA 鏈。探究區(qū) 自我堿基互補(bǔ)配對 94～ 98 變性解旋 40～ 60 第 15課時學(xué)習(xí)探究區(qū) 本課欄目開關(guān) 知識檢測區(qū) ( 2) 反應(yīng)過程 ① 變性溫度上升到 __________ ℃ 時，目的 DNA 雙鏈 ___ ______為單鏈模板。儲備區(qū) 學(xué)習(xí) 探究區(qū) 自我檢測區(qū) 2 ．細(xì)胞內(nèi) DNA 復(fù)制條件分析條件組分作用模板 DNA 的 ___ 條單鏈提供復(fù)制的模板原料四種 _____________ 合成 DNA 子鏈的原料解旋酶打開 _______________ 酶 DNA 聚合酶催化 ________________ 能量 ______ 為解螺旋和合成子鏈供能

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