【正文】 的主骨架沿中心軸成穩(wěn)定的α螺旋構象。在Tm時，核酸分子內50%的雙螺旋結構被破壞?？梢奃NA變性是在一個很窄的溫度范圍內發(fā)生的。融解溫度　　對雙鏈DNA進行加熱變性，當溫度升高到一定高度時，DNA溶液在260nm處的吸光度突然明顯上升至最高值，隨后即使溫度繼續(xù)升高，吸光度也不再明顯變化。Tm在DNA雙螺旋結構中堿基藏入內側，變性時DNA雙螺旋解開，于是堿基外露，堿基中電子的相互作用更有利于紫外吸收，故而產生增色效應。指變性后DNA溶液的紫外吸收作用增強的效應。 別構效應（allosteric effect）:又稱為變構效應，是寡聚蛋白與配基結合改變蛋白質的構象，導致蛋白質生物活性改變的現(xiàn)象。蛋白質在受到光照，熱，有機溶劑以及一些變性劑的作用時，次級鍵受到破壞，導致天然構象的破壞，使蛋白質的生物活性喪失。在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，所帶凈電荷為零，呈電中性，此時溶液的pH稱為該氨基酸的等電點。肝臟將過量的膽固醇轉化為膽汁酸。 　　（4） 高密度脂蛋白(HDL，)，也是在肝臟中生成，可能負責清除細胞膜上過量的膽固醇。 　?。?） 極低密度脂蛋白VLDL()，在肝臟中生成，將脂類運輸到組織中，當VLDL被運輸到全身組織時，被分解為三酰甘油、脫輔基蛋白和磷脂，最后，VLDL被轉變?yōu)榈兔芏戎鞍?。血漿脂蛋白可以把脂類(三酰甘油、磷脂、膽固醇)從一個器官運輸到另一個器官。α羥脂酸可以繼續(xù)氧化脫羧，就形成少一個碳原子的脂肪酸。故每次β氧化1分子脂酰CoA生成1分子FADH２，1分子NADH+H+，1分子乙酰CoA，通過呼吸鏈氧化前者生成2分子ATP，后者生成3分子ATP。脂肪酸的β氧化飽和脂肪酸在一系列酶的作用下，羧基端的β位C原子發(fā)生氧化，C鏈在α位C原子與β位C原子間發(fā)生斷裂，每次生成一個乙酰CoA和較原來少兩個C單位的脂肪酸，這個不斷重復進行的脂肪酸氧化過程稱為脂肪酸的β 氧化。精氨酸在釋放了尿素后產生的鳥氨酸，和氨甲酰磷酸反應產生瓜氨酸，瓜氨酸又和天冬氨酸反應生成精氨基琥珀酸，精氨基琥珀酸為酶裂解，產物為精氨酸及延胡索酸。通過生成的乙酰輔酶A與草酰乙酸縮合生成檸檬酸(三羧酸)開始，再通過一系列氧化步驟產生CONADH及FADH2，最后仍生成草酰乙酸，進行再循環(huán)，從而為細胞提供了降解乙?；峁┊a生能量的基礎。參見糖酵解。它表明了，當微生物細胞吸收葡萄糖后，葡萄糖經己糖激酶、磷酸已糖異構酶、磷酸己糖激酶的作用，生成1，6—二磷酸果糖，1，6—二磷酸果糖再經過一系列酶的作用，降解生成丙酮酸為主要特征的一系列生物化學過程。標兵酶是一種調節(jié)酶，它們常常也是別構酶。將電子傳遞給氧。從a傳遞到a3的是兩個銅原子，有價態(tài)變化。呼吸鏈中至少有5種：b、cc、a、a3(按電子傳遞順序)。將電子從輔酶Q傳遞到氧。 復合體Ⅲ 輔酶Q：細胞色素C氧化還原酶復合體，是細胞色素和鐵硫蛋白的復合體，把來自輔酶Q的電子，依次傳遞給結合在線粒體內膜外表面的細胞色素C。 是呼吸鏈中唯一的非蛋白氧化還原載體，可在膜中迅速移動。鐵的價態(tài)變化使電子從FMNH2轉移到輔酶Q。它從NADH得到兩個電子，經鐵硫蛋白傳遞給輔酶Q。其中復合體Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、輔酶Q和細胞色素C的數量比為1：2：3：7：63：9。 原核細胞的呼吸鏈位于質膜上，真核細胞則位于線粒體內膜上。 在葡萄糖的分解代謝中，一分子葡萄糖共生成10個NADH和2個FADH2，其標準生成自由能是613千卡，而在燃燒時可放出686千卡熱量，即90％貯存在還原型輔酶中。電子傳遞和ATP形成的偶聯(lián)機制稱為氧化磷酸化作用。其中的氫以質子形式脫下，電子沿呼吸鏈轉移到分子氧，形成粒子型氧，再與質子結合生成水。 呼吸鏈又稱電子傳遞鏈，是由一系列電子載體構成的，從NADH或FADH2向氧傳遞電子的系統(tǒng)。它可降低酶促反應速度。所以胞吞和胞吐作用對體內外源化學物或異物的清除轉運具有重要意義。在胞吞作用中如果被攝入的物質為固體則稱為吞噬(phagocytosis),如為 液體則為胞飲(pinocytosis)。后者是將顆粒物由細胞內運出的過程。膜動轉運又可分為入胞（endocytosis）和出胞作用（exocytosis）。膜動轉運 膜動轉運是細胞與外界環(huán)境交換一些大分子物質的過程，其主要特點是在轉運過程中生物膜結構發(fā)生變化，轉運過程具有特異性，生物膜呈現(xiàn)主動選擇性并消耗一定的能量。 促進擴散（facilitated diffusion）促進擴散的特點是需要載體，順濃度梯度由高濃度向低濃度而且不需要細胞供給能量的擴散性轉運。許多外源化學物的代謝產物經由腎臟和肝臟排出，主要是借助主動轉運。 主動轉運（active transport）主動轉運的主要特點是可逆濃度梯度進行轉運，轉運過程消耗能量的轉運方式。特殊轉運 特殊轉運指有一定的載體，具有較強的專一性，有一定的選擇性和主動性，生物膜主動選擇某種機體需要或由機體排出的物質進行的轉運。腸道上皮細胞和肥大細胞膜上孔道直徑較小，分子量小于200的化合物方可以通過。此種孔狀結構為親水性孔道，不同組織生物膜孔道的直徑不同。 濾過（filtration）濾過是水溶性物質隨同水分子經生物膜的孔狀結構而透過生物膜的過程。而化合物的電離狀態(tài)既受其本身的電離常數（電離部分與未電離部分平衡時的常數）的影響，也受其所在溶液的pH影響。（3）外源化學物的電離狀態(tài)：化合物分子在水溶液中分解成為帶電荷離子的過程稱為電離。脂/水分配系數越大，越容易在脂肪中溶解，也越易透過生物膜。如氧的氣體分子由肺泡及毛細血管進入血液和CO2由血液進入肺泡細胞的過程，主要靠濃度差起作用。 簡單擴散（simple diffusion）外源化學物大部分是具有一定脂溶性的大分子有機化合物，可首先溶解于膜的脂質成分而后擴散到另一側。被動轉運 被動轉運的特點是轉運過程中生物膜不具有主動性，不消耗能量，被轉運的物質只能從高濃度流入低濃度。限速酶，場所，轉運，重要聯(lián)系點代謝物限速酶：它是指整條代謝通路中催化反應速度最慢的酶,它不但可以影響整條代謝途徑的總速度,還可以改變代謝方向. 　　在代謝過程中的一系列反應中，如果其中一個反應進行的很慢，便成為整個過程的限速步驟，催化此限速步驟的酶稱為限速酶或者標兵酶。 激活劑對反應速度的影響　　能夠促使酶促反應速度加快的物質稱為酶的激活劑。 　?、?非競爭性抑制：抑制劑既可以與游離酶結合，也可以與ES復合物結合，使酶的催化活性降低，稱為非競爭性抑制。 　?、?反競爭性抑制：抑制劑不能與游離酶結合，但可與ES復合物結合并阻止產物生成，使酶的催化活性降低，稱酶的反競爭性抑制。其特點為：；；，則抑制作用越大；但增加底物濃度可使抑制程度減小；：Km值增大，Vm值不變?？赡嬉种谱饔冒ǜ偁幮浴⒎锤偁幮院头歉偁幮砸种茙追N類型。 　?、瓶赡嬉种谱饔茫?　　抑制劑以非共價鍵與酶分子可逆性結合造成酶活性的抑制，且可采用透析等簡單方法去除抑制劑而使酶活性完全恢復的抑制作用就是可逆抑制作用。如果以ν～[E]作圖，就可得到一組斜率相同的平行線，隨抑制劑濃度的增加而平行向右移動。按照抑制劑的抑制作用，可將其分為不可逆抑制作用和可逆抑制作用兩大類。酶的最適pH不是酶的特征性常數。酶催化活性最高時溶液的pH值就稱為酶的最適pH。低溫時由于活化分子數目減少，反應速度降低，但溫度升高后，酶活性又可恢復。酶促反應速度隨溫度升高而達到一最大值時的溫度就稱為酶的最適溫度。 酶濃度對反應速度的影響　　當反應系統(tǒng)中底物的濃度足夠大時，酶促反應速度與酶濃度成正比，即ν=k[E]。 　　⑦Vmax可用于酶的轉換數的計算：當酶的總濃度和最大速度已知時，可計算出酶的轉換數，即單位時間內每個酶分子催化底物轉變?yōu)楫a物的分子數。 　?、軰m可用來判斷酶的最適底物：當酶有幾種不同的底物存在時，Km值最小者，為該酶的最適底物。 　?、跭m可用于判斷反應級數：當[S]，ν=（Vmax/Km）[S]，反應為一級反應，即反應速度與底物濃度成正比；當[S]100Km時，ν=Vmax，反應為零級反應，即反應速度與底物濃度無關；[S]100Km時，反應處于零級反應和一級反應之間，為混合級反應。 　　②當k1k+2時，Km=k1/k+1=Ks。 　?、荎m和Vmax的意義： 　?、佼敠?Vmax/2時，Km=[S]。 Menten 于1913年推導出了上述矩形雙曲線的數學表達式，即米氏方程： ν= Vmax[S]/(Km+[S])。 底物濃度對反應速度的影響　?、诺孜飳γ复俜磻娘柡同F(xiàn)象：由實驗觀察到，在酶濃度不變時，不同的底物濃度與反應速度的關系為一矩形雙曲線，即當底物濃度較低時，反應速度的增加與底物濃度的增加成正比（一級反應）；此后，隨底物濃度的增加，反應速度的增加量逐漸減少（混合級反應）；最后，當底物濃度增加到一定量時，反應速度達到一最大值，不再隨底物濃度的增加而增加（零級反應）。 　　反競爭性抑制作用（unpetitive inhibition）: 抑制劑只與酶底物復合物結合而不與游離的酶結合的一種酶促反應抑制作用。 　　非競爭性抑制作用（nonpetitive inhibition）: 抑制劑不僅與游離酶結合，也可以與酶底物復合物結合的一種酶促反應抑制作用。競爭性抑制劑通常與正常的底物或配體競爭同一個蛋白質的結合部位。米氏方程（MichaelisMentent equation）:表示一個酶促反應的起始速度（υ）與底物濃度([s])關系的速度方程：υ=υmax[s]/(Km+[s]) 米氏常數（Michaelis constant）:對于一個給定的反應，使酶促反應的起始速度（υ0）達到最大反應速度（υmax）一半時的底物濃度。 比活（specific activity）:每分鐘每毫克酶蛋白在25℃下轉化的底物的微摩爾數。酶活力，比活力，Km，(非)競爭性抑制 動力學效應酶活力單位（U, active unit）： 　　酶活力單位的量度。其共同特點是由于珠蛋白基因的缺陷使血紅蛋白中的珠蛋白肽鏈有一種或幾種合成減少或不能合成。 再生障礙性貧血　　伴有胃酸缺乏和脊髓側柱、后柱萎縮，病程緩慢；造血功能障礙引起的貧血，再生障礙性貧血(AA，簡稱再障)，是由多種原因引起的骨髓干細胞、造血微環(huán)境損傷以及免疫機制改變，導致骨髓造血功能衰竭，出現(xiàn)以全血細胞(紅細胞、粒細胞、血小板)減少為主要表現(xiàn)的疾病。不管是哪一種原因引起的，巨幼細胞的形態(tài)都是相同的。有時巨幼細胞貧血較輕，巨幼細胞的形態(tài)往往不很典型，稱為類巨幼細胞。經Wright染色后，原巨幼細胞的胞漿呈深藍色，無顆粒，核周圍有一染色較淺的圈；核圓形，染成紫色，最顯著的特點是染色質呈顆粒狀，彼此隔開，隔開處比較透亮，有時在核的周邊有彼此分開的染色質小塊，形成所謂“鐘面”的狀態(tài)；核仁較大，藍色。巨幼細胞包括原巨幼細胞、早巨幼細胞、中巨幼細胞和巨幼細胞各不同發(fā)育階段的幼稚紅細胞。身體多種組織細胞皆受DNA合成缺陷的影響，但以造血組織最嚴重，特別是紅系細胞。實際上巨幼細胞是形態(tài)上和功能上都異常的各階段幼稚紅細胞。貧血具體分類缺鐵性貧血　　缺鐵而影響血紅蛋白合成所引起的貧血 出血性貧血　　急性大量出血(如胃和十二指腸潰瘍病、食管靜脈曲張破裂或外傷等)所引起的。多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解過程中，往往產生一系列的中間產物，最終完全水解得到單糖。多糖不是一種純粹的化學物質，而是聚合程度不同的物質的混合物。多糖（polysaccharide）：是由糖苷鍵結合的糖鏈，至少要超過10個以上的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式（c6h10o5）n表示。如果能選出一個制造一種專一抗體的漿細胞進行培養(yǎng)，就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群，即單克隆。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。凝膠過濾所用的凝膠孔徑大小的選擇主要取決于要純化的蛋白質分子量。凝膠中只有很少的孔徑可接受大的蛋白。如果將這樣的凝膠裝入一個足夠長的柱子中，作成一個凝膠柱。單個凝膠珠本身象個篩子。如陰離子交換層析，含負電量小的蛋白質首先被洗脫下來。 在電場中充有兩性載體和抗對流介質，當加上電場后，由于兩性載體移動的結果，在兩極間逐步建立穩(wěn)定的pH梯度，當蛋白質分子或其他兩性分子存在于這樣的pH梯度中時，這種分子便會由于其表面電荷在此電場中運動，并最終達到一個使其表面靜電荷為0的區(qū)帶，這時的pH則是該分子的pI，聚焦在等電點的分子也會不斷擴散，一旦偏離其等電點后，由于pH環(huán)境的改變，分子又立即得到正電荷或負電荷，從而又向pI遷移。由于聚丙烯酰胺凝膠化學性質較瓊脂穩(wěn)定，很少帶有側基，在電泳過程中，吸附作用與電滲作用均小，所以該技術的分辨率均高于其它瓊脂電泳技術。它同時兼有分子篩和電泳效應。圓盤電泳即聚丙烯酰胺凝膠電泳。凝膠電泳：凝膠電泳（英語：Gel electrophoresis）或稱膠體電泳，是一大類技術，被科學工作者用于分離不同物理性質（如大小、形狀、等電點等）的分子。 意義 o 凡是帶電顆粒均可通過電泳加以分離 o 電泳技術是生化常用分析技術 分析方法原理：凝膠層析，電泳，離子交換等電泳：蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的，在電場中能向電場的正極或負極移動。 當pHpI時，氨基酸帶負電荷，在電場中向正極移動 氨基酸的等電點(isoelectric point)：氨基酸的等電點在一定 pH條件下,某種氨基酸接受或給出質子的程度相等,分子所帶　的凈電荷為零,此時溶液的pH值就稱為該氨基酸的等電點(pI) NH3+ NH3+ NH2 | +OH | +OH | HCCOOH ======== HCCOO ====== HCCOO