【正文】 色讀取吸光度?？梢苑盅b、標記、冷凍保存?zhèn)溆谩?．質(zhì)控品：中生21項質(zhì)控血清（3ml*10規(guī)格）小心開啟瓶塞（請勿丟失），用奧氏吸管準確吸取3ml蒸餾水溶解粉劑，顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡和丟失，靜置30min。2~80C保存可穩(wěn)定2周，15~250C保存穩(wěn)定2天。三．試劑、校準品及質(zhì)控品：1． 試劑：中生試劑，原裝試劑28℃保存至試劑標簽所示失效日期。樣品如不能當日完成測定，在40C保存不超過3天，200C以下可保存數(shù)周，700C保存數(shù)年。3．取血次數(shù)：應(yīng)以1周以上2月以內(nèi)的時間間隔對同一受試者取血23次。 血清甘油三酯測定一． 原理：采用中華醫(yī)學會檢驗學會推薦的方法（GPO—PAP）酶法用高效的微生物脂蛋白脂肪酶（LPL）使血清中TG水解成甘油與脂肪酸，將生成的甘油用甘油激酶（GK）及腺苷三磷酸（ATP）磷酸化，以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化3磷酸甘油（G3P），然后以PAP試劑顯色測定所生成的過氧化氫，反應(yīng)式如下： TG + 3 H2O LPL 甘油 + 3RCOOH 甘油 + ATP GK /mg2+ G3P + ADP G3P + O2 GPO 磷酸二羥丙酮 + H2O2 H2O2 + 4AAP + 4氯酚 POD 苯醌亞胺非那腙+ 2H2O+HCL 二．標本的采集方法及對病人準備的要求：1．受試者準備：取血前兩周保持平時飲食習慣；近期無急性病、外傷、手術(shù)等異常情況；取血前數(shù)天至數(shù)周停止影響血脂的藥物（如血脂調(diào)節(jié)藥物、避孕藥、某些降壓藥、激素等），否則記錄用藥情況；取血前禁食12小時、不飲酒、不做劇烈運動；除臥床患者外，取血前至少靜坐5分鐘。7．認真做好室內(nèi)質(zhì)控，適時保養(yǎng)儀器，適時校準儀器，保證儀器正常運轉(zhuǎn)。溶血可使結(jié)果增加。~%； g/L時可使反應(yīng)不顯色。4．血糖測定也受測定方法影響。3．血糖測定受飲食、取血部位影響。2．樣品采集后盡快離心分離血清或血漿。全血血糖濃度比血清或血漿低8%15%。 ：高熱、嘔吐、腹瀉所致脫水、肺炎等急性傳染病、腎臟炎癥。1. 2病理性增高：，胰島分泌不足的糖尿病； ：如嗜鉻細胞瘤、腎上腺皮質(zhì)功能亢進（庫欣綜合癥）腦垂體功能亢進（肢端肥大癥）、甲亢等。飯后1h血糖測得此值或高于此值，則可高度懷疑為糖尿病?？崭寡沁_到或超過此值，可考慮糖尿病的診斷，但應(yīng)加做糖 耐量試驗。禁食后12小時血糖測定值低于此值，則為低血糖癥，可出現(xiàn)焦慮、出汗、顫抖和虛弱等癥狀；若反應(yīng)發(fā)生較慢，且以易怒、嗜睡、頭痛為主要癥狀、則應(yīng)該做其他實驗，以查找原因。 五．操作： 標 準 質(zhì)控 測 定 空 白 標準液 10ul — — — 質(zhì)控液 — 10ul — — 血清樣品 — — 10ul — 試劑應(yīng)用液 充分混勻，370C保溫15min后，冷卻空白調(diào)零，505nm比色讀取吸光度?？梢苑盅b、標記、冷凍保存?zhèn)溆谩?．質(zhì)控品：質(zhì)控血清（3ml*10規(guī)格）小心開啟瓶塞（請勿丟失），用奧氏吸管準確吸取3ml蒸餾水溶解粉劑，顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡和丟失，靜置30min。三．試劑、校準品及質(zhì)控品1． 試劑：液體試劑，原裝試劑2~80C避光保存，如出現(xiàn)混濁或沉淀，則失效。2． 盡快分離血清。在過氧化物酶（POD）和色原性氧受體的存在下，過氧化氫分解，釋放初生態(tài)氧、氧化色素原，生成紅色化合物（Trinder反應(yīng)）。（6）抽血時，只能向外抽，不能向靜脈內(nèi)推，以免空氣進入形成氣栓，造成嚴重后果。造成溶血的原因有注射器和容器不干燥、不潔凈、止血帶固扎時間太長，淤血過久；穿刺不順損傷組織過多；抽血速度太快；（3）血液注入容器時未取下針頭或用力按出產(chǎn)生大量氣泡；抗凝血用力震蕩； （4）離心機速度過快等。如遇個別病人進針時或采血后發(fā)生眩暈，應(yīng)立即拔出針頭，讓其平臥休息片刻即可恢復(fù)。（7）采血完畢，應(yīng)再次核對病人姓名和號碼，并立即清洗器材，如屬一次性注射器或真空采血管裝置，應(yīng)將用過的器材放在固定的回收箱內(nèi)，決不能隨意丟棄，污染環(huán)境。（5）用右手食指將針頭固定，左手緩緩抽動注射器內(nèi)芯，至所需血量后解開止血帶，囑患者松拳，用無菌干棉簽壓住傷口，拔出針頭。肥胖型患者，上述伸握拳數(shù)次后還不明顯者，這時必須憑操作者的經(jīng)驗，以左手食指在采血部位觸摸，發(fā)現(xiàn)靜脈走向后，試采穿刺往往成功。（3）找好采血靜脈后，先用30g/L碘棉簽從內(nèi)向外部順時針方向消毒穿刺處皮膚，稍等片刻再用75%乙醇棉簽以同樣方式消毒并擦去碘跡，在采血部位上方扎上止血帶，囑患者握緊拳頭，使靜脈顯露。⒊ 采血步驟：（1）采血前按檢驗項目要求，準備好相應(yīng)的采血器材，如注射器、抗凝管或不同種類的真空管。 靜脈采血法⒈ 采血部位：通常采用肘部靜脈，當肘部靜脈不明顯時，可采用手背部、手腕部等部位靜脈；幼兒可采用頸外靜脈采血。（2）消化道惡性腫瘤時，糞便潛血可持續(xù)陽性；潰瘍病時顯間斷陽性。 臨床意義：糞便潛血試驗對慢性消化道出血的診斷及消化道惡性腫瘤的篩 選均有重要價值，屬非損傷性檢查。（6）一般需連查三次以獲得準確結(jié)果。（4）分析結(jié)果時注意：※家族性腸道息肉或直腸癌部分可能不出血或間斷出血，少量血在糞便中分布不均，都可造成假陰性結(jié) 果。 （3）出現(xiàn)柏油便時，如充分稀釋后仍為陰性，可能是由于HB在消化道內(nèi)存留時間太長，其免疫原性被破壞二失去與抗體結(jié)合的能力，而呈陰性反應(yīng)。注意事項：（1）肉眼血便時，最好在顯微鏡下辨認RBC，因本試紙抗體僅特異性針對人HB，當大量出血時，RBC來不及被破壞，便隱血可能出現(xiàn)陰性結(jié)果。3．操作方法：采便：用采便棒采集糞便標本的多個部位后放回采便容器內(nèi)，將蓋擰緊，搖動采便器使形成均勻混懸狀便樣；折斷采便器尖端待用；條型試紙：將適量混懸液滴到小試管內(nèi)，將試紙條箭頭端插入小試管內(nèi)，液面不得超過MAX線；5分鐘內(nèi)判讀結(jié)果。 1．原理：采用單克隆和多克隆抗體，特異性地針對糞便樣品中的人Hb，在不到5分鐘的時間里，高濃度的Hb可在1分鐘內(nèi)檢出。糞便潛血試驗常用的一類化學方法是利用血液中的主要成分血紅蛋白中的亞鐵血紅素，具有類似過氧化物酶的作用催化過氧化氫，分解釋放新生態(tài)氧，氧化色原物質(zhì)而呈色，呈色的深淺反映HB的多少，亦即出血量的大小。細胞以高倍鏡（10*4，）檢查10個視野，求均值報告：/高倍視野。寄生蟲卵分別計數(shù)10個低倍鏡視野中的蟲卵數(shù)，求均值報告/低倍鏡視野。細菌：占糞便凈重的1/3，正常菌群主要是大腸桿菌和腸球菌占80%，而過路菌不超過10%，芽孢菌和酵母菌為常住菌，但總量不超過10%，正常菌群消失或比例失調(diào)可因大量應(yīng)用抗生素所致。細胞中應(yīng)注意紅細胞、白細胞、嗜酸性粒細胞、腸黏膜上皮細胞、巨噬細胞、腫瘤細胞等。應(yīng)注意將植物纖維及其細胞與寄生蟲、人體細胞相鑒別，并應(yīng)該注意有無肌纖維、結(jié)締組織、彈力纖維、淀粉顆粒、脂肪小滴球等。最好取載玻片，制成涂片后，應(yīng)覆于蓋片，涂片的厚度以能透過印刷物字跡為準。1. 涂片鏡檢：一般采用生理鹽水涂片法。應(yīng)用排石藥或碎石術(shù)后多見膽石。服驅(qū)蟲劑后排便時應(yīng)檢查有無蟲體；驅(qū)帶絳蟲后應(yīng)仔細尋找頭節(jié)。（12）乳凝塊：嬰兒糞便中見有黃白色乳凝塊，也可見蛋花樣便，提示脂肪或蛋白消化不完全消化不良、嬰幼兒腹瀉。（10）干結(jié)便：習慣性便秘。（8）米泔水樣便：霍亂及副霍亂。（7）稀糊（汁）狀便：腸蠕動亢進或分泌增多所致。(5)鮮血便：直腸息肉、結(jié)腸癌、痔瘡、肛裂等。(4)血性及膿血便：見于腸道下段有病變：痢疾、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸或直腸癌。（2）溏便：便呈粥狀且內(nèi)容粗糙，見于消化不良、慢性胃炎、胃竇潴留。性狀：正常時為成形軟便。顏色：可根據(jù)觀察所見報告，如：黃色、褐色、土色、灰白、綠色、紅 色、柏油樣等。所用載玻片需用1%。糞便檢驗的標本通常采取自然排出的糞便，但在無糞便排出而又必須檢查時，可經(jīng)肛門指診或采便管拭取標本；而灌腸后的糞便常因過度稀釋及混有油滴而影響檢驗結(jié)果。檢驗阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查，冬季尚需要采取保溫（25度）措施。糞便標本中不得混入尿液、消毒劑及污水，因此不應(yīng)采取尿壺或便盆中的糞便。糞便標本應(yīng)收集于清潔、干燥、內(nèi)層涂臘的有蓋硬紙盒內(nèi)送檢，便于檢驗后焚燒消毒。若孵化血吸蟲毛蚴，應(yīng)留取全部新鮮糞便，不得少于30 g。糞 便 檢 查一、標本采集方法及注意事項： 標本采集的方法，因檢驗?zāi)康牟煌胁顒e。4． 若無控制線出現(xiàn)或控制線與測定線均不呈現(xiàn)紫紅色，表示試劑失效。2． 標本應(yīng)及時送檢，否則應(yīng)貯于2~8度，不超過48h。 7．其它：更年期、排卵期、雙側(cè)卵巢切除術(shù)均可致黃體生成素（LH）升高；內(nèi)分泌疾病如腦垂體疾病、甲亢，婦科疾病如卵巢囊腫、子宮癌等HCG也可增高。妊娠試驗陽性，首先應(yīng)想到正常妊娠，除了少數(shù)出現(xiàn)假陽性反應(yīng)外，大約95%~100% 孕婦均可被檢出來。 滋養(yǎng)層細胞腫瘤：惡性葡萄胎、絨毛膜癌（80%左右可引起陽性反應(yīng)）以及男性睪丸畸胎瘤等腫瘤時，尿中HCG升高。 宮外孕的診斷，60%宮外孕患者HCG呈陽性反應(yīng)。 先兆流產(chǎn)：HCG含量如逐漸上升可能保住胎兒，不斷下降應(yīng)盡及早處理，以免造成過期流產(chǎn)。三． 參考范圍：正常非妊娠女性：陰性；正常妊娠女性：陽性四． 臨床意義： 早期妊娠診斷：一般孕后7~10天尿HCG即可陽性，35~40天為2500IU/L以上，60~70天出現(xiàn)高峰，可達8萬~32萬IU/L。判斷結(jié)果時，含HCG的尿液試帶上可顯示上、下兩條紫紅色線條，而陰性標本則只顯示出上邊一條紫紅色線。試帶條中含均勻分布的膠體金標記的鼠抗人βHCG單克隆抗體和無關(guān)的金標記鼠IgG。假陰性：大量VitC競爭性的奪取試帶中過氧化物的氧，導致假陰性。尿含有易熱酶、肌紅蛋白或菌尿（細菌產(chǎn)生過氧化物酶）。試帶浸濕后甩動：潛血升高。影響因素：新鮮尿標本，放置時間越長，潛血減低。參考值：一般為陰性。（九）尿血紅蛋白（潛血）尿紅細胞檢查原理：干化學法膜塊中主要含有氧化氫菌香素或過氧化氫烯枯及色素（鄰甲聯(lián)苯胺）兩種物質(zhì)。假陰性：（1）尿蛋白大于5g/L。假陽性：（1）尿液中污染甲醛；（2）含有高濃度的膽紅素；（3）某些物質(zhì)：呋喃坦啶。影響因素：新鮮尿液標本立即測定，以免白細胞受破壞，導致干化學法與鏡檢法人為的實驗誤差。腎結(jié)核、腫瘤亦增多腎移植后有排斥反應(yīng)者，尿中大量出現(xiàn)淋巴細胞及單核細胞。參考值：一般為陰性。（八）尿白細胞檢查原理：基于粒細胞胞質(zhì)內(nèi)含有特異性酯酶，可作用于膜塊中的吲哚酚酯形成吲哚酚釋放。泌尿道止痛藥（苯偶氮吡胺）及空氣中的亞硝酸氣體造成假陽性。尿液應(yīng)在膀胱停留間隔4h以上，使細菌有充分的作用時間，故以清晨第一次尿液為宜?？勺鳛槟蚵犯腥镜倪^篩試驗。參考值：一般為陰性。符合上述三個條件，此實驗的檢出率為80%，反之成陰性結(jié)果。大多數(shù)尿路感染是由大腸埃希菌引起的，正常人尿液中含有來自食物或蛋白質(zhì)正常代謝產(chǎn)物的硝酸鹽，當尿液中有大腸埃希菌增殖時，可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，其可將膜塊中對氨基苯砷酸重氮化而成重氮鹽，后者與1，2，3，4四氫并喹啉3酚偶聯(lián)，使膜塊產(chǎn)生紅色，借此診斷患者是否被大腸埃希菌感染。故學者提倡：預(yù)先給患者提前服用碳酸氫鈉堿化尿液，收集午后24h尿進行測定，以提高檢出率。正常人尿膽原排出量每天波動很大，夜間和上午量少，午后升高，在午后24h達到高峰。氯丙嗪治療或尿內(nèi)含鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物，造成假陰性。（2）尿膽原：尿內(nèi)源物質(zhì)如膽色素原、吲哚、膽紅素、吩噻嗪類藥物造成尿膽原假陽性。試帶浸濕后甩動尿膽原升高。影響因素：新鮮尿標本放置時間長：膽紅素在陽光照射下成為膽綠素，膽紅素降低；尿膽原氧化成尿膽素使尿膽原降低。尿膽原陽性：常見于溶血型疾患及肝實質(zhì)病變，如肝炎時。尿膽原原理：與改良Ehrlich法相同，尿膽原在酸性溶液中與對二甲氨基甲醛作用生成櫻紅色。 因此，應(yīng)根據(jù)病程發(fā)展，協(xié)助臨床醫(yī)生共同分析實驗結(jié)果。在糖尿病酮癥酸中毒早期病例中：主要是β羥丁酸、乙酰乙酸很少或缺乏；此時測量可導致對總酮體量估計不足。 （1）易揮發(fā)：乙酰乙酸、丙酮都是揮發(fā)性物質(zhì)； （2）易分解：乙酰乙酸受熱易分解成丙酮； （