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檢驗項目操作規(guī)程-在線瀏覽

2024-08-24 00:19本頁面
  

【正文】 消除此影響。低色素貧血或紅細胞內(nèi)含有大量HbS或HbCO,某些新生兒或某些肝病患者,紅細胞膜質類異常,都具有抵抗溶血劑作用,導致紅細胞溶血不完全。各種病因引起的血栓前狀態(tài)使血小板易于聚集。1大量巨大血小板或小紅細胞的存在,影響血小板和紅細胞的檢查。所謂正定型,是用已知抗A和抗B分型血清來測定紅細胞上有無相應的A抗原/和B抗原;所謂反定型,是用已知A細胞和B細胞來測定血清中有無相應的抗A/和抗B。 受檢者5%紅細胞鹽水懸液。(2) 結果觀察:將玻片不斷輕輕搖動,使血清與細胞充分混勻,連續(xù)15分鐘,以肉眼觀察有無凝集(溶血)反應,如以玻片做實驗時,也可用低倍鏡觀察結果。 試劑紅細胞以3個健康者同型新鮮紅細胞混合,用生理鹽水洗滌一次,以除去存在血清中的抗體,及可溶性抗原。 操作方法應按規(guī)定,一般應先加血清,然后再加紅細胞懸液,以便容易核實是否滴加血清。 觀察時應注意紅細胞呈特異性凝集,繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)別。尿 液 常 規(guī) 測 定一、標本收集與保存:門診病人尿常規(guī)檢驗,可留取任意時間的一次性尿于清潔、干燥的一次性尿杯內(nèi),立即送檢;臨床疑似腎臟病的患者,取清晨第一次尿為佳 ;特殊檢驗應按實驗要求留取標本:尿糖檢驗,留空腹尿;細胞、管型計數(shù)留3h尿或24h尿;標本的保存:收到標本應在30min內(nèi)檢查完,否則應妥善保存:如冷藏、加防腐劑等。檢測原理、臨床意義:(一)尿PH值檢查:原理:采用酸堿指示劑法,其膜塊區(qū)含有甲基紅及溴麝香草酚蘭。強酸尿:代酸中毒、中風、糖尿病、腎結石、Ⅳ型腎小管酸中毒、白血病、壞血病。尿PH值檢測監(jiān)測腎結石和泌尿系病人的尿液酸堿變化情況,指導臨床用藥。而某些患者須保持PH值酸性,因堿性尿會促進某些微生物的生長發(fā)育和磷酸鈣結石的形成。監(jiān)控尿PH值變化對其他膜塊區(qū)反應的干擾作用:如尿蛋白、比重受PH值影響大。(2)嚴格按規(guī)定時間浸泡試帶,浸尿時間過長,尿PH值呈減低趨勢。(二)尿比重(SG) 尿比重是指尿液與純水的重量之比,主要測定尿內(nèi)固體物質(主要是尿素、氯化鈉)濃度。(參考方法;折射儀法)原理:其膜塊區(qū)主要含有多聚電解質(甲乙烯醛馬來酐)、酸堿指示劑(溴麝香草酚蘭)、緩沖液。進而換算成尿液的比重值。尿比重升高:表示尿液濃縮,見于急性腎炎、蛋白尿、糖尿、高熱、大量出汗、腹水、心功能不全。(3),呈等張尿,表示腎實質有嚴重的損害。影響因素:(1)新鮮尿標本,不能含有強堿、強酸等物質;強堿性尿PH>;(2)試紙法只與離子濃度有關不受非離子化學物質影響;(3)尿中蛋白升高時,尿比重增強明顯;(4)不宜用于新生兒尿比重檢查。(三)尿蛋白檢查: 各種指示劑都有一定的PH值變色范圍,在一定的PH值緩沖液中顏色比較恒定,當溶液中有蛋白質時,由于蛋白質離子對指示劑離子相反電荷的吸引而生成復合物,引起指示劑的進一步電離,超越了緩沖作用,指示劑發(fā)生顏色改變,溶液中蛋白質濃度越大,變色程度也越大,這是指示劑的蛋白質誤差。指示劑蛋白誤差原理:其膜塊中主要含有酸堿指示劑()、枸櫞酸緩沖系統(tǒng)、表面活性劑。參考值:陰性;30~130mg/日;當尿蛋白>100mg/L或>150mg/24h時尿蛋白定性陽性。由劇烈運動、長時間直立、高溫、受寒等因素形成腎血管痙攣或充血,形成腎小球滲透性增強。見于:各類腎病、腎毒性物質引起的腎損害、妊高癥、SLE的腎損害、免疫性蛋白尿。變質尿液產(chǎn)生的PH值變化影響實驗結果(假陽性)。(3) 尿液存放時間過久而致細菌生長繁殖;試帶甩動(浸濕后甩動):因反應時間延長,試帶色素相互滲透而致蛋白質升高。(5) 引起假陰性藥物:青霉素族有明顯的干擾作用,干化學法假陰性,磺基水楊酸法假陽性。(7) 不同測定方法對尿內(nèi)不同蛋白質檢測的敏感性不同。而干化學法對球蛋白較敏感,對球蛋白的敏感性僅是蛋白質的1%2%,因此對于腎病患者特別是在疾病發(fā)展過程中需要觀察尿蛋白含量的病例、最好使用磺基水楊酸法和雙縮脲法進行定性和定量實驗。過氧化氫再由過氧化物酶催化釋放[O],使色原呈現(xiàn)不同的顏色變化。臨床意義:尿糖陽性:見于糖尿病、腎性糖尿病、甲亢、口服及注射大量葡萄糖及應激反應時。(五)尿酮體檢測:原理:其膜塊中主要含有亞硝基鐵氰化鈉,可與尿中乙酰乙酸、丙酮產(chǎn)生紫色反應,其對乙酰乙酸的敏感性50100mg/L,對丙酮僅為400700mg/L,不與B羥丁酸起反應。影響因素:新鮮尿標本及時送檢,避免出現(xiàn)假陰性或結果偏低。注意不同病程,酮體成分的變化會給檢測結果帶來差異;不同病因引起的酮癥,酮體的成分可不同,即使同一病人不同病程也可有差異。在糖尿病酮癥酸中毒癥狀緩解之后:乙酰乙酸含量反而比初始急性期高。(六)尿膽紅素、尿膽原檢測膽紅素原理:直接膽紅素在強酸介質中與2,4二氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)反應呈紫紅色偶氮化合物。參考值:尿膽紅素:陰性 尿膽原:定性正常人為弱陽性反應,~臨床意義: 尿膽紅素陽性:常見于阻塞性或肝細胞性黃疸,病毒性和中毒性肝炎。 陰性:常見于完全阻塞性黃疸檢查。試帶浸尿時間延長時膽紅素升高。假陽性干擾:(1)膽紅素:某些藥物如牛黃、熊膽粉造成膽紅素假陽性。假陰性干擾:(1)膽紅素陰性:尿內(nèi)高濃度的VitC、亞硝酸鹽造成抑制偶氮反應,造成假陰性。(2)抗菌素抑制腸道菌群導致尿膽原降低。同時,尿膽原的清除率與尿PH相關,; 。(七)尿亞硝酸鹽檢查原理:尿亞硝酸鹽檢查:膜塊中主要含有對氨基苯砷酸、1,2,3,4四氫并喹啉3酚物質。尿液中亞硝酸鹽檢出率:受以下三方面的影響: a. 感染細菌是否含有硝酸鹽還原酶; b 食物中是否含有適量的硝酸鹽; c 尿液標本是否在膀胱停留間隔4h以上。因此本實驗陰性并不能排除菌尿的可能,陽性也不能完全肯定泌尿系感染。臨床意義:常用于大腸埃希菌引起的泌尿系感染。影響因素:標本放置時間過長或污染亞硝酸鹽轉為陽性。間隔時間過短易造成假陰性。假陰性:使用大量抗壞血酸時;使用抗生素細菌被抑制時;使用利尿劑時。并與重氮鹽反應形成紫色縮合物,其顏色的深淺與細胞的多少呈比例關系。臨床意義:泌尿系統(tǒng)及鄰近器官有感染性病變。成年婦女生殖系統(tǒng)有炎癥時,可見成團的膿細胞并伴有大量扁平細胞。此法只能測中性粒細胞,不與淋巴細胞反應,在腎移植術后排斥反應時,尿中以淋巴細胞為主;或其他病因引起的淋巴細胞尿時,會產(chǎn)生假陰性結果。(4)尿液再膀胱儲存時間過長或標本放置時間延長,導致白細胞破壞,酯酶釋放到尿中,造成干化學法陽性、鏡檢陰性的所謂“假陽性”現(xiàn)象。(2)尿中含大劑量頭孢氨卞或慶大霉素等負干擾。其原理是尿中紅細胞內(nèi)的Hb或其被破壞釋放的Hb均含有亞鐵血紅素,它具有過氧化物酶活性,在過氧化氫菌香素或過氧化氫烯枯存在條件下,催化鄰甲聯(lián)苯胺脫氫而呈色。臨床意義:Hb、對完整紅細胞敏感度510 個/ul。試帶浸尿時間延長,潛血升高。 假陽性:某些氧化性藥物:漂白粉及磺胺類、非那酊、喹啉、砷中毒。腎病患者的紅細胞在腎臟或泌尿道破壞、或尿比重過低、尿PH偏高,均易造成紅細胞破壞,血紅蛋白釋出,出現(xiàn)所謂紅細胞干化學檢查的“假陽性”現(xiàn)象。 尿HCG檢查(膠體金法)一. 原理:免疫膠體金法是將羊抗人HCG抗血清(多抗)、羊抗鼠IgG分別固定在特制的纖維素試帶上并呈兩條線上下排列,羊抗鼠IgG線在試帶上方為陰性對照,羊抗人HCG多抗在下方為測定。檢測時將試帶浸入被檢尿液中(液面低于固定的兩條抗體線)后迅速取出,尿液沿試帶上行,尿中的βHCG在上行過程中與膠體金標記單克隆抗體結合,待行至羊抗人HCG抗體線時,形成金標記的βHCG單抗尿HCG羊抗人HCG復合物而在試帶上顯紫紅色區(qū)帶,為HCG陽性反應,試帶上無關的金標記鼠IgG隨尿繼續(xù)上行至羊抗鼠IgG處時與之形成紫紅色的金標記抗原抗體復合物是為陰性對照。二. 操作:1. 收集尿液:取任何時間尿標本留于潔凈、干燥的尿杯中及時送檢,取晨尿標本更佳;2. 取出試紙將標有MAX線的一端向下浸入尿液,液面不得超過MAX線,待顯示尿液向上爬行時將試紙條取出平放,5min內(nèi)讀取結果。常用的HCG檢驗法均能呈陽性反應,早早孕檢測在受精卵著床后5~7天既能測出HCG。 人工流產(chǎn)后無胎盤組織殘留者,即轉為陰性反應;如仍有活動的胎盤組織殘留者仍為陽性,應考慮為不完全流產(chǎn)。50%宮外孕在陰道開始流血3周后,反應轉為陰性。 尿液HCG檢測是早期診斷妊娠及相關疾病最簡便而重要的方法。如有可疑,可配合血清HCG檢測,兩者有很好的相關性。近年發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤如畸胎瘤、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、肺癌等,血HCG也可升高五、注意事項:1. 宜用清晨第一次新鮮尿液,必要時離心取上清液測定。3. 浸入尿液時液面不得超過MAX線;5min后讀取結果無效。 5.注意假陽性因素的影響。一般檢驗應留取新鮮糞便約5g左右(指頭大?。┗蛳”?ml,以防止糞質迅速干燥。糞便標本應選擇膿血黏液等病理成分,若無病理成分,則可多部分取材。細菌學檢驗的糞便標本應收集于滅菌封口的容器內(nèi),勿混入消毒劑及化學藥品。糞便標本應在采取后1小時內(nèi)進行檢查,否則可因PH及消化酶等的影響,導致其有形成分分解破壞。做化學法潛血試驗時,應于試驗前3天禁食肉類及動物血食物,同時禁服鐵劑及Vc 。二、檢驗后的處理:如盛器為紙類物質,檢驗完畢后應用火燒毀。三、一般性狀檢查:包括顏色、性狀、寄生蟲、結石等。正常糞便因糞膽素而顯棕黃色,但可因食物、藥物或病理原因影響而改變糞便顏色:灰白色見于鋇餐后、服矽酸鋁、阻塞性黃疸、膽汁減少或缺乏;綠色見于食用含葉綠素的蔬菜后及含膽綠素時;紅色見于下消化道出血、食用西紅柿、西瓜等;柏油樣便見于上消化道出血等或服用鐵劑、活性炭等藥物或食用動物血及肝臟;醬色常見于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等;米泔水樣見于霍亂;淡黃色見于乳兒便或服用大黃或山道年后,在病理情況下,則因膽紅素未氧化所致。(1)粘液便:小腸有炎癥,見于各種腸炎、痢疾。(3)胨狀便:腸易激質綜合癥。阿米巴痢疾:以血為主,血中帶膿,呈暗紅色稀果醬樣;菌?。阂哉骋杭澳摓橹?,膿中帶血。(6)柏油樣便:腸道上段病變:上消化道出血。常見于急性胃腸炎。(9)白陶土樣便:阻塞性黃疸。(11)細條狀便:提示直腸狹窄、直腸癌。寄生蟲:蛔蟲、蟯蟲、絳蟲節(jié)片等較大蟲體,肉眼即可分辨;鉤蟲蟲體常需將糞便沖洗過篩后方可看到。結石:糞便中可見到膽石、胰石、糞石。四.顯微鏡檢查:主要檢出:細胞、寄生蟲卵、真菌、細菌、原蟲等。潔凈玻片上加等滲鹽水1—2滴,選擇糞便的不正常部位,或挑取不同部位的糞便,做直接涂片檢查。先用低倍鏡觀察全片有無蟲卵、原蟲、包囊、寄生蟲幼蟲、血細胞,再用高倍鏡詳細檢查病理成分的形態(tài)結構。若大量出現(xiàn)則提示消化不良,或胰腺外分泌功能不全。夏科—雷登結晶:為無色或淺黃色兩端尖而透明具有折光性的菱形晶體,大小不一,常見于腸道潰瘍,尤以阿米巴感染糞便中最易檢出,過敏性腹瀉及鉤蟲病患者糞便亦常可見到。2.鏡檢規(guī)則及報告方式:先用低倍鏡(10*10,)檢視全片。原蟲檢查的標本必須在低倍鏡檢查的基礎上,再換高倍鏡檢查,詳細觀察原蟲的結構特征,確定后再報告。表1 :糞便涂片鏡檢時細胞成分的報告方式細胞數(shù)/10個高倍視野(HPF) 報告方式(細胞數(shù)/HPF)10個高倍視野中:只見到一個 偶見 有時不見,最多見到2~3/每HPF 0~3最少5個,多則10個/每HPF 5~10 均在10個以上/每HPF 多數(shù)均勻分布滿視野,難以計數(shù) 滿視野五.化學檢查—糞便潛血試驗上消化道有少量出血時,紅細胞被消化而分解破壞,由于顯微鏡下不能發(fā)現(xiàn),故稱潛血。(一)金標法:特異性強、靈敏度度高、檢測限寬。2.試劑:便潛血一步法試紙(條型或板型),室溫保存。4.結果判讀:陽性:控制線與反應線同時出現(xiàn)色帶,表明樣品中有隱性出血;陰性:只有控制線出現(xiàn)色帶,反應線未出現(xiàn)色帶,表明樣品中無隱性出血;無效:控制線無色帶出現(xiàn),表明試驗無效,應重新測試。(2)出現(xiàn)柏油便時,HB濃度超出檢測范圍會出現(xiàn)假陰性結果,解決辦法是;充分稀釋便樣然后測試。此時可在排除飲食等其他因素后用化學法加以確認。(5)正常人便隱血陽性,可能是由于某些藥物(如阿司匹林)刺激胃腸道造成隱血。(7)本實驗只能作為篩選或輔助診斷用,不能代替其他檢查。
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