【正文】 小。在低于糊化溫度的的熱水中，天然淀粉發(fā)生溶脹，直鏈淀粉分子從淀粉粒向水中擴散，形成膠體溶液，當形成的膠體溶液冷卻后，直鏈淀粉即沉淀析出，不能再分散于熱水中[27]。表3 雙重回生處理錐栗淀粉的平均聚合度第一次回生時間(h)第二次回生時間(h)243648243648 溶解度和膨脹因數(shù)的測定直鏈淀粉可溶解于熱水，在熱水中溶脹破裂形成膠體溶液，而支鏈淀粉不溶于熱水，只能在熱水中溶脹糊化。表3是經(jīng)雙重回生處理錐栗淀粉樣品的平均聚合度，而處理過程取樣的λmax有所升高，都在543~。聚合度指聚合物分子鏈中連續(xù)出現(xiàn)的重復(fù)單元(或稱鏈節(jié))的次數(shù)。177。48177。177。177。表2 雙重回生處理錐栗淀粉樣品的瀝濾率(%)第一次回生時間(h)第二次回生時間(h)24364824177。而在同一溫度下（本實驗在80℃下），溫度循環(huán)回生處理錐栗淀粉樣品的瀝濾率如表4所示。瀝濾率表示每100 g干淀粉浸出的直鏈淀粉的百分比。177。48177。177。 177。表1 雙重回生處理錐栗淀粉樣品的直鏈淀粉含量(%)第一次回生時間（h）第二次回生時間(h)24364824177。對表1中數(shù)據(jù)進行單因素方差分析可知，兩次回生時間對表觀直鏈淀粉含量的影響不顯著（P＞）。) % ~ (177。 ⑩3 結(jié)果與討論 雙重回生處理錐栗淀粉的表觀直鏈淀粉含量雙重回生處理錐栗淀粉樣品中的表觀直鏈淀粉含量見表1。以Vc作陽性對照。抑制率按公式⑨進行計算： ⑨ 亞硝酸鹽清除率的測定參考趙二勞[24]等的方法，取5 mg/ mL于25 mL比色管中，加入不同濃度的雙重回生處理錐栗淀粉樣品溶液，常溫放置30 min后，% mL，搖勻靜置5 min，% mL，用蒸餾水稀釋至刻度，放置15 min后，以蒸餾水調(diào)零，測定其在540 nm波長下的吸光度值A(chǔ)i，平行做三次。37℃水浴避光反應(yīng)1 h，再加入2 mL TCATBAHCl混合液，95℃水浴15 min，迅速冷卻，以4000 r/min離心10 min，以蒸餾水調(diào)零，取上清液在535 nm測吸光度值A(chǔ)i；以等量蒸餾水代替樣品液，同樣方法測得吸光度Ao。配制濃度分別10 mg/mL的雙重回生錐栗淀粉溶液。清除率按公式⑧進行計算。加入1滴濃鹽酸終止反應(yīng)，于420 nm波長下測定吸光值A(chǔ)i；以蒸餾水代替鄰苯三酚，同樣方法測定吸光值A(chǔ)j；以蒸餾水代替樣品液，同樣方法吸光值A(chǔ)o。 ⑦ 超氧陰離子自由基清除能的測定參照李燕凌等[22]的方法。以Vc作陽性對照。測定液，準確振蕩30 s后，以蒸餾水調(diào)零，測定734 nm波長處的吸光度Ai；以等量蒸餾水代替ABTS+配制濃度分別10 mg/mL的雙重回生處理錐栗淀粉樣品溶液。 ⑥ ABTS+DPPH自由基清除率按公式⑥計算。然后， mL混合液在517 nm處吸光度Aj； mL混合液在517 nm處吸收度Ac。 DPPH自由基清除率的測定參考Thaipong等[20]的方法，并作適當修改。以蒸餾水調(diào)零，測定其在695 nm波長下測吸光度。配制濃度分別10 mg/mL的雙重回生錐栗淀粉淀粉溶液。上清液中的還原糖含量采用葡萄糖氧化酶/過氧化物酶（GOPOD）分析試劑（Wicklow公司，愛爾蘭），用SBA40C生物傳感分析儀測定。3份200 μL混合酶液與100 μL淀粉乳液的混合液配制后，立即置于37 ℃往復(fù)式振蕩水?。?70次/min）中依次反應(yīng)0、20和120 min，加入96%的乙醇溶液900 μL鈍化酶活性并使之沉淀。將8 g豬胰α淀粉酶（3000U/g，上海希美生物科技有限公司）溶于10 mL上述緩沖液中，于37 ℃孵育10 min，1500g離心得到的上清液即為α淀粉酶溶液。 ② RDS、SDS與RS含量的測定參照Miao[1718]等的方法，略做改動。將上清液烘干直到恒重，稱得培養(yǎng)皿上淀粉重M2。根據(jù)Banks[15]公式①： ① 溶解度和膨脹因數(shù)的測定參照Koo SH[16]等的研究方法，準確稱取M0= g淀粉樣品，加入到30 mL的蒸餾水中，在85℃下磁力攪拌器中充分攪拌30 min，再在2026 r/min下離心15 min。用紫外分光光度計掃描，波長450～800 nm。加入10 mL去離子水， mol/～，加水定容至50 mL。（瀝濾率表示每100 g干淀粉浸出的直鏈淀粉的百分比）。冷卻至室溫，2000 r/min下離心10 min。 瀝濾率的測定參考Chung HJ[13] 測瀝濾率的方法。在620 nm下，測吸光度。⑵ 樣品測定：準確稱取樣品100 mg，加1 mL無水乙醇，潤濕振蕩，再加10 mL M NaOH，沸水浴加熱溶解10 min，冷卻后用蒸餾水定容搖勻得樣品液。 mL I2KI（碘試劑），定容搖勻，靜置10 min，在620 nm下，測吸光度（以蒸餾水作參比溶液）繪制標準曲線。精確吸取標準溶液于50 mL容量瓶中，配置一系列梯度標準溶液。 直鏈淀粉含量的測定采用碘比色法[12] 測定錐栗淀粉的直鏈淀粉含量：⑴ 標準曲線的繪制：取50 mg支鏈淀粉標準樣品，加入50 mL容量瓶中，加入1 mL無水乙醇潤濕，再加10 mL mol/L NaOH，沸水浴振蕩加熱10 min溶解淀粉，用蒸餾水定容搖勻。⑵ 實驗儀器：WFZUV2100型紫外可見分光光度計（尤尼柯上海儀器有限公司）、SBA40C型生物傳感分析儀（山東省科學(xué)院生物研究所）、GL3250B型恒溫磁力加熱攪拌器（蘇州江東精密儀器有限公司）、TDZ5WS型自動平衡離心機（賽特湘儀離心機儀器有限公司）、V1100D型可見分光光度計（上海美譜達儀器有限公司）、XOSHZ?A水浴恒溫振蕩器（南京先歐儀器制造有限公司）、SPX250BZ型生化培養(yǎng)箱（上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）、DZKW4電子恒溫水浴鍋（北京中興偉業(yè)儀器有限公司）、DHG9240A電熱恒溫鼓風干燥箱（上?；|試驗儀器設(shè)備有限公司）、FE20實驗室pH計（梅特勒托利多儀器（上海）有限公司）。2 材料與方法 原料制備錐栗淀粉：市場購買錐栗，實驗室自制錐栗淀粉 實驗試劑和儀器⑴ 酶制劑：豬胰α淀粉酶（3000 U/g，上海希美生物科技有限公司）、淀粉葡萄糖酶（105789 U/g，上海金穗生物科技有限公司）。⑷ 雙重回生處理錐栗淀粉的體外抗氧性能：評價天然物的體處抗氧化活性的方法多種多樣，主要有清除自由基型、還原金屬離子、抑制脂質(zhì)過氧化等化學(xué)評價方法，以及體外抗氧化活性細胞的生物學(xué)方法。⑵ 雙重回生處理錐栗淀粉理化性質(zhì)的研究：通過對樣品溶解度和膨脹因數(shù)、平均聚合度、直鏈淀粉含量和瀝濾率的測定，分析其基本理化性質(zhì)。通過本課題研究，可以探討錐栗淀粉在雙重回生處理后理化特性和體外抗氧化性，為錐栗淀粉的深加工和錐栗淀粉的食品工業(yè)應(yīng)用提供重要的理論依據(jù)。 本課題的主要目的及需解決的問題本課題以錐栗淀粉為原料，通過雙重回生的方法處理錐栗淀粉，分析檢測用該方法處理的錐栗淀粉的理化特性，并且在體外消化條件下，測定雙重回生處理錐栗淀粉樣品中快速消化淀粉（RDS）、緩慢消化淀粉（SDS）和抗性淀粉（RS）的含量。對SDS的將來的研究需要把中心集中在新穎的SDS制造技術(shù)、發(fā)展評價不同SDS原料品質(zhì)的體內(nèi)方法，并深入理解SDS的生理作用。淀粉作為僅次于纖維素的可再生資源，具有價廉易得、可降解和良好的生物相容性等功能特性，是食品工業(yè)的主要原料，于是對淀粉的研究便成為了一大熱點。當代社會，糖代謝不正常人群所占比例越來越高，因此，開發(fā)低血糖指數(shù)的食品將有利于高胰島素人群、糖過敏患者和糖尿病人等使用。臨床證明，這類改性淀粉可以有效改善糖負荷，將成為一類新型的功能性食品。淀粉的消化與人體的許多疾病密切相關(guān)，對于糖尿病和心血管疾病患者而言，食用低血糖指數(shù)的食物對其疾病具有一定的療效，而人體對食物的血糖反應(yīng)很大程度取決于食物的消化速度，抗性淀粉和緩慢消化淀粉含量高的食物血糖指數(shù)低。與生糖指數(shù)的分類相似，淀粉已經(jīng)根據(jù)Englyst[12] 體外消化法分為快速消化淀粉(RDS)，慢消化淀粉(SDS)和抗性淀粉(RS)。 physicochemical properties。 The average polymerization, solubility and swelling factor of all samples have greatly increase. Impacts of two retrogradation time on amylose content, amylose leaching and swelling factor were not significant, while their average polymerization have more significant increase, the solubility have more significant decrease.⑵ The contents of ready digestible starch(RDS), slowly digestible starch(SDS), resistant starch(RS) of all samples were measured. It was found the slowly digestible starch(SDS) contents of all samples can be improve by dualretrogradation treatment. ⑶ By determination of total antioxidant