【正文】 77。 177。 177。 177。 水提物（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 乙酸乙酯（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 正丁醇提（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 醇溶液（普） 177。 177。 177。 177。 177。 乙醇浸提（普） 177。 177。 177。 177。 177。 醇沉（普） 177。 177。 177。 表 10 不同 溶劑提取物不同濃度對 DPPH 自由基清除率的影響 Table 10 Effects of different solvents extracts of different concentrations on the effect of scavenging DPPH Radical 樣品 不同濃度下的提取物對 [DPPH﹒ ]自由基的清除率（％） （平均值ⅹ177。 圖 3 曬青毛茶乙酸乙酯 提取物中單體兒茶素 HPLC圖 Extrace of sundried green tea by ethylacetate of monomer catechin HPLC 表 9曬青毛茶乙酸乙酯提取物中兒茶素單體含量分析 Table 9 Content of monomer catechin of Extraces of sundried green tea by ethylacetate 單位： g/100g 樣品 沒食子酸 兒茶素 EGC EGCG EC ECG 曬青毛茶乙酸乙酯提取物 從表 9中可以看出： 曬青毛茶的乙酸乙酯 提取物中 ECG（沒食子酰表兒茶素）和 EGCG 18 （沒食子酰表沒食子兒茶素）含量較高，沒食子酸含量相對較低，可見這部分提取物中兒茶素單體含量高。 曬青毛茶乙酸乙酯提取物兒茶素單體含量的分析 根據(jù)上述各樣品對羥基自由基的抑制效果的分析，可看出曬青毛茶的乙酸乙酯提取物具有較強的抑制能力。 ％，等量的普洱茶的乙酸乙酯提取物的抑制率也達到了 177。 圖2 各樣品在相同濃度下對羥基自由基的抑制F i g . 2 I n h i b i ti o n o f th e h y d r o x y l r a d i c a l o f s a m p l e i n th e s a m ec o n c e n tr a ti o n0102030405060708090100乙酸乙酯提（原料）乙酸乙酯提（普）醇沉（原料）醇沉（普）正丁醇提（普）正丁醇提（原料）醇溶液（普）醇溶液（原料）水提物（普）水提物（原料）乙醇浸提（原料）乙醇浸提（普） 氯仿提取（普）氯仿提?。ㄔ希￢c抑制率/% 17 由圖 2 可知，在 ，曬青毛茶的乙酸乙酯提取物抑制率達到了 177。 各樣品及對照 Vc 在相同濃度下對 羥基自由基（從表 8 可以看出 各種提取物 及其對照 Vc 的清除率與濃度的關(guān)系來說，各種提取物的相關(guān)性均不是很好，曬青毛茶的 水提物與 普洱茶的正丁醇提取物 的相關(guān)性較好，相關(guān)系數(shù) 分別為 達到 和 。 曬青毛茶 水提取的總體清除羥基自由基的能力也較高 。 普洱茶 水提物在較低濃度 ， 清除能力達到 177。 曬青毛茶的 乙酸乙酯提取物的清除能力較高，在 ～ ，其清除羥基自由基的能力均高于其他提取物，接近于維生素 C。 OH）均具有相對較強的清除能力，且抑制率隨著各樣品濃度的增大而呈增大的趨勢。 177。 177。 Vc 177。 177。 177。 177。 177。 氯仿提（普） 177。 177。 177。 177。 177。 乙醇浸提（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 — 醇溶液（原料） 177。 177。 — 醇溶液（普） 177。 177。 — 正丁醇提（原料） 177。 177。 — 正丁醇提（普） 177。 177。 — 醇沉（普） 177。 177。 — 醇沉（原料） 177。 177。 — 乙酸乙酯提（普） 177。 177。 SD） 乙酸乙酯（原料） 177。 OH）抑制率的影響 Table 7 Effects of different solvents extracts of different concentrations on the effect of scavenging hydroxyl radical (? OH) 樣品 不同濃度下的提取物對羥自由基（ OH）的抑制效果，見表 7。 OH）的抑制效果的比較 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對羥自由基（即可看出曬青毛茶的正丁醇提取物及乙酸乙酯提取物的總抗氧化能力均大于對照蘆丁，且正丁醇提取部分的總抗氧化能力大于乙酸乙酯提取部分。 在相同的濃度條件下各樣品的還原力的比較，見圖 1。由表 6 可看出 各樣品及對照的還原力與濃度之間的呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)基本能夠達到 以上。 ，普洱茶的正丁醇提取物的吸光值也達到了 177。在濃度為 ， 原料的正丁醇提取物 吸光值就達到177。，遠高于相同濃度下的對照蘆丁的吸光值 177。 。 ；原料及成品普洱茶的乙酸乙酯提取物在濃度為 177。其中，在濃度為 ～ ，氯仿提取物的還原力最低，吸光值最高只到 177。不同原料不 同溶劑提取物及對照蘆丁的吸光值隨濃度的減小而逐漸減小。 177。 177。 蘆丁 177。 177。 177。 177。 177。 乙醇浸提（普） 177。 177。 177。 177。 177。 SD） 正丁醇提（普） 177。 177。 177。 氯仿提?。ㄔ希? 177。 177。 177。 177。 177。 醇沉（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 醇溶液（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 乙酸乙酯提（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 水提（原料） 177。 177。 177。 12 表 4 不同溶劑提取物 不同 濃度還原力的評價 Table 4 Evaluation of reducing power of different solvent extraction of different concentrations 樣品 不同濃度下的吸光值（平均值 x177。 普洱茶及其原料不同溶劑提取物總抗氧化能力的比較 樣品的還原力大小即反映樣品的總抗氧化能力的強弱。各樣品水分含量的大小除了與樣本本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)外，主要與各樣品的烘干溫度和時間有關(guān)。 清除率 (％ )=(A0A)／ A0 100 式中： A0—— 不加待測液時反應(yīng)體系的吸光度； A—— 加入待測液時反應(yīng)體系的吸光度。即空白值。 A2/△ t—— 加入樣品液后鄰苯三酚自氧化時反應(yīng)速率 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對 N02離子清除作用的測定 實驗原理 N02在酸性條件下，與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，此重氮鹽與顯色劑鹽酸萘乙二胺鹽發(fā)生偶合反應(yīng)．生成紫紅色的偶氮化合物，故可用比色法測定 N02含量。測定吸光度。 加入不同溶劑提取物后鄰苯三酚自氧化速率的測定：按照上述步驟在加入鄰苯三酚前先分別加入 mL、 mL、 mL、 mL、 ，蒸餾水減少。由于自氧化的速率依賴于 02的濃度，消除 02則抑制自氧化反應(yīng)，阻止中間產(chǎn)物的積累，從而評價受試物抑制 02的能力 [13]。 鄰苯三酚在堿性條件下迅速自氧化，自氧化過程中產(chǎn)生 02， 02又加速鄰苯三酚自氧 10 化速率，同時產(chǎn)生有色中間物質(zhì)，有色中間產(chǎn)物 的積累在滯后 3045s與時間成良好的線性關(guān)系，一般維持 4min左右，隨后減慢。 實驗原理 利用某些體系在氧化過程中有超氧陰離子自由基（ 02）的生成， 02與某些化合物的作用，產(chǎn)生具有特定吸收的有色物質(zhì)，利用分光光度計進行測定。 清除率 （ %） =（ 1 As/Ao） 100% 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對超氧陰離子自由基（ 02）的抑制率的測定 配制試劑 50mmol/L TrisHCl 緩沖液的配制：準(zhǔn)確稱取 Tris樣品，用蒸餾水定容于 500mL容量瓶中，即為 ，取 250 mL此 Tris溶液，再取 ，調(diào) pH值至 500mL即 可。將 mg/mL[DPPH ]試劑，總體積為 ， 搖勻，靜置 30min，測吸光度 A。 ]貯備液， 現(xiàn)配現(xiàn)用 。 ]貯備液的配制 準(zhǔn)確稱取 4mg [DPPH ]自由基的清除效果，計算其抗氧化能力。 ]自由基數(shù)量減少，溶液顏色變淺，表現(xiàn)為：其在 517nm波長處的吸光度不斷減小，直至達到穩(wěn)定。 ] 乙醇溶液中加入 待測樣液 后， 待測樣液 可以與 [DPPH ]乙醇溶液呈紫色，其濃度與吸光度呈線性關(guān)。 ]是一種穩(wěn)定的以氮為中心的自由基，在 517nm波長處有最大吸收。按下式計算抑制率： 抑制率（％）＝ [A0（ AiA0i） ]/A0 100% 式中： A0—— 用蒸餾水代替樣品的對照值； Ai—— 加樣后的吸光度； A0i—— 樣品本身的本底值 9 普洱茶 及其原料不同溶劑提取物對 [DPPH吸光值越大，則清除 具體操作 分別取 ， 2mmol/L水楊酸 1mL，不同濃度的提取物 1mL（取待測液 mL、 mL、 mL、 mL、 mL加水至 1 mL），最后加入 6mmol/L H2O21mL啟動反應(yīng)。 OH的多少，吸光度越大則以 實驗原理 按 Smirnoff方法改進，用 FeSO4+ H2O2產(chǎn)生6mmol/LH2O2的配制：準(zhǔn)確吸取 30%，用蒸餾水定容到 500mL,則為 6mmol/L H2O2。 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對 ％ FeC13溶液的配制：準(zhǔn)確稱取三氯化鐵 g，加水溶解并定容到 250 mL即可。 1％鐵氰化鉀溶液 的配制：準(zhǔn)確稱取鐵氰化鉀 ，加水溶解并定容到 250 mL即可。 ，加水溶解并定容到 500 mL；量取磷酸二氫鈉溶液 624mL及 Na2HPO4因部分樣品提取的量相對較少而采用此方法。 傳統(tǒng)水分測定方法：稱量皿置于 105℃干燥箱中加熱 4小時冷卻至室溫稱量→取樣移入已知稱量皿中→將稱量皿置于 105℃烘 4小時 ,加蓋取出 ,冷卻后稱量→再加熱半小時 ,冷卻稱量 (兩次連續(xù)稱量之差＜絕對值＞不超過 ,即為恒重 ,以最小一次為準(zhǔn) )。 不同溶劑提取物均進行減壓濃縮 （回收溫度一般為：乙醇提取物， 65℃；水提物，75℃；乙酸乙酯提取物， 50℃；氯仿提取物， 50℃；正丁醇提取物， 70℃），經(jīng)濃縮的樣液置于 55℃烘箱中烘干備用。 12H2O 天津市瑞金特化學(xué)品有限公司 蘆丁 成都思科華生物技術(shù)有限公司 Vc 南化化學(xué)試劑廠 甲苯 天津市化學(xué)試劑三廠，分析純 DPPH 美國 SigmaAldrich 公司 試驗 儀器 試驗 中用到的主要儀器 見表 2。 6表 1 主要藥品和試劑 Table 1 Main drugs and reagants 藥品和試劑 出廠廠家 無水乙醇 天津市化學(xué)試劑三廠，分析純 乙酸乙酯 天津市北方天醫(yī)