【正文】 至 此論文 復(fù) 印之際，作者再次向所有指導(dǎo)，幫助和鼓勵我完成學業(yè)的老師，同學及親友致 以誠摯的謝意！ 。 特別要感謝師兄郭剛軍 和師兄楊大鵬 在我完成實驗過程中給我 的 極大幫助，在次致以真摯的謝意！感謝 李俊紅同學和余積東同學及其他 朋友和同學對我的支持 和 幫助。從論文的開始寫作到修改定稿，處處滲透著導(dǎo)師辛勤的付出。 參考文獻 [1] 陳興琰．茶樹原 產(chǎn)地一云南 [M]．昆明：云南人民出版社， 1994： 132 [2] 趙龍飛，周紅杰．云南普洱茶渥堆過程葉中微生物初探 [J]．云南茶葉， 2020， 4： 13 [3] Lin,.,Tsai,.,and Lin, affecting the levels of tea polyphenols and caffeine in tea leaves [J]. Chem,2020,51:18641873 [4] Lin,.,and Huei, hypolipidemic and antioxidative effects of puerh tea [J].Abstracts of symposim,S87. [5] 揭國良，何普明，丁仁鳳 .普洱茶抗氧化特性的初步研究 [J].茶葉， 2020， 31(3):162～ 165 [6] 東方 .普洱茶的抗氧化特性及活性成分鑒定（碩士學位論文） [D].杭州：浙江大學 .2020 [7] PinDer,GowChin,Yen,WenJye,etc. Effects of Puerh Tea on Oxidative Damage and Nitric Oxide Scavenging[J].Agricultural and Food Chemistry,2020,52:8169～ 8176 [8] 東方 , 揭國良 ,陳飛等 .普洱茶與紅茶的抗氧化特性比較研究 [J].茶葉 ,2020,34(2):202～ 205 [9] 汪海波，劉大川，佘珠花等．大豆異黃酮類物質(zhì)的提取、抗氧化性及穩(wěn)定性研究 [J].食品科學，2020， 25(1)： 111115 [10]李春陽，許時嬰，王璋 . DPPH法測定葡萄籽原花青素清除自由基的能 力 [J].食品與生物技術(shù)學報，2020,22(3):2224 [11]許申鴻，杭瑚 . 二苯代苦味肼基自由基分光測定及其應(yīng)用的初步研究 [J].植物生理學通訊， 1999，35（ 6）： 474477 [12]彭長連，陳少薇 .用清除有機自由基法評價植物抗氧化能力 [J].生物化學與生物物理進展， 2020，27（ 6）： 658661 28 [13]趙二勞，張海容，蓋青青等 .沙棘黃酮的測定及其抗氧化作用 [J].化學研究與應(yīng)用， 2020， 15（ 2）：284～ 285 [14]聶少平，謝明勇，羅珍 .茶葉多糖的抗氧化活性研究 [J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)， 2020， 17（ 5）： 549～552 [15]于智峰，付英娟，王軍等 .苦蕎黃酮提取物體外清除自由基活性的研究 [J].食品科技， 2020,3:126～129 致謝： 本論文是在導(dǎo)師龔加順教授的悉心指導(dǎo)之下完成的。 曬青毛茶的醇沉和水提物對清除超氧陰離子具有較強的作用?？傮w來說，普洱茶原料提取物與普洱茶提取物有非常好的清除羥基自由基的作用。 對具體提取物的還原力來說， 曬青毛茶的正丁醇提取物和乙酸乙酯提取物的總抗氧化能力相對較強，普洱茶和曬青毛茶的氯 仿提取物的還原力相對較弱，且曬青毛茶的氯仿提取物的總抗氧化能力最小。在還原力及清除羥基自由基、超氧陰離子自由基方面，曬青毛茶提取物清除能力大于普洱茶提取物。對清除超氧陰離子自由基而言，在試驗濃度范圍內(nèi)提取物的清除率與濃度線性關(guān)系不明顯，對亞硝酸根離子的作用較為復(fù)雜。對清除 DPPH 自由基而言，在試驗濃度范圍內(nèi)，曬青毛茶提取物與普洱茶提取物的清除率與濃度均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。而含有多酚較少的氯仿提取物和乙醇浸提物的還原能力較差。 由于多酚類物質(zhì)具有較好的還原能力，所以含有較多未氧化多酚的原料提取物的還原力大于普洱茶提取物的。對清除亞硝酸根離子的過程可能較為復(fù)雜，線性關(guān)系不明顯， 有的甚至出現(xiàn)負值。 在清除超氧陰離子自由基方面，曬青毛茶提取物的清除作用高于普洱茶提取物。這是因為在普洱茶正丁醇提取物中含有茶多酚的高級氧化產(chǎn)物茶紅素類物質(zhì)，而醇沉同樣含有較多的茶多酚的氧化產(chǎn)物茶褐素類物質(zhì)。氯仿提取物的清除作用最差，這同樣是由于其中含有較多的無氧化活性的咖啡堿所致。這是由于曬青毛茶中含有較多的未氧化的多酚類物質(zhì)，多酚對羥基有較好的清除作用所致。 對自由基及其 N02離子均有不同程度的清除或抑制作用。從試驗結(jié)果可以看出，普洱茶及其原料的不同溶劑提取物均具有一定程度的總抗氧化能力， 但是普洱茶的不同溶劑提取物在一定程度上的體外抗氧化能力略低于曬青毛茶。 由表 14 及圖 8可知，在濃度為 ，對 N02離子的清除效果強弱順序為： Vc＞乙酸乙酯提取物（原料）＞乙酸乙酯提取物 （普）＞乙醇浸提物（原料）＞醇沉（普）＞正丁醇提取物（普）＞水提物（原料）＞正丁醇提取物（原料）＞水提物（普）＞醇溶液（普）＞乙醇浸提物（普）＞醇沉（原料）＞醇溶液（原料）＞氯仿提取物（原料）＞氯仿提取物（普）。 其中，有部分樣品對 N02離子的清除率出現(xiàn)負值的原因可能是：樣品加入到反應(yīng)體系中后，由于樣品成分復(fù)雜而使得樣品中的某些成分與體系中的顯色劑反應(yīng)形成呈色物質(zhì)，從而吸光值增大而出現(xiàn)負的清除率。 %，普洱茶醇沉 在濃度為 ， 清除率也 達到了 177。%，僅次于維生素 C 的清除率。 其中，曬青毛茶的 乙酸乙酯提取物的清除能力最強，在濃度為 ，對亞硝酸根離子的清除率便達 25 到了 177。 從表 14 可以看出，隨著反應(yīng)體系中清除劑濃度在 ～ 范圍內(nèi)的逐漸增加，各樣品及對照均對 N02離子有一定的清除 作用且清除率逐漸增大。 177。 177。 177。 177。 氯仿提（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 177。 — 乙醇浸提物（原料） 177。 177。 乙醇浸提物（普） 177。 177。 177。 177。 177。 水提物（普） 177。 177。 177。 177。 177。 — 醇溶液（普） 177。 177。 — 醇沉（原料） 177。 177。 — 醇沉（普） 177。 177。 — 乙酸乙酯提（普） 177。 177。 SD） 乙酸乙酯提（原料） 177。 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對 N02離子的清除效果的比較 根據(jù)公式清除率 (％ )=(A0A)／ A0 100計算出普洱茶及其原料不同溶劑提取物對 N02離子的清除效果見表 14。 在相同濃度下各樣品的抑制率比較見圖 7。 普洱茶的醇沉 在較低濃度 ，清除率達到了 177。%，遠遠高于其他提取物。曬青毛茶醇沉部分 的清除率很高，在濃度 為 ，清除率便達到 177。當 Vc 濃度為 達到 177。 由表 13 結(jié)果可知，各樣品在濃度為 ～ 苯三酚自氧化體系產(chǎn)生的超氧陰離子（ O2）均有清除作用。 177。 177。 177。 177。 氯仿提（普） 177。 177。 177。 177。 177。 水提物（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 乙酸乙酯提（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 正丁醇提（原料） 177。 177。 177。 177。 177。 醇溶液（普） 177。 177。 177。 177。 177。 乙醇浸提（普） 177。 177。 177。 177。 177。 醇沉（普） 177。 177。 177。) 樣品 不同濃度下的提取物對 O2自由基的抑制率（％） （平均值ⅹ 177。）的抑制效果見表 13。 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對超氧陰離子自由基（ O2175。自由基的清除率F i g . 4 Ef f e c ts o f e x tr a c ts a n d c o n tr o l o n th e e f f e c t o f s c a v e n i n g D P P Hf r e e r a d i c a l a t th e s a m e c o n c e n tr a ti o n01020304050607080蘆丁醇沉（普）醇沉（原料）乙醇浸提（普）乙醇浸提（原料）醇溶液（普）醇溶液（原料）正丁醇提（原料）正丁醇提（普）乙酸乙酯提（原料）乙酸乙酯提（普）水提物（原料）水提物（普） 氯仿提（普）氯仿提（原料）清除率/% 21 圖 5 普洱茶醇沉物中單體兒茶素 HPLC圖 Precipitation of Puerh tea by ethanol of catechin HPLC 圖 6 普洱茶正丁醇提取物中單體兒茶素 HPLC圖 Extrace of Puerh tea by alcohol l of catechin HPLC 表 12 普洱茶醇沉物和正丁醇提取物中兒茶素單體含量分析 Table12 Content of monomer catechin of Extraces of Puerh tea by ethanol and alcoholl 單位： g/100g 樣品 沒食子酸 兒茶 素 EGC EGCG EC ECG 普洱茶醇沉物 未檢出 普洱茶正丁醇提取物 從表 12中可看出，普洱茶醇沉物中兒茶素單體含量較低，其具有較強的清除自由 22 基的能力可能是其他一些未知成分所引起的。見圖 5,圖 6。 普洱茶醇沉物和正丁醇提取物的兒茶素單體含量的分析 根據(jù)上述各樣品對羥基自由基的抑制效果的分析，可看出普洱茶醇沉物和正丁醇提取物具有較強的抑制能力。 20 由圖 4 及表 11 可知，各樣品在相同濃度 曬青毛茶的 氯仿提取物的相關(guān)性最差，相關(guān) 系數(shù)僅為 。普洱茶的 醇沉 部分的 清除能力極強 ，且相關(guān)系數(shù)達到了 。 曬青毛茶的 正丁醇提取物的清除能力 在綠茶的各提取部分中最強，接近于蘆丁標準品的清除能力，而且在 ～ ， 曬青毛茶 正丁醇提取物的清除能力隨著濃度的增加 清除率 高于蘆丁標準品的 清除率。而正丁醇提取物的清除能力也較強，在濃度為 177。%，相同濃度下蘆丁標樣的清除率僅為 177。 19 表 11不同 溶劑提取物對 DPPH自由基的清除率與濃度的相關(guān)系數(shù) Table 11 R2of of scavenging DPPH radical of different solvent extraction 水提物（普） 水提物（原料） 乙酸乙酯提 (普 ) 乙酸乙酯提 (原料 ) 醇溶液（普） R2 醇溶液（原料） 醇沉（普） 醇沉（原料） 氯仿提（普） 氯仿提（原料） R2 正丁醇提（普） 正丁醇提（原料） 乙醇浸提（普） 乙醇浸提（原料） 蘆丁 R2 從 表 10 可以看出： 曬青毛茶和普洱茶的不同溶劑提取物的水溶性部分及蘆丁對[DPPH﹒ ]自由基 均有一定的清除作用，反應(yīng)體系中在濃度為 ～，隨著待測樣濃度的增大其抑制率逐漸增大。 177。 177。 177。 177。 氯仿提（普） 177。 1