【正文】 染色濃 。 短臂 —— 遠(yuǎn)側(cè)段可見兩條深帶，在有的標(biāo)本上融合成一條。 長(zhǎng)臂 —— 近側(cè)可見 23 條分界不明顯的深帶，遠(yuǎn)側(cè)段有一條明顯而恒定的深帶。 長(zhǎng)臂 —— 有三條明顯的深帶，遠(yuǎn)側(cè)近末端的一條著色較淡，第 2和第 3深帶稍接近。 7 號(hào)染色體：著絲粒染色濃 。 長(zhǎng)臂 —— 可見五條深帶，近側(cè)的一條緊貼著絲粒。 短臂 —— 中間有一條明顯而寬闊的淺帶，近側(cè)段和遠(yuǎn)側(cè)段各有一條深帶，近側(cè)段的深帶緊貼著絲粒。 C組染色體：包括 612 號(hào)和 X染色體，中等長(zhǎng)度， 11 號(hào)和X 染色體著絲粒約在 3/8處，其它號(hào)的著絲點(diǎn)約在 1/4處。 5 號(hào)染色體： 短臂 —— 可見 12條深帶，其遠(yuǎn)側(cè)的深帶寬而且著色濃。 4 號(hào)染色體： 短臂 —— 可見一條深帶。在處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段的深帶可分為三條深帶。 短臂 —— 一般在近側(cè)段可見兩條深帶，遠(yuǎn)側(cè)段可見 3 條深帶，其中遠(yuǎn)側(cè)近端部的一條較窄，且著色較淡，中間的 一條著色較深，這是區(qū)別第 3號(hào)染色體短臂的顯著特征。短臂和長(zhǎng)臂中段各有一條明顯而寬闊的淺帶，是該染色體的特征。 長(zhǎng)臂 —— 可見 67條深帶。其遠(yuǎn)側(cè)為一寬的淺帶，中段和遠(yuǎn)側(cè)段各有兩條深帶，以中段第 2 深帶染色較濃，中段兩條深帶 19 稍靠近。 短臂 —— 近側(cè) 段 和中段各有一條深帶 ，其中段深帶稍寬，處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段可顯出 34條淡然的深帶。 注 3： G分帶染色體核型分析 A組染色體：包括 13號(hào)，其長(zhǎng)度最長(zhǎng)； 1號(hào)和 3號(hào)染色體的著絲粒在 1/2處； 2號(hào)染色體的著絲粒在 3/8 處。 11．復(fù)查率不超過 5%。 9．發(fā)現(xiàn)胎兒染色 體結(jié)構(gòu)異常者，及時(shí)通知孕婦并應(yīng)建議夫婦雙方檢查染色體，如有必要，建議家系調(diào)查，以明確異常染色體的來源或是否突變。 7．如標(biāo)本培養(yǎng)失敗，應(yīng)即時(shí)通知受檢者和送檢醫(yī)師，以便能及時(shí)復(fù)查。單體型應(yīng)有三個(gè)或以上相同異常核型。 5．發(fā)現(xiàn)受檢者染色體結(jié)構(gòu)異常者 (平衡易位、重復(fù)、 缺失等 )，應(yīng)建議 家系調(diào)查。如因特殊原因不能準(zhǔn)時(shí)發(fā)放報(bào)告者，應(yīng)及時(shí) 通知受檢者和 送檢醫(yī)師。如疑嵌合體，計(jì)數(shù) 100個(gè)核型，并計(jì)算百分比。 2．每張玻片分別計(jì)數(shù) 10 個(gè)核型 (共需記數(shù) 20個(gè)核型 )，選擇 5個(gè)分散良好、帶型清晰的分裂相進(jìn)行分析，并于計(jì)算機(jī)中配對(duì)保存。 18 注 1：染色體 核型分析 的閱片、審片、 報(bào)告發(fā)放規(guī)定 1．外周血一般滴片三張，分帶染色處理兩張。 按實(shí)驗(yàn)規(guī)范嚴(yán)格操作，玻片編號(hào)準(zhǔn)確，分帶適中（以 10 號(hào)染色體長(zhǎng)臂分帶清晰為標(biāo)準(zhǔn)）、染色清楚。 制片：將上述離心管以 1500 轉(zhuǎn) /分離心 10 分鐘，棄上清，加入 68滴固定液（甲醇 3：冰醋酸 1），輕輕吹打混勻成懸浮夜，將懸浮液滴在用冰水處理的載玻片上，每片 23 滴，輕輕吹氣使其均勻平鋪在玻片上，空氣中晾干。 固定：在上述離心管內(nèi)加入 68 ml固定液（甲醇：冰醋酸 =3： 1），放置 30 分鐘。 低滲處理：將終止培養(yǎng)的細(xì)胞懸液離心，以 1500轉(zhuǎn) /分離心 10 分鐘，棄上清，加入 37℃ ℃溫箱30 分鐘。 三、 外周血細(xì)胞染色體操作規(guī)程 采血培養(yǎng)：用經(jīng) %肝素濕潤(rùn)的注射器靜脈取血 2ml，接種到裝有5ml生長(zhǎng)液的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)（約 － －－去針頭后滴入 12 滴），然后每瓶注入 PHA 5mg，放入溫箱中 37℃，培養(yǎng) 70小時(shí)。 2．質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參照外周染色體部分。 注 1：羊水培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)： 每培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)至少有三堆細(xì)胞島；每個(gè)細(xì)胞島在40 倍鏡下鋪滿視野；加秋水仙素前有 10 個(gè)以上圓細(xì)胞，加秋水仙素后圓細(xì)胞更多。 1 染色體核型分析。 制片：棄上清液，加入 ，沖吸混勻成細(xì)胞懸液，在低溫玻片上滴 34 滴，輕輕吹氣使其均勻平鋪在玻片上，空氣中晾干。 固定：棄上清液，慢慢加入固定 液 3ml 沖吸混勻， 37 度溫水浴 靜置 10分鐘，離心（ 2020轉(zhuǎn) /分） 10 分鐘。 低滲處理：棄去上清液，加入預(yù)溫 37℃的 ，約細(xì)胞壓積的 68倍（ 3ml 左右），輕輕沖吸混勻， 37℃溫箱內(nèi)低滲處理 30 分鐘。 培養(yǎng)：培養(yǎng)約 57天取培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察，此時(shí)可見梭形纖維狀羊水細(xì)胞貼壁，并進(jìn)行換液，繼續(xù)培養(yǎng)。 二、 羊水細(xì)胞染色體標(biāo)本操作規(guī)程 取材：妊娠 1620 周孕婦在嚴(yán)格無菌操作下，經(jīng)腹部作羊膜腔穿刺抽取羊水，最初 2ml 羊水棄去不用，另?yè)Q注射器再取 20ml，分裝在 2 個(gè)無菌離心管內(nèi)。禁 止性生活 2周。 術(shù)后應(yīng)囑孕婦臥床休息 12小時(shí)，并嚴(yán)密觀察胎心、宮縮情況，有無胎盤早剝、羊水外溢、腹痛、陰道出血情況， B 超檢查有無內(nèi)出血。 術(shù)前應(yīng)做 B超檢查，確定胎頭位置、胎齡大小、胎兒發(fā)育情況、胎盤附著部位、羊水量并確定穿刺點(diǎn)。 術(shù)前認(rèn)真核對(duì)適應(yīng)癥、禁忌癥、妊娠周數(shù)、測(cè)量血壓、體 溫、胎心、 16 確定子宮大小及宮底高度。 羊膜腔穿刺羊水有血污染者約為 10%，但不影響診斷結(jié)果。標(biāo)本取材有可能引發(fā)流產(chǎn)（羊膜腔穿刺流產(chǎn)率約為%）、早產(chǎn)或死胎。三天后去敷料，兩周內(nèi)避免性生活，如近日有出血腹痛等情況及時(shí)就診。 ④抽畢將針芯插回，迅速拔出穿刺針，用無菌棉球及紗布蓋住針眼壓迫片刻，以免羊水外溢或出血，用膠布固定。 ②常規(guī)皮膚消毒，鋪無菌孔巾，在介入超聲引導(dǎo)下（其部位約在腹中線旁 2cm，宮底下約 3cm 處），右手持穿刺針垂直刺入腹壁、子宮、進(jìn)入羊膜腔，一般深度為 710cm。 （五） 羊膜腔穿刺要點(diǎn) 羊膜腔穿刺時(shí)間：以妊娠 1620 周為宜。 術(shù)前測(cè)量體溫（腋溫）高于 ℃兩次 （四） 穿刺用具的準(zhǔn)備 穿刺包：包括治療 巾一塊、 20G 穿 刺針（帶針芯）一個(gè)、止血鉗一把、注射器（ 2ml/1,20ml/1）、消毒紗布 3塊，無菌 10ml刻度離心管 2支，彎盤一個(gè)。 15 單純因社會(huì)原因測(cè)胎兒性別者。 盆腔或?qū)m腔內(nèi)有感染。 先兆流產(chǎn) 。 （二） 穿刺時(shí)間 羊水穿刺檢查在 1622周進(jìn)行。 曾有原因不明的習(xí)慣性流產(chǎn) 、死胎及畸胎史的孕婦。 B 超檢查懷疑胎兒患染色體病的孕婦。 曾生過染色體病、神經(jīng)管缺陷兒的孕婦。 第四章 產(chǎn)前診斷技術(shù)操作規(guī) 范 一、 羊膜腔穿刺技術(shù)操作規(guī)程 （一） 適應(yīng)癥 孕婦年齡大于 35 歲。 (3)具有完善的消防系統(tǒng) ,防止火災(zāi) 。 ,羊水標(biāo)本遭到破壞 預(yù)防 : (1)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室加鎖 。 (2)立即維護(hù)培養(yǎng)箱 ,恢復(fù)供電 、 供氣 。 (3)每天測(cè)定培養(yǎng)箱參數(shù) ,定期維護(hù)保養(yǎng) 。 、 無 CO2 氣或使用異常 預(yù)防 : (1)培養(yǎng)箱專線供電 ,并安裝應(yīng)急電源 。 處理 : (1)及時(shí)報(bào)告主管院長(zhǎng) 、 醫(yī)務(wù)科 ,就地或迅速進(jìn)入手術(shù)室開腹探查 ,結(jié)扎 14 破裂血管 ,組織高效 、 快捷的搶救 。 (4)凝血因子等常規(guī)檢查要齊全 ,以除外血液病或凝血功能障礙 。 穿刺針力求要掌握穩(wěn) 、 準(zhǔn) 、 輕 、 快的要領(lǐng) ,穿刺針不得頻繁出入羊膜腔 。隨著羊水 、 胎兒的活動(dòng) ,臍帶位置也可能發(fā)生變化 ,特別是穿刺之前 ,用探頭仔細(xì)掃描臍帶 、 血管及周邊器官位置 。 ,羊水標(biāo)本遭到破壞 。 (二 )重大事故確認(rèn) 、 胎盤血管 、 甚至傷及盆腔大血管 ,出血較多 。 十 四 、重大事故應(yīng)急預(yù)案 (一 )目的 重大事故一旦發(fā)生 ,不僅會(huì)給患者造成嚴(yán)重?fù)p失 ,也會(huì)影響醫(yī)院聲譽(yù) ,造成經(jīng)濟(jì)損失 。 異常結(jié)果盡快上報(bào)上級(jí)醫(yī)師及科主任，及時(shí)審核。 十三 、羊水及異常標(biāo)本保管制度 每份標(biāo)本均要登記好病人資料和檢驗(yàn)結(jié)果，染色體核型分析時(shí)所有被分析和計(jì)數(shù)的分裂相都要記錄玻片號(hào)和顯微鏡坐標(biāo)，微機(jī)專人管理，并與原始申請(qǐng)單共同保存。 公安、司法機(jī)關(guān)因辦理案件原因需要查閱、復(fù)印病案資料及羊水片時(shí)，應(yīng)向醫(yī)務(wù)科出具采集證據(jù)的法定證明和執(zhí)行公務(wù)人員的有效身份證明，醫(yī)務(wù)科同意簽字后方可辦理。 禁止將產(chǎn)前遺傳學(xué)診斷以核型分析的原始結(jié)果發(fā)出，防止孕婦無故 13 選擇性別。 十二 、保 密 制 度 進(jìn)行產(chǎn)前遺傳學(xué)診斷技術(shù)要遵守知情自愿原則，尊重病人隱私權(quán)。 每年總結(jié)分析一次相關(guān)資料，以進(jìn)一步提高產(chǎn)前診斷工作質(zhì)量。 十一、統(tǒng)計(jì)匯總及上報(bào)制度 做好資料的登記、整理、分析工作。 無菌操作時(shí)嚴(yán)格遵守操作規(guī) 程 。 ,保證儀器正常運(yùn)行 。 、 易燃物品如酒精等 ,應(yīng)安全放置 。 、 電 、 安全防控 、 氣瓶室 (要掛四防牌 )等重要環(huán)節(jié) 。 。 ,應(yīng)注意傾聽當(dāng)事人的意見 ,討論時(shí)吸收當(dāng)事人參加 ,允許當(dāng)事人發(fā)表意見 ,決定處分時(shí) ,負(fù)責(zé)人應(yīng)進(jìn)行思想教育 ,以達(dá)到 幫助的目的 。 ,按性質(zhì)情節(jié)輕重 ,組織全科人員進(jìn)行討論 ,以提高認(rèn)識(shí) ,吸取教訓(xùn) ,改進(jìn)工作 ,并確定事故性質(zhì) ,提出處理意見 。 事故差錯(cuò)責(zé)任者及時(shí)記錄發(fā)生差 錯(cuò)的經(jīng)過 、 原因 、 后果 ,并在 3個(gè)工作日提交書面檢查材料 。 十、差錯(cuò)事故管理制度 (一 )差錯(cuò)事故報(bào)告處理制度 12 ,以減少和消除由于事故差錯(cuò)造成的不良后果 。每年度詳細(xì)匯總數(shù)據(jù) 、 總結(jié)經(jīng)驗(yàn) 、 提高質(zhì)量 。 、 保管 、 維修情況及工作人 員操作規(guī)程 ,確保各類儀器正確合理使用 。 ,愛護(hù)各類器械 ,避免浪費(fèi) 。 穿刺針外包裝的標(biāo)簽在穿刺后貼在病案第二頁(yè)右下角處 ,使用的穿刺針應(yīng)銷毀 ,嚴(yán)禁重復(fù)使用 。 、 銷毀或丟棄記錄 。 、 器械 、 培養(yǎng)液及試劑由科室統(tǒng)一管理 ,專人負(fù)責(zé)領(lǐng)取 、 接收 、 保管 、 支出 。 ,確保儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn) ,數(shù)據(jù)精密準(zhǔn)確 ,做好記錄 。 保持室內(nèi)環(huán)境衛(wèi)生清潔 ,實(shí)驗(yàn)完畢及時(shí)清理廢物 ,做好清潔衛(wèi)生 。 正確 使用儀器開關(guān) ,防止儀器損壞 、 人身傷害或意外發(fā)生 ,違規(guī)操作導(dǎo)致儀器損壞者 ,按照科室規(guī)定給于相應(yīng)處罰 。 八 、儀器設(shè)備、試劑及藥品器材管理制度 ,建立儀器登記清單 ,專人負(fù)責(zé) ,專人使用 。 ,即先浸泡消毒 ,再清洗 ,最后高壓滅菌 。 每周做好清潔衛(wèi)生 ,每月徹底消毒 ,并做空氣培養(yǎng) 。 、 培養(yǎng)室應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無菌制度 ,除相關(guān)人員外 ,其他人員一律不得入內(nèi) 。 非相關(guān)人員一律不得查閱 。 具體參見產(chǎn)前診斷病案管理制度 。 ,防止孕婦無故選擇性別 。 并簽署知情同意書 。 六 、患者知情同意制度 、 自愿選擇原則進(jìn)行 。 錄入微機(jī)的資料可定期刻錄于光盤保存 。 3年 。 5年 ,產(chǎn)前診斷病歷應(yīng)保留至少 20年 。 ,并為產(chǎn)前診斷科研工作提供精確數(shù)據(jù) 。 ,應(yīng)在一周內(nèi)電話隨訪 ,特殊情況隨時(shí)隨訪 ,出現(xiàn)并發(fā)癥及副反應(yīng)等及時(shí)處理 。 四 、追蹤觀察隨訪制度 ,護(hù)士或相關(guān)人員具體負(fù)責(zé) 。 ,及時(shí)向上級(jí)產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)轉(zhuǎn)診 。 。 ,將標(biāo)本片記錄保存 。 ,妥善保管好標(biāo)本或染色體玻片 ,做好記錄 ,納入微機(jī)管理 。 (5)嚴(yán)格執(zhí)行各項(xiàng)操作規(guī)程 ,避免標(biāo)本錯(cuò)誤 、 污染 。 (3)對(duì)符合標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)本 ,按照國(guó)際體制 (ISCN)進(jìn)行不同組織核型分析與描述 。 : (1)絨毛及羊水細(xì)胞培養(yǎng)成功率不得低于 90%。 (2)定期進(jìn)行培養(yǎng)箱和室內(nèi)消毒 ,空氣細(xì)菌培養(yǎng) 。 9 (6)操作者進(jìn)行羊水穿刺 、 接種 、 換液 、 收獲 、 制片 、 核型分析等均要仔細(xì)核對(duì)患 者或孕婦身份 、 姓名和編號(hào)等 ,必要時(shí)應(yīng)兩人核對(duì)并記錄 。 (4)盡量減少培養(yǎng)箱門開關(guān)次數(shù) ,防止箱內(nèi) CO2 濃度下降 ,每月清潔 、 消毒培養(yǎng)箱一次 ,并做好記錄 。培養(yǎng)接種前半小時(shí)打開換氣扇 ,工作完畢后關(guān)好顯微鏡等相關(guān)儀器開關(guān) ,檢查 CO2 培養(yǎng)箱的顯示面板數(shù)據(jù)是否正常 ,并做好臺(tái)面和地面的清潔工作 。 (2)每日查看 CO2 氣瓶總壓力及分壓力 ,注意有無漏氣等 。 、 資料 、 信息規(guī)范管理 ,隨時(shí)整理完善 。 ,制定診斷試劑的敏感性和特異性標(biāo)準(zhǔn) 。 (驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) )及現(xiàn)場(chǎng)抽樣檢查和實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量評(píng)定工作 。 。 對(duì)產(chǎn)前診斷相關(guān)資料、信息規(guī)范管理。 嚴(yán)禁在孕婦不知情和不自愿的情況下，利用產(chǎn)前診斷技 術(shù)對(duì)胎兒進(jìn)行無指征、不合法操作與實(shí)驗(yàn)。 嚴(yán)格遵守知情、自愿原則，與夫婦簽定知情同意書，尊 重孕婦權(quán)利、隱私權(quán)。 二、工作人員行為準(zhǔn)則 8 相關(guān)工作人員具有執(zhí)業(yè)醫(yī)師資格，并明確崗位職責(zé)。 嚴(yán)格執(zhí)行病案的復(fù)印及借閱制度。 督促治療隨訪結(jié)束病案的回收，負(fù)責(zé)整理。 負(fù)責(zé)病案號(hào)發(fā)放及編號(hào)控制工作，經(jīng)常核對(duì)病案號(hào)，保證編號(hào)準(zhǔn)確無誤，無重號(hào)、漏號(hào)。 認(rèn)真完成本職工作，并承擔(dān)部分教學(xué)和研究工作。 做好實(shí)驗(yàn)記錄，進(jìn)行月、季、年度的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析、資料上報(bào)等工作。 負(fù)責(zé)試劑、耗材的及時(shí)訂購(gòu)、管理及使用。 認(rèn)真執(zhí)行各項(xiàng)規(guī)章制度和技術(shù)操作常規(guī)，嚴(yán)防差錯(cuò)事故發(fā)生。