【正文】 纖維素液相結(jié)合離心法C oligo(U)濾紙法D oligo(dC)纖維素柱層析法E oligo(dG)纖維素液相結(jié)合離心法[本題答案] A名詞解釋[本題答案] RNA酶蛋白抑制劑（RNasin）是從人胎盤分離的一種蛋白質(zhì)可與多種RNA酶緊密結(jié)合形成非共價(jià)結(jié)合的等摩爾復(fù)合物，使RNA酶失活。g/ml雙鏈DNAC A260為1的光密度大約相當(dāng)于40181。③雙雜交只是反映蛋白質(zhì)間能發(fā)生作用的可能性，這種可能還必須經(jīng)過(guò)其他實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，尤其要與生理功能研究相結(jié)合，否則可能會(huì)誤入歧途。局限性：①雙雜交系統(tǒng)分析蛋白間的相互作用定位于細(xì)胞核內(nèi)，而許多蛋白間的相互作用依賴于翻譯后加工如糖基化、二硫鍵形成等，這些反應(yīng)在核內(nèi)無(wú)法進(jìn)行。3．① 蛋白質(zhì)的分離技術(shù)：二維凝膠電泳② 蛋白質(zhì)的鑒定技術(shù)主要包括：質(zhì)譜技術(shù)、Edman降解分析技術(shù)、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)分析技術(shù)③ 蛋白質(zhì)與核酸間相互作用的研究技術(shù)：凝膠滯后實(shí)驗(yàn)、DNase Ⅰ 足紋分析、核酸一蛋白質(zhì)雜交實(shí)驗(yàn) ④蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間相互作用的研究技術(shù)：酵母雙雜交技術(shù)4．依據(jù)蛋白質(zhì)分子的凈電荷或等電點(diǎn)進(jìn)行分離的技術(shù)。通過(guò)蛋白質(zhì)與末端標(biāo)記的核酸探針特異性結(jié)合，電泳時(shí)這種復(fù)合物較無(wú)蛋白結(jié)合的探針在凝膠中的泳動(dòng)速度要慢，即表現(xiàn)為相對(duì)滯后。4. 質(zhì)譜技術(shù)是樣品分子離子化后，根據(jù)不同離子間的質(zhì)量、電荷比值(質(zhì)荷比，m/z)差異來(lái)確定分子量的技術(shù)。 3. 二維凝膠電泳是目前蛋白質(zhì)組研究中最有效的分離技術(shù)。主要在蛋白質(zhì)水平上探索蛋白質(zhì)的表達(dá)模式、作用模式、功能機(jī)制、調(diào)節(jié)控制以及蛋白質(zhì)群體內(nèi)的相互作用。答案：選擇題：C、B、B、A、D、B、ABCDE名詞解釋：1. 蛋白質(zhì)組是指特定細(xì)胞、組織乃至機(jī)體作為一個(gè)生命單元中所擁有蛋白質(zhì)的集合，即生命體中攜帶的基因信息在某一時(shí)段所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。A 氫鍵 B 磷酸二酯鍵 C 疏水鍵 D 肽鍵7．蛋白質(zhì)之間相互作用的形式主要包括_______。A 分子量 B 分子組成 C 分子構(gòu)像 D 分子大小5．下列技術(shù)中，不能用來(lái)檢測(cè)溶液中蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)是_______。A 質(zhì)譜分析 B 二維凝膠電泳 C 酵母雙雜交技術(shù) D DNase I 足紋分析3．二維凝膠電泳是根據(jù)蛋白質(zhì)的_______來(lái)進(jìn)行分離的。蛋白質(zhì)組學(xué)選擇題1． 目前研究蛋白質(zhì)間相互作用最常采用的方法是_______。5＇端的LTR包含許多特定的基因表達(dá)調(diào)控區(qū)域，是一組真核生物增強(qiáng)子和啟動(dòng)子單位，而3＇端的LTR具有轉(zhuǎn)錄終止的作用。LTR在結(jié)構(gòu)與功能上與上述重復(fù)序列不同。2. 國(guó)際病毒分類委員會(huì)（ICTV）制定了《國(guó)際病毒分類與命名原則》。③來(lái)源于宿主細(xì)胞質(zhì)膜系統(tǒng)（細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜或高爾基體膜）的包膜。五、問(wèn)答題：2. 毒沒有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由四種基本結(jié)構(gòu)成份組成：①由一種核酸(DNA或RNA)組成的病毒基因組。7. 當(dāng)宿主細(xì)胞同時(shí)感染兩種不同亞型的病毒時(shí)，毒株之間會(huì)發(fā)生基因重配現(xiàn)象，子代病毒可獲得兩個(gè)親代病毒的基因片段，導(dǎo)致子代病毒表面抗原發(fā)生變化，從而逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)的攻擊，這種現(xiàn)象又稱為抗原漂移（antigen shift）。參考答案一、A型題： 二、B型題： 三、X型題： 四、名詞解釋：5. 許多病毒基因組的一段DNA序列有兩個(gè)或兩個(gè)以上的開放讀碼框架，可以編碼兩種或兩種以上的多肽鏈，稱為重疊基因（overlapping gene）6. 分段基因組（segmented genome）是指病毒基因組由數(shù)條不同的核酸分子組成。 C. 逆轉(zhuǎn)錄病毒RNA為正鏈D. 病毒顆粒均攜帶逆轉(zhuǎn)錄酶E. 前病毒DNA可以整合到宿主細(xì)胞染色體DNA中7. 逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)不包括（ ） A. 5＇端帽子結(jié)構(gòu)B. 3＇端poly(A)尾C. 兩端各有一個(gè)長(zhǎng)末端重復(fù)序列（LTR）D. 編碼逆轉(zhuǎn)錄酶E. 神經(jīng)酰胺酶8. 分段基因組（segmented genome）是指病毒基因組（ ）A. 由數(shù)條不同的核酸分子組成B. 由數(shù)條相同的核酸分子組成C. 由數(shù)條互補(bǔ)的核酸分子組成D. 由可分成不同功能區(qū)段的一個(gè)核酸分子組成E. 以上都不對(duì)9. HBV基因組序列的利用率（編碼基因效率）達(dá)（ ） A. 90%～100% B. 100%～150% C. 150%～200% D. 200%～250% E. 250%～300%10. SARSCoV的分子診斷主要是（ ） A. 根據(jù)基因組序列設(shè)計(jì)特異性引物作PCR B. 根據(jù)基因組序列設(shè)計(jì)特異性引物作RTPCR C. 根據(jù)病毒膜蛋白作ELISA D. 根據(jù)病毒核衣殼蛋白作ELISA E. 根據(jù)病毒滴度十一、 B型題： A. 雙鏈DNA B. 單鏈DNA C. 雙鏈RNA D. 正鏈RNA E. 負(fù)鏈RNA 1. HBV基因組是（ ）2. 流感病毒基因組是（ ）3. 人類免疫缺陷病毒的基因組（ ）十二、 X型題：1. 述一個(gè)病毒基因組，應(yīng)涉及到（ ）（DNA或RNA）的性質(zhì)2. 病毒基因組末端重復(fù)序列結(jié)構(gòu)有（ ）A. 粘性末端B. 末端插入序列C. 末端反向重復(fù)序列D. 末端正向重復(fù)序列E. 長(zhǎng)末端重復(fù)序列3. 甲型流感病毒亞型的分型依據(jù)（ ） A. 核衣殼蛋白（nucleocapsid protein，NP）B. 基質(zhì)蛋白（matrix protein，M）C. 血凝素（hemagglutinin，HA）的抗原性D. 神經(jīng)酰胺酶（neuraminidase，NA）的抗原性E. 宿主種屬4. 逆轉(zhuǎn)錄病毒編碼的基本結(jié)構(gòu)基因（ ） A. gag（編碼核心蛋白）。對(duì)疾病的防治和機(jī)理的闡明有重要應(yīng)用意義。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)代表基因組分析的早期階段，通過(guò)基因作圖、核苷酸序列分析確定基因組成、基因定位的科學(xué)，包括規(guī)?；販y(cè)定蛋白質(zhì)、RNA及其它生物大分子的三維結(jié)構(gòu)等內(nèi)容,以獲得一幅完整的、能夠在細(xì)胞中定位以及在各種生物學(xué)代謝途徑、生理途徑、信號(hào)傳導(dǎo)途徑中全部蛋白質(zhì)在原子水平的三維結(jié)構(gòu)全息圖。對(duì)比人群之間SNP 圖譜的異同情況可以對(duì)人類的起源、遷移等作出估計(jì), 從而理清人類進(jìn)化過(guò)程中源與流的問(wèn)題。通過(guò)研究遺傳多態(tài)性與個(gè)體對(duì)藥物敏感性或耐受性的相關(guān)性, 可以闡明遺傳因素對(duì)藥物效用的影響, 從而對(duì)醫(yī)生針對(duì)性的用藥和藥物的開發(fā)提供指導(dǎo)和依據(jù)。8答案：疾病的連鎖分析與基因的定位：包括復(fù)雜疾?。ㄈ绻琴|(zhì)疏松癥、糖尿病、心血管疾病、精神性紊亂、各種腫瘤等）的基因定位、關(guān)聯(lián)分析，并可用于遺傳病的單倍型診斷。法醫(yī)案例中, 對(duì)于量極少和降解嚴(yán)重的生物檢材, 通過(guò)PCR進(jìn)行STR位點(diǎn)擴(kuò)增并將幾個(gè)STR 位點(diǎn)聯(lián)合起來(lái)分析, 可得到相當(dāng)高的累積個(gè)體識(shí)別率和父權(quán)排除率。通過(guò)家系和對(duì)照研究, 運(yùn)用連鎖和相關(guān)分析, 可以找到與疾病高度相關(guān)的STR位點(diǎn)。②目的基因篩選和基因診斷。DNA甲基化對(duì)胚胎發(fā)育非常重要，與X染色體失活，基因組印記，特別是腫瘤密切相關(guān)。DNA甲基化與基因表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，DNA甲基化調(diào)控基因表達(dá)直接的機(jī)制可能是因?yàn)榧谆鶑腄NA分子的大溝中突出，阻止了轉(zhuǎn)錄因子與基因相互作用，還可能直接抑制RNA聚合酶活性而抑制基因的表達(dá)。6 答案: 大約有一半的人類基因富含CpG 的順序，稱為CpG島(CpG island)，CpG 島常位于轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)或其附近，主要存在于看家基因和一些組織特異性表達(dá)基因。假基因中大多數(shù)則缺少間隔序列的稱為已加工假基因(processed pseudogene)，主要是轉(zhuǎn)錄過(guò)程中mRNA 以cDNA 的方式重新整合進(jìn)入基因組( 很可能發(fā)生在生殖細(xì)胞中)，在長(zhǎng)期進(jìn)化選擇過(guò)程中因?yàn)殡S機(jī)突變積累而喪失功能，通常這種假基因無(wú)內(nèi)含子，兩邊有小的側(cè)翼定向重復(fù)序列(flanking direct repeat)，339。5 答案：與正常功能的基因序列相似，但無(wú)轉(zhuǎn)錄功能或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無(wú)功能的基因稱假基因( pseudogene)。臨床表現(xiàn)常見為眼瞼下垂、外眼肌麻痹、視神經(jīng)萎縮、神經(jīng)性耳聾、痙攣或驚厥、癡呆、偏頭痛、類卒中樣發(fā)作等。 （五）半自主復(fù)制與協(xié)同作用mt DNA雖有自我復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和編碼功能，但該過(guò)程還需要數(shù)十種nDNA編碼的酶參加，因此mt DNA基因的表達(dá)同時(shí)也受nDNA的制約，兩者具有協(xié)同作用。復(fù)制分離即在細(xì)胞分裂的復(fù)制過(guò)程中,突變的和野生型的mtDNA 隨機(jī)進(jìn)入子細(xì)胞的過(guò)程，復(fù)制分離的結(jié)果使突變mtDNA 雜合體向突變純合或野生純合方向轉(zhuǎn)變,但因突變復(fù)制具有優(yōu)勢(shì),故易產(chǎn)生突變積累，突變積累的程度不同,突變mtDNA 在群體中的多態(tài)性程度也不同。 （二）高突變率mt DNA突變率約為nDNA的10～100倍，此外mtDNA 與有毒物質(zhì)的結(jié)合頻率比核DNA 高數(shù)倍至數(shù)十倍。（二）中度重復(fù)序列這類重復(fù)序列主要由比較大的片段（由100bp到幾千bp）串聯(lián)重復(fù)組成，分散在整個(gè)基因組中，重復(fù)頻度不等，如Alu家族、rRNA、tRNA和組蛋白等。2答案：（一）高度重復(fù)序列 重復(fù)頻度105。： DNA經(jīng)亞硫酸鈉處理后，非甲基化的C轉(zhuǎn)變?yōu)閁，而甲基化的胞嘧啶保持不變，利用兩套不同的引物擴(kuò)增可判斷甲基化是否發(fā)生的一種特異性PCR。：是指通過(guò)計(jì)算連鎖遺傳標(biāo)志之間的重組頻率，得到基因線性排列從而確定相對(duì)距離的圖譜，又稱連鎖圖。：一種由蛋白質(zhì)和RNA兩部分組成的以自身的RNA為模板，可合成端粒重復(fù)序列而延長(zhǎng)端粒的特殊逆轉(zhuǎn)錄酶。：一組功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因，可能由某一共同祖先基因經(jīng)重復(fù)和突變產(chǎn)生，這一組基因就稱為基因家族。：存在于常染色體由2～6個(gè)核苷酸長(zhǎng)的重復(fù)序列組成，又稱簡(jiǎn)單串聯(lián)重復(fù)序列，以(CA)n、(GT)n、(CAG)n較常見，重復(fù)次數(shù)多為15～60次，總長(zhǎng)度一般在400 bp以下。: 在基因組中僅出現(xiàn)一次的基因稱單拷貝基因，多為編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。6. 簡(jiǎn)述CpG島與DNA甲基化調(diào)控。真核生物基因組 一、選擇題：A. 啟動(dòng)子B. 增強(qiáng)子C. 終止子D. 外顯子A. 基因組龐大B. 線狀雙鏈DNA和二倍體C. 編碼區(qū)遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于非編碼區(qū)D. 重復(fù)序列A. HH2A、H2B、H3B. HH2A、H2B、H3AC. H2A、H2B、HH4 D. H2A、H2B、H3A、H4(mt DNA)與核DNA主要不同之處有A. 非孟德爾的母系遺傳B. 低突變率C. 異質(zhì)性和復(fù)制分離D. 閾值效應(yīng)A. 點(diǎn)突變B. mt DNA的大規(guī)模缺失C. mt DNA的大規(guī)模插入D. 源于核DNA缺陷引起mtDNA缺失 (STR) 位點(diǎn)的不穩(wěn)定性相關(guān)A. 脆性X綜合癥、重癥肌無(wú)力和Huntington 舞蹈癥B. 脆性X綜合癥、重癥肌無(wú)力和Kearnssayre綜合癥C. Kearnssayre綜合癥、慢性進(jìn)行性眼外肌癱瘓和Huntington 舞蹈癥D. Kearnssayre綜合癥、慢性進(jìn)行性眼外肌癱瘓和Kearnssayre綜合癥二、名詞解釋：1. 外顯子與內(nèi)含子2. 單拷貝基因3. 單順反子mRNA4. 微衛(wèi)星DNA5. 斷裂基因6. 基因家族7. 假基因8. 端粒酶9. 后基因組研究10. 遺傳圖譜11. 單核苷酸多態(tài)性12. 甲基特異性PCR三、問(wèn)答題：1. 真核生物染色體基因組的一般特點(diǎn)？2. 真核生物基因組含有的重復(fù)序列有哪些？3. 線粒體DNA與核DNA有哪些不同之處？4. 何謂線粒體病？簡(jiǎn)述線粒體病的遺傳學(xué)分類。經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)位作用，在這種細(xì)菌內(nèi)產(chǎn)生Amp+及Kan+的質(zhì)粒，經(jīng)過(guò)再次接合作用，即可產(chǎn)生含Amp+ Kan+R質(zhì)粒細(xì)菌。
⑵引入新的基因 在插入位點(diǎn)上引入新的基因，如含有抗藥基因R質(zhì)粒的轉(zhuǎn)位因子，轉(zhuǎn)位到染色體中時(shí)，可在該部位出現(xiàn)抗藥性基因。6．⑴引起突變　轉(zhuǎn)位可能引起多種基因突變。這類噬菌體具有整合能力，可以整合到細(xì)菌染色體中去，也稱可轉(zhuǎn)座的噬菌體（transposable phage）。⑶Mu噬菌體 是一類具有轉(zhuǎn)座功能的溫和性噬菌體。⑵轉(zhuǎn)座子 （transposon,Tn）是一類復(fù)雜的轉(zhuǎn)位因子。反向重復(fù)序列的對(duì)稱結(jié)構(gòu)使IS可以雙向插入（正向插入或反向插入）靶位點(diǎn)。按質(zhì)粒的功能分為：F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、Col質(zhì)粒。按質(zhì)粒大小分為：小型質(zhì)粒、大型質(zhì)粒。4．根據(jù)細(xì)菌染色體對(duì)質(zhì)粒復(fù)制的控制程度是否嚴(yán)格可將質(zhì)粒分為：嚴(yán)緊型質(zhì)粒和松弛型質(zhì)粒。質(zhì)粒DNA分子通常具有三種不同的構(gòu)型。如果用DNA酶處理后可使基因組DNA鏈斷裂；如果用RNA酶或蛋白酶處理類核，則類核變得松散，不能維持DNA鏈的折疊結(jié)構(gòu)，這表明RNA和蛋白質(zhì)對(duì)維持類核分子的折疊以及形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)是必不可少的。每個(gè)DNA環(huán)是一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的功能區(qū)，可以獨(dú)立完成不同區(qū)域的基因表達(dá)與調(diào)控。在超螺旋結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，DNA 分子再扭結(jié)成許多活結(jié)樣或花瓣樣的放射狀結(jié)構(gòu)的DNA環(huán)。原核生物沒有典型的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)，基因組DNA位于細(xì)胞中央的核區(qū)，沒有核膜將其與細(xì)胞質(zhì)隔開，但能在蛋白質(zhì)的協(xié)助下，以一定的組織形式盤曲、折疊包裝起來(lái)，形成類核（nucleoid）也稱擬核。原核生物基因組存在著可移動(dòng)的DNA序列，這些可移動(dòng)的DNA序列，通過(guò)不同的轉(zhuǎn)移方式發(fā)生基因重組，使生物體更適應(yīng)環(huán)境的變化?；蚪M中編碼區(qū)所占比例為50﹪，不編碼區(qū)中常常含有基因表達(dá)調(diào)控的序列。編碼順序一般不重疊。操縱子結(jié)構(gòu)是原核生物基因組的功能單位，在原核基因調(diào)控中具有普遍的意義?；蚪MDNA與支架蛋白和RNA結(jié)合在一起，以復(fù)合體的形式存在。五、問(wèn)答題：1．在原核生