【正文】 玉米、大豆等的誘變效率較高，誘變的劑量（強(qiáng)度和時(shí)間）容易控制，在一個(gè)基因組上可以存在多個(gè)突變位點(diǎn)，同時(shí)誘變后生物材料仍保持較高的活性，轉(zhuǎn)基因，基因打靶，激活標(biāo)簽法, G atew ay 全長cDNA 過量表達(dá)技術(shù)和RNA干涉技術(shù)等。EMS誘發(fā)的特點(diǎn)是突變均勻分布于整個(gè)基因組中而不呈現(xiàn)明顯的“熱點(diǎn)”?？梢娫擁?xiàng)成果的重大科學(xué)意義。RNA干涉技術(shù)作為一種新的定點(diǎn)敲除knockdown技術(shù)，賦與了功能基因組學(xué)、基因治療等全新的思路，堪稱生命科學(xué)近年來的革命性的突破。而更令人吃驚的是如果導(dǎo)入相應(yīng)雙鏈RNA（dsRNA），其阻抑效應(yīng)比導(dǎo)入任一單鏈RNA強(qiáng)十倍以上，dsRNA若經(jīng)純化則阻抑效應(yīng)更強(qiáng)。這一技術(shù)的成熟，為功能基因組學(xué)的研究和基因治療提供了新的思路?；虼虬屑夹g(shù)是一種從基因到表型的新研究方法，屬于反求遺傳學(xué)范疇。（2）基因打靶是指通過轉(zhuǎn)染的DNA序列與細(xì)胞內(nèi)同源的基因組序列（靶序列）之間進(jìn)行同源重組，以改變靶序列來研究其結(jié)構(gòu)和功能或進(jìn)行基因治療的技術(shù)。在功能基因組學(xué)的研究中通常運(yùn)用高通量技術(shù)（highthrouput techniques），如DNA微陣列（DNA microarrays），反向遺傳學(xué)（reverse genetics）技術(shù)如基因打靶，轉(zhuǎn)基因以及反義mRNA和RNA干擾等技術(shù)來系統(tǒng)地分析基因功能及基因間相互作用，基因組的時(shí)空表達(dá)以及發(fā)現(xiàn)和尋找新基因等。細(xì)胞中存在著各種不同的染色質(zhì)重塑因子復(fù)合物激活或者沉默基因的表達(dá)。染色質(zhì)重塑是DNA修復(fù)和基因表達(dá)調(diào)控過程中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。染色質(zhì)的重塑因子通過利用ATP水解釋放的能量，引起特定核小體位置的改變(滑動(dòng)),或核小體三維結(jié)構(gòu)的改變, 或二者兼有,將核小體重新排布，從高度致密的染色質(zhì)上解開,從而使啟動(dòng)子區(qū)中的順式作用元件得以暴露, 為反式作用因子（轉(zhuǎn)錄因子）與之結(jié)合提供了空間接觸的可能。答：染色質(zhì)重塑是指導(dǎo)致整個(gè)細(xì)胞分裂周期中染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和位置改變的過程。5. 轉(zhuǎn)座子的遺傳學(xué)效應(yīng)與應(yīng)用答：① 改變?nèi)旧w結(jié)構(gòu)，引起的染色體DNA缺失或倒位；② 誘發(fā)基因突變；③ 調(diào)節(jié)基因表達(dá)，很多轉(zhuǎn)座子帶有增強(qiáng)子，有的還含有啟動(dòng)子，能促進(jìn)基因的轉(zhuǎn)錄活性；轉(zhuǎn)座子插入某個(gè)基因的內(nèi)含子或外顯子中而影響該基因表達(dá)；④產(chǎn)生新的變異；⑤應(yīng)用轉(zhuǎn)座子標(biāo)記技術(shù)，克隆目的基因；⑥以轉(zhuǎn)座因子作為基因工程載體，進(jìn)行轉(zhuǎn)基因等遺傳操作。對(duì)于真核生物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，主要是順式作用元件（cisacting element）與反式作用因子(transacting factor)的相互作用。但也存在轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控，例如反義RNA的調(diào)控，翻譯的調(diào)控，RNA開關(guān)等。整個(gè)二聚體呈Y型結(jié)構(gòu)。多數(shù)HLH附近有一強(qiáng)堿性的氨基酸區(qū)是DNA的識(shí)別和結(jié)合所必需的5 亮氨酸拉鏈的結(jié)構(gòu)域，亮氨酸拉鏈（leucine zipper，ZIP）的雙親α螺旋其疏水面亮氨酸突出，并與另一個(gè)平行的亮氨酸拉鏈蛋白的亮氨酸突出交錯(cuò)排列，盤繞成卷，兩個(gè)右手螺旋互相纏繞，每7個(gè)殘基構(gòu)成一個(gè)完整的重復(fù)單位，因此亮氨酸在拉鏈區(qū)每隔6個(gè)氨基酸殘基重復(fù)出現(xiàn)一次，兩個(gè)蛋白形成同源二聚體或異源二聚體。的彎曲。反向平行的β折疊區(qū)含有2個(gè)半胱氨酸，與其后α螺旋中的2個(gè)組氨酸一起與鋅原子結(jié)合，而由鋅原子穩(wěn)定了整個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)。典型的鋅指蛋白往往有多個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)域，兩個(gè)鋅指之間由7~8個(gè)氨基酸相連。大量的實(shí)驗(yàn)證明這兩大功能域是分開的，但不同轉(zhuǎn)錄因子的活性域其激活方式可能不同。3. 常見的反式作用因子有哪些？其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是什么？答：轉(zhuǎn)錄因子有數(shù)千種之多，從其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)來看，主要有兩大功能區(qū)，①DNA結(jié)合域，②活性域?？蓸O大的提高轉(zhuǎn)錄的效率，但對(duì)其起點(diǎn)、特異性等無影響。GC盒：位于TATA上游特定位置上（90bp），一個(gè)或幾個(gè)含有高GC序列的元件，有位置依賴性，但無方向依賴性，它與SP1蛋白結(jié)合后可以促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的效率。絕大多數(shù)Ⅱ型轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)子均含有TATA盒，一致性序列為TATAAAA，常在起始點(diǎn)上游25bp — 30bp區(qū)，TATA盒對(duì)有些Ⅱ型轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)子的功能是十分重要。③ RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子由四部分元件組成，即轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)、TATA盒、上游元件和遠(yuǎn)上游元件。另一種啟動(dòng)子是與常見的啟動(dòng)子相似，又稱上游啟動(dòng)子（upstream promoter）。② RNA聚合酶Ⅲ啟動(dòng)子可分為兩種類型。2. 原核生物與真核生物的啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)有什么差別？答：原核生物的啟動(dòng)子特點(diǎn)：① Pribnow框：TATAAT，位于10左右，是 RNA聚合酶的牢固結(jié)合位點(diǎn)② Sextama框：TTGACA，位于35附近，是 RNA聚合酶的初始結(jié)合位點(diǎn)③ 上述二者及之間的距離決定轉(zhuǎn)錄效率，一般距離17bp左右④ CAP位點(diǎn)是cAMP受體蛋白復(fù)合物在啟動(dòng)子上的的結(jié)合位點(diǎn)真核生物有三類RNA聚合酶，與此對(duì)應(yīng)，有三類不同的啟動(dòng)子：① RNA聚合酶Ⅰ識(shí)別的啟動(dòng)子，由起始位點(diǎn)的核心啟動(dòng)子和其上游控制元件兩部分組成。簡答題： 1. 核小體與核小體定位在基因表達(dá)及其調(diào)控中有何作用？答：核小體的形成及其在染色質(zhì)上的精確定位導(dǎo)致染色質(zhì)結(jié)構(gòu)不均勻，表現(xiàn)為某些區(qū)域核小體占據(jù)率高、某些區(qū)域核小體缺乏。中心法則（central dogma），指出遺傳信息從DNA傳遞至RNA，再傳遞至多肽。 組蛋白密碼（histone code）：組蛋白氨基端的各種修飾（甲基化、乙?；⒘姿峄?、泛素化等）及組合通過改變?nèi)旧|(zhì)的結(jié)構(gòu)或產(chǎn)生效應(yīng)蛋白質(zhì)的結(jié)合位點(diǎn)而影響基因的表達(dá)活性，從而調(diào)控下游的細(xì)胞學(xué)過程。轉(zhuǎn)座子沉默（transposon silencing）:宿主積累了轉(zhuǎn)座子的多個(gè)拷貝，從而阻遏轉(zhuǎn)座發(fā)生。無位置及方向性，但可能有組織細(xì)胞特異性，一般能使基因轉(zhuǎn)錄頻率增加10～200倍，有的甚至可以高達(dá)上千倍。染色質(zhì)重塑因子在組成及功能上不同，但都包含類Snf2超家族的ATP酶亞基 增強(qiáng)子（enhancer）：該DNA序列可增加與其連鎖基因轉(zhuǎn)錄的頻率。染色質(zhì)重塑(chromatin remodeling) :是表觀遺傳修飾中一種常見的方式，是指導(dǎo)致整個(gè)細(xì)胞分裂周期中染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和位置改變的過程。母系印跡(maternal imprinting) :來自母本的等位基因（母源等位基因）不表達(dá)，而父源等位基因表達(dá)的現(xiàn)象。當(dāng)2個(gè)蛋白質(zhì)分子平行排列時(shí)，亮氨酸之間相互作用形成二聚體，形成“拉鏈”。酵母雙雜交(yeast twohybrid)：利用雜交基因通過激活報(bào)道基因的表達(dá)探測蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間的相互作用。程序性細(xì)胞死亡/凋亡（programmed cell death/apoptosis)：細(xì)胞應(yīng)答一類刺激劑，引起一連串特征性的反應(yīng)，從而啟動(dòng)導(dǎo)致細(xì)胞死亡的途經(jīng)。它指的是使用對(duì)確定的靶標(biāo)蛋白高度專一的小分子化合物來進(jìn)行基因功能分析和發(fā)現(xiàn)新的藥物先導(dǎo)化合物。核心啟動(dòng)子（core promoter）：是指在體外測定到的由RNA polⅡ進(jìn)行精確轉(zhuǎn)錄起始所